血管紧张素Ⅱ对增生性瘢痕成纤维细胞PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对增生性瘢痕成纤维细胞磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/Akt,PI3K/Akt)信号通路的影响.方法 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,用免疫荧光组织化学染色检测细胞Ang Ⅱ受体AT,和AT_2的表达.以PI3k活性测定法和Western Blotting法检测细胞PI3K的活性和Akt的磷酸化.结果 免疫荧光组织化学染色结果显示培养的增生性瘢痕成纤维细胞同表达AT_1和AT_2受体.Ang Ⅱ(10~(-9)～10~(-7)mol/L)刺激可增加细胞Akt的磷酸化和P13K的活性.AT_2受体拮抗剂PD1233191可显著增强AngⅡ诱导的细胞Akt磷酸化和PDK活性增加(P<0.05);AT_1受体拮抗剂Valsartan可显著抑制AngⅡ诱导的细胞Akt磷酸化和PDK活性增加(P<0.05).结论 Ang Ⅱ通过其受体AT_1和AT_2可调控增生性瘢痕成纤维细胞Akt磷酸化和PI3K的活性.     

胆囊腺肌症的发病机制及诊治研究进展

胆囊腺肌症(gallbladder adenomyomatosis,GA)是一种临床上较少见、病因及发病机制不明的良性疾病.随着影像检测技术的发展,其诊断有进一步提高.部分学者认为GA与胆囊癌的形成有关,但尚存争议.GA的治疗,有主张胆囊切除,以预防其恶变,也有学者认为部分GA可行随访.目前尚无共识.本文对GA的病因、...     

布地奈德联合利巴韦林雾化吸入治疗小儿毛细支气管炎的效果观察

目的 观察布地奈德联合利巴韦林雾化吸入治疗小儿毛细支气管炎的临床效果.方法 选择我院2011年1月至2012年12月住院治疗的毛细支气管炎患儿84例,随机均分为观察组和对照组.观察组予布地奈德混悬液加利巴韦林雾化吸入治疗,对照组仅予利巴韦林雾化吸入治疗,一个疗程后观察比较两组患儿的治疗效果及不良反应.结果 观察组咳嗽消失时间、憋喘消失时间、肺部哆音消失时间均少于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);观察组总有效率明显高于对照组(92.86％ vs.76.19％),差异有统计学意义(P＜0.05).两组均未观察到明显的药物不良反应.结论 应用布地奈德混悬液联合利巴韦林雾化吸入治疗小儿毛细支气管炎,效果显著,不良反应少,值得临床推广应用.     

超广谱β-内酰胺酶的分类与分子进化研究进展

本文综述了超广谱β－内酰胺酶（extended－spectrum β－lactamases,ESBLs）的分类研究进展以及ESBLs分子进化研究进展。ESBLs可分为TEM族、CTX－M族、OXA族及一些不属于上述任何一个家庭的类型，其中以TEM族及SHV族ESBLs的种类最多，CTX－M族、OXA族ESBLs的种类也在迅速增多。TEM族、SHV族ESBLs通常由其亲代广谱酶发生氨基酸取代衍生而来，氨基酸的插入和缺失也可使酶具有ESBLs活性。ESBLs的中性或近中性突变可能在其它突变的特定背景下发挥潜在作用，分析这类突变对ESBLs的分子进化及分子流行病学研究有重要意义。ESBLs进化的选择压力通常归因于氧亚胺β－内酰胺类抗生素的使用强度，这类抗生素的选择的选择压力还地启动子、拷贝数及其它基因起作用。     

β-内酰胺酶的分类及构效关系研究进展

产β-内酰胺酶是革兰阴性菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要原因。近年来,β-内酰胺酶的种类迅速增加,掌握β-内酰胺酶的分类、特性、结构等方面的知识对临床合理使用抗生素有理论指导意义。本文介绍了β-内酰胺酶的最新分类及各类酶的主要产生菌,简要阐述了β-内酰胺酶与其水解β-内酰胺类抗生素相关的主要结构特点,并对其构效关系研究方面的最新进展作一简要综述。     

