不同时限缺血预处理对大鼠胆管缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究不同时限缺血预处理对大鼠肝内胆管缺血再灌注损伤保护作用的差异及其与Bcl-2、Bax表达的相关性.方法健康雄性SD大鼠加只,随机分为正常组(SO组)、缺血再灌注组(IR组)、5 min缺血预处理组(IP 5 min组)、10 min缺血预处理组(IP 10 min组)四组,每组10只.制备IR及IP模型,取肝门周围组织行免疫组化、原位杂交染色检测Bcl-2及Bax基因和蛋白的表达,TUNEL染色检测胆管上皮细胞凋亡并计算凋亡指数(AI). 结果 TUNEL染色显示胆管上皮细胞凋亡水平以SO组最低、IR组最高、IP 5 min组、IP 10 min组分别居二三位,各组两两比较均有统计学意义.免疫组化染色及原位杂交染色Bcl-2 mRNA和蛋白在各组中的表达程度与TUNEL染色提示的凋亡程度相同,且两两比较有统计学意义.Bax mRNA和蛋白在SO组表达低,而在IR及IP各组表达增高,但IR组、IP 5 min组和IP 10 min组两两比较并无统计学意义(P>0.10). 结论 ①缺血预处理对胆管上皮细胞的保护作用可能与激活上调胆管上皮细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达有关,而Bax表达与保护作用无直接关系.②5 min缺血预处理过程对肝脏缺血再灌注保护作用较好.     

缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护

目的反复短时间缺血可保护组织免受随之而来的长时间缺血性损伤，这种现象称之为缺血预处理（ＩＰＣ）．现探讨ＩＰＣ在肝脏缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）损伤中的作用及机制．方法采用大鼠肝脏原位Ｉ／Ｒ模型，术前腹腔注射Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ）２５０ｍｇ·ｋｇ－１或Ｌ硝基精氨酸（ＬＮＮＡ）１５ｍｇ·ｋｇ－１，分别观察血一氧化氮（ＮＯ），ＡＬＴ，ＡＳＴ；肝组织ＮＯ，脂质过氧化物（ＬＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及肝组织病理损伤．结果肝组织ＬＰＯ含量（多少ｖｓ多少）、血清ＡＬＴ（多少ｖｓ多少）、ＡＳＴ（多少ｖｓ多少）活性明显低于Ｉ／Ｒ组，ＩＰＣ显著改善了由Ｉ／Ｒ引起的肝脏损伤．这种保护作用完全被ＮＯ供体（ＬＡｒｇ）或ＮＯ合酶抑制剂（ＬＮＮＡ）消除．同时，各组之间血、肝ＮＯ含量无显著差异．结论ＩＰＣ对肝脏Ｉ／Ｒ损伤呈现出明显的保护作用，其机理是灭活了氧自由基．ＮＯ在肝脏ＩＰＣ中似乎无明显作用．     

丙氨酰-谷氨酰胺对人结肠癌细胞株增殖活性的影响

目的 研究丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)对人结肠癌细胞株增殖活性的影响。方法 经体外培养结肠癌细胞,加入不同浓度的Ala-Gln后收集细胞,应用流式细胞技术,检测癌细胞的细胞周期及凋亡情况。结果 随着细胞培养液中的浓度从1.0 mmol/L递增至8.0 mmol/L时,细胞凋亡率从8.94％降至3.78％,Ala-Gln浓度与细胞凋亡率呈负相关(r=-0.880,P<0.01)。加入氟尿嘧啶(5-Fu)后细胞凋亡率从18.01％增至36.01％,Ala-Gln浓度与细胞凋亡率呈直线正相关(r=0.942,P<0.01)。进一步增加Ala-Gln浓度,从10.0 mmol/L递增至45.0 mmol/L时,细胞凋亡率分别为16.89％、15.46％、18.47％、22.08％、18.75％、16.56％、20.89％、15.57％,细胞凋亡率与Ala-Gln浓度变化无直线相关关系。结论 在一定浓度范围内,Ala-Gln可减少结肠癌细胞的凋亡,促进G_0/G_1期的细胞增多,增强化疗药物的作用。     

甘氨酸抗内毒素性休克和肝损伤的作用及其机制

目的 探讨甘氨酸(Gly)对内毒素(ET)性休克和ET性肝损伤的作用和机制。方法 尾静脉注射脂多糖(LPS)复制小鼠ET休克和肝损伤模型，预防和治疗各组于不同的时间点注射Gly。观察死亡率。另取小鼠分为休克组和Gly治疗组，各组分别于注射LPS后1、2、4、6h观察丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)；肿瘤坏死因子α(TNF-α)和枯否细胞(KC)脂多糖受体(CD14)、清道夫受体(SR)和核转录因子一出(NF一出)的表达。结果 肝损伤指标和NF-kB表达与KC CD14的表达呈正相关和SR表达呈负相关。Gly对ET性休克有很好的防治作用，可降低ALT、AST和肝组织TNF-α含量，可明显下调KC CD14的表达和NFkB的表达，上调KCSR的表达，尤以4、6h为著。结论Gly可有效防治ET性休克和改善ET性肝损害，其机制与Gly阻遏KC CD14表达、增强SR的表达进而抑制KC NF-kB的活化有关。     

缺血预处理对肝缺血再灌注损伤肝实质细胞的影响

目的 通过观察缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤肝实质细胞凋亡影响,探讨肝缺血再灌注损伤机制及肝缺血预处理对肝细胞的保护作用.方法 35只Wistar大鼠,随机分为假手术 (SO)组5只;缺血再灌注3、6、24 h组(IR3 h、IR6 h、IR24 h)各5只;缺血预处理3、6、24 h组(IP3 h、IP6 h、IP24 h)各5只.IR组半肝缺血60 min,再灌注3、6、24 h;IP组为缺血前先行5 min缺血、5 min复流,并重复2次,然后行半肝缺血60 min,再灌注3、6、24 h.分别取材检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、肝组织匀浆丙二醛(MDA).结果IR各组血清ALT、肝组织匀浆MDA均较SO组有显著性升高(P<0.05);经缺血预处理后,ALT、MDA显著下降(P<0.05).结论肝脏缺血再灌注各时间点都有肝细胞损伤,且24 h内随着再灌注时间增加,;缺血预处理能够抑制肝细胞凋亡,减轻肝细胞再灌注损伤.