“标本配穴”电针预处理抗脑缺血再灌注损伤的效应研究

目的从腧穴配伍角度,比较"标本配穴"电针与常规配穴电针预处理对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的防治效应,观察"标本配穴"电针预处理抗脑缺血再灌注损伤的可能优势作用,为临床腧穴配伍提供参考依据。方法 SPF级雄性SD大鼠100只,随机分为假手术组、模型组、标本配穴组、常规配穴组,每组各25只。模型组采用改良的MCAO线栓法缺血2h后行再灌注,制备大鼠右侧局灶性脑缺血再灌注损伤模型。两电针组造模前取相应腧穴接HANS-200电针仪预处理,疏密波,频率2/100Hz,强度1mA,每15min为1个刺激单元(通电10min,留针5min),连续重复4次,共计1h。脑缺血再灌后3h对各组进行神经行为学评分,用TTC法检测梗死百分比,检测海马组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活性,HE染色观察神经元形态变化。结果电针预处理后两电针组行为学评分、梗死百分比和MDA含量均较模型组降低(P0.01),SOD活性值和GSH-Px活性值均较模型组升高(P0.01),海马神经元损伤较模型组减轻;两电针组之间比较,标本配穴组行为学评分、梗死百分比和MDA含量低于常规配穴组(P0.05),SOD活性值及GSH-Px活性值均高于常规配穴组(P0.01),海马神经元损伤程度较常规配穴组轻。结论 "标本配穴"电针预处理可能是通过激活大量抗自由基酶,减轻大量自由基对神经元的氧化应激损伤抗脑缺血再灌注损伤,且这种抗损伤效应优于常规配穴电针预处理。     

细辛散剂对小鼠重要脏器的病理学影响

细辛在临床运用已有悠久历史,其卓越的疗效为世人所公认,但对其毒性的认识还不够深入.本文仅就细辛散剂急性毒性对小鼠肺、肝、心、肾等重要脏器的病理损害进行研究,现报告于下:     

细辛含药血清制备方法的研究

目的:从方法学的角度对细辛含药血清的制备进行探讨.方法:选用SD大鼠,细辛根散剂1.78g/kg,加蒸馏水3ml灌胃,每日1次,连续8天.末次给药2h后眼眶采血,分离血清,观察实验大鼠DRG神经元钾电流(IK)和钠电流(INa)变化.结果:细辛含药血清组IK和INa变化明显,与空白血清组比较有显著差异(P《0.05).结论:该方法制备细辛含药血清是可行的.     

标本配穴电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠海马沉默信息调节因子1的影响

目的基于沉默信息调节因子1(silent information regulation 1, SIRT1)途径探讨标本配穴电针预处理抗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为A组、B组和C组,每组20只。A组仅分离右侧颈总动脉,不给予其他处理;B组采用改良的MCAO线栓法制备大鼠右侧局灶性脑缺血再灌注损伤模型;C组造模前取百会、肾俞、三阴交行电针预处理。比较各组再灌注3 h后神经行为学评分,并采用TTC染色法测定脑梗死容积百分比,采用HE染色法观察海马神经元形态,采用Western-blot方法检测SIRT1和过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)蛋白表达。结果 C组神经行为学评分和脑梗死百分比较B组均显著降低,SIRT1和PGC-1α蛋白表达较B组均显著升高,两组比较差异均具有统计学意义(P0.01)。结论标本配穴电针预处理可能通过上调内源性脑SIRT1和PGC-1α蛋白表达而减轻脑缺血再灌注损伤。     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后HSP70阳性神经元表达的影响

目的探讨脊髓继发性损伤的病理生理机制及三七总皂甙(Panaxnotoginsengsaponins,PNS)防治该病的作用机理。方法以Wistar大鼠65只为研究对象,分为空白组、假手术组、溶媒对照组、三七总皂甙(PNS)组,各实验组按2、6、12、24小时相点观察,Allen's脊髓损伤模型100g*cm致伤脊髓。各组在相应时相点取脊髓组织,采取免疫细胞化学方法观察脊髓组织热休克蛋白70(HeatShockProtein70,HSP70)阳性神经元的表达变化。结果脊髓HSP70阳性神经元表达PNS组>溶媒对照组>假手术组>空白组。结论HSP70参与了脊髓继发损伤的病理生理机制,PNS可能通过诱导脊髓组织HSP70神经元的表达而起保护作用。     

“双固一通”针法对家兔急性心肌缺血保护作用的研究

目的观察＂双固一通＂针法对实验性急性心肌缺血家兔心脏活动及超微结构变化的影响。方法30只家兔随机分为正常组、模型组、电针组,监测各组动物心电图、动脉血压等指标,在结扎左冠状动脉前降支建立的心肌缺血模型上,观察＂双固一通＂针法电针刺激对缺血损伤心肌超微结构及功能活动改变的影响。结果＂双固一通＂针法电针组对缺血心肌损伤具有明显的保护作用,与模型组比较,电针能促进缺血后心电图ST段、T波和动脉血压的恢复（P〈0.05）,电针治疗后心肌组织损伤改变减轻,心肌肌纤维肌丝无明显坏死、溶解,线粒体少量空泡变化。结论针灸＂双固一通＂法可明显降低缺血心肌损伤的结构改变,能有效改善心肌缺血的电活动变化,有利于心肌泵血功能的恢复,说明固护正气在治疗疾病中有着重要作用。     