丹参抗严重烧伤早期中性粒细胞-内皮细胞粘附机理的研究

目的：研究丹参对兔严重烧伤早期，中性粒细胞（PMN）与内皮细胞（EC）粘附的作用及对血浆肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的影响。方法：24只日本大耳兔，建立兔30％Ⅲ度烧伤模型，随机分为丹参组和生理盐水组。分别于烧伤后即刻，2、4、8、16、24、48h，取血分离获得PMN，与体外培养的兔血管EC作用测定PMN－EC的粘附率，并测定各时点血浆TNF－α值。结果：烧伤后即刻生理盐水组与丹参组粘附率均升高，生理盐水组伤后4h达高峰，丹参组2、4、8、16、24、48h各时点的粘附率均低于生理盐水组（P＜0．05）。生理盐水组于伤后2hTNF－α开始升高，8h达高峰，48h仍高于正常，丹参组2、4、8、16、24、48h各时点的TNF－α的值低于生理盐水组（P＜0．05）。结论：丹参能降低严重烧伤后血浆TNF－α的水平，进而抑制PMN－CE粘附，改善微循环及减轻组织病理损伤。     

丹参对兔烧伤早期中性粒细胞与内皮细胞粘附抑制作用的实验研究

目的 研究丹参对严重烧伤早期中性粒细胞（PNM）与内皮细胞粘附的作用及机制。方法 采用兔30%Ⅲ度烧伤模型，24只日本大耳兔随机分为丹参组和生理盐水组，分别烧伤后即刻、2、4、8、16、24、48h取血分离获得PMN，与体外培养的兔血管内皮细胞作用测定PMN-EC粘附率及其PMN表面粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18值。结果 烧伤后即刻两组粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18及PMN-EC粘附率均升高，生理盐水组伤后4h达高峰；丹参组伤后2、4、8、16、24h的CD11a/CD18、CD11b/CD18显著低于生理盐水组。结论 丹参能降低粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18表达，抑制PMN-EC粘附，改善微循环及减轻PMN-EC粘附所致的组织损伤。     

人胰岛新生相关蛋白在毕赤酵母中的表达和纯化

目的 将在毕赤酵母中分泌表达具有生物学活性的重组人胰岛新生相关蛋白(rhINGAP),用于INGAP的生理功能研究和动物实验.方法 通过PCR扩增INGAP基因,插入到重组质粒α/pUC18的α因子信号序列的XhoⅠ和EcoRⅠ酶切位点处,再将融合基因αINGAP重组到表达质粒pPIC9K的BamHⅠ和EcoRⅠ之间,SalⅠ酶切线性化重组质粒INGAP/pPIC9K,电穿孔转化毕赤酵母,营养缺陷型培养基MD和G418筛选含高拷贝表达盒的酵母转化子,PCR鉴定是否含有目的 基因INGAP,甲醇诱导rhINGAP的表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的蛋白,用ELISA定量测定生物学活性.结果 成功构建了重组表达质粒INGAP/pPIC9K, 筛选得到3个阳性转化子,表达产物具有良好的抗原活性.结论 实现了rhINGAP在毕赤酵母中的高效分泌性表达及纯化.     

大肠埃希氏菌及肺炎克雷伯氏菌超广谱β-内酰胺酶基因的核苷酸序列测定及分子进化树的构建

了解四川大学华西医院产ESBLs肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的TEM或SHV型ESBLs，并探讨ESBLs进化及分类关系。方法 对用PCR法扩增的产ESBLs比大肠埃希氏菌及肺炎克雷伯氏菌的TEM型及SHV型ESBLs基因进行核苷酸序列测定，通过网上相似性检索确定其编码酶的亚型，并利用生物信息学软件ClustalX1．8构建分子进化树，对ESBLs进化及分类关系进行探讨。结果 本研究检出的ESBLs亚型为SHV—2和TEM—19。根据进化和同源关系，ESBLs可分为了TEM型、SHV型、CTX—M型、OXA型及一些不属于上述任何一个家族的类型，其中CTX—M族酶分为四组。结论 本研究检出的ESBLs比亚型以SHV—2为主。本研究构建的ESBLs的分子进化树较好地反映了ESBLs的进化和分类关系，是其分类研究的新手段。