不同配穴预处理对心肌缺血模型大鼠抗自由基酶的影响

目的观察不同配穴电针预处理对心肌缺血模型大鼠丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的影响。方法将经过筛查心电图无异常的50只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、标本配穴防治组、标本配穴对照组、远近配穴对照组,每组10只。以盐酸异丙肾上腺素(ISO)注射大鼠皮下的方法制作心肌缺血模型;所有配穴针刺组在造模前进行电针针刺预处理,10min,1m A,疏密波,2-100Hz。治疗后,检测MDA、SOD及GSH-PX。结果标本配穴防治组的心肌组织MDA含量明显低于模型组、标本配穴对照组和远近配穴对照组(均P0.01),与正常组间无明显差异(P0.05);而总SOD活力、GSH-PX酶活力则均高于模型组、标本配穴对照组和远近配穴对照组(P0.01),低于正常组(P0.01)。结论标本配穴对抗氧自由基的效果更明显优于其他配穴组,能有效预防心肌内脂质过氧化,能更好的保护心肌细胞线粒体免受损伤。     

针刺预处理对脑缺血再灌注大鼠中枢杏仁核CRF样蛋白表达的影响

目的:采用免疫组织化学技术,探讨肾俞、百会穴针刺预处理对脑缺血再灌注后不同时间段大鼠中枢杏仁核CRF的表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠130只,随机分成5组;以双侧肾俞、百会穴电刺激为针刺预处理方式,以颈动脉引流法行全脑缺血再灌注造模;脑组织恒冷箱连续冠状切片,免疫细胞化学ABC反应,图像分析系统行杏仁中央核群促肾上腺皮质激素释放因子样阳性免疫面积、平均吸光度检测。结果:各组CRF表达在不同时间段出现显著性变化。术后/针后6h,与空白对照比较,各组CRF表达显著升高(P<0.05);术后/针后24h,除空白对照组外各组CRF表达均出现明显回落,组间仍存在显著差异(P<0.05);术后/针后72h,脑缺血再灌注组及针刺预处理脑缺血再灌组CRF表达仍高于正常水平且两组间差异明显(P<0.05),而针刺预处理对照组及假手术对照组均已回落至正常水平(P>0.05)。结论:脑缺血再灌注损伤可导致中枢杏仁核CRF样蛋白的强烈表达;肾俞、百会穴针刺预处理对脑缺血再灌注所致的中枢杏仁核CRF的异常表达具有明显的调控作用。     

电针内关穴对AMI大鼠自主神经与中枢P物质、一氧化氮合酶的影响

目的：探讨电针大鼠内关穴抗急性心肌缺血（AMI）损伤的自主神经效应路径和可能的有效物质。方法：SD大鼠随机分为正常组（A组）、模型对照组（B组）、电针内关组（C组）,每组6只。各组分离颈部右侧迷走神经、左侧交感神经,BL-420E＋生理仪记录放电情况。B、C组Pit股静脉注射制作AMI模型,C组造模后5min电针左侧内关穴治疗。最后免疫组化ABC法、NADPH-黄递酶组化法分别检测各组大鼠下丘脑室旁核（PVN）、延髓迷走神经复合区及脊髓（C8-T2）外侧角的P物质（SP）和一氧化氮合酶（NOS）的表达。观测各组大鼠心交感神经、迷走神经放电频率变化以及治疗前后自主神经SP、NOS灰度值。结果：造模前A、B、C组迷走神经放电频率分别为（5.12±0.67）、（5.13±0.36）、（5.05±0.47）次/min,交感神经放电频率分别为（23.21±3.23）、（22.84±2.18）、（23.04±4.32）次/min,组间比较均无差异;造模后0min时B、C组迷走神经放电频率增加、交感神经放电频率减少,与A组比较有显著差异（P〈0.05）;造模后20minC组迷走神经和交感神经放电频率恢复明显,与A组比较均无差异,与B组比较均有差异（P〈0.05）。A组PVN、延髓迷走神经复合区、脊髓（C8-T2）外侧角的SP灰度值分别为（115.44±12.20）、（84.64±14.50）、（43.32±12.14）,NOS灰度值分别为（98.03±14.72）、（64.60±12.33）、（40.33±10.42）,B组各部位SP灰度值小于A组,组间有差异性（P〈0.05）,C组各部位SP灰度值均高于A、B组,组间比较有差异性（P〈0.05）;B组各部位NOS灰度值增加（P〈0.05）,C与A组各部位NOS灰度值无明显差异。结论：电针内关穴对AMI大鼠的保护效应与自主神经及中枢SP、NOS的协调作用密切相关。     

延髓腹外侧区在电针内关穴抗急性心肌缺血中的作用

目的探讨延髓腹外侧区(VLM)在电针内关穴改善家兔急性缺血心肌细胞动作电位影响中的作用。方法在电针内关穴对家兔急性心肌缺血(AMI)保护作用的基础上，进一步观察VLM贴敷纳络酮阻断后电针内关穴对缺血心肌细胞动作电位的影响。结果VLM阻断组分别与假手术组、急性心肌缺血组及VLM假阻断组比较，在各个时段的ST段电位均有明显升高，MAPA、MAPD50、MAPD90均有明显降低，差异有统计学意义(P＜O．05)。结论VLM贴敷纳络酮阻断后，电针内关穴治疗家兔AMI时，心电图sT段电位及心肌细胞动作电位MAPA、MAPD50、MAPD90恢复的时程延长，电针内关穴对缺血心肌的保护作用减弱。