曲妥珠单抗对HER-2阳性早期乳腺癌骨髓微转移的影响

目的：检测HER-2阳性的早期乳腺癌患者应用曲妥珠单抗（Trastuzumab）治疗前后骨髓微转移的改变,探讨HER-2基因及Herceptin对骨髓微转移的影响。方法：应用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测15例HER-2阳性乳腺癌及18例HER-2阴性乳腺癌患者术前及化疗后骨髓CK19的表达水平,其中10例HER-2阳性乳腺癌患者在化疗结束后,继续应用Herceptin治疗,3月后再次抽取骨髓标本,qRT-PCR检测CK19的表达水平。结果：手术前,14例HER-2阳性乳腺癌患者骨髓CK19表达阳性（93.3%）,而HER-2阴性患者8例CK19表达阳性（44.4%）,二者差异显著（P=0.000）。化疗后,12例HER-2阳性乳腺癌患者CK19表达阳性（80.0%）,而HER-2阴性患者3例表达阳性（16.7%）,二者差异显著（P=0.000）。10例HER-2阳性乳腺癌患者化疗后继续应用Herceptin治疗3月后,骨髓CK19的表达明显下降（102.78±98.24 vs 66.92±49.18,P=0.036）。结论：HER-2基因的表达与早期乳腺癌患者骨髓微转移密切相关,而Herceptin可以降低骨髓微转移病灶,提示骨髓微转移情况可以作为Herceptin治疗疗效的早期预测指标。     

乳腺癌新辅助化疗后细胞增殖与凋亡的变化及临床意义

目的：观察乳腺癌患者新辅助化疗前后细胞增殖及凋亡的变化，分析与化疗疗效的关系。方法：51例乳腺癌患者术前经Mammotome穿刺活检确诊，在CEF方案新辅助化疗前及化疗2个周期后分别进行癌组织中Ki-67的免疫组织化学染色和TUNEL原位细胞凋亡检测，并评价化疗疗效。结果：新辅助化疗前Ki-67阳性表达率及凋亡指数（AI）分别为23．2％和34．1％，化疗2个周期后Ki-67阳性表达率及A1分别为7．8％和67．5%，两者差异有统计学意义，P=0．004，P=0．006；化疗疗效临床CR5例，PR40例，SD6例，无疾病进展期病例，新辅助化疗疗效与Ki-67表达下降及肿瘤细胞凋亡增加显著相关。结论：新辅助化疗可明显抑制乳腺癌细胞的增殖，诱导凋亡，与化疗疗效密切相关。     

下肢深静脉血栓模型制备更接近临床血栓形成的可行性研究(英文)

目的为研究腔内超声溶栓对动物模型静脉血栓的疗效而评价一种制备静脉血栓模型方法的可行性。方法犬20只采用自身对照研究,犬一侧后肢股静脉为实验侧,另一侧为对照侧。实验侧行股静脉近、远端分别结扎,人为造成犬后肢股静脉血流缓慢;对照侧行手术,但不结扎血管。然后于术后第1,4,7天分别观察犬后肢变化,切取血管标本做病理观察,了解血栓形成情况。结果术后第1天实验侧全部出现后肢肿胀,轻微跛行,病理切片显示:6条静脉全部都形成血栓;对照侧没有出现后肢肿胀及跛行,6条静脉都无血栓形成。第4,7天实验侧后肢肿胀加重,跛行,病理切片显示:实验侧14条静脉血栓充满管腔,为混和血栓;对照侧没有出现后肢肿胀及跛行,14条静脉无血栓形成。结论采用静脉单纯结扎法制备犬静脉血栓模型,血栓形成更接近临床血栓形成过程。     

肢体负压对周围动脉闭塞犬脊髓及背根神经节降钙素基因相关肽免疫反应性神经的影响

背景伤害性刺激可引起脊髓及背根神经节降钙素基因相关肽分泌的增多,及其微血管的强烈扩张.应用肢体负压治疗周围动脉闭塞性病变时,其扩张血管,减轻肢体疼痛症状的作用是否伴随着降钙素基因相关肽合成增多.目的对周围动脉闭塞性病变犬行肢体负压干预后,检测脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维的变化.设计随机分组,实验组及空白组对照的验证性研究.单位一所军医大学医院普外科.材料实验于2003-01/08在第四军医大学西京医院完成.成年健康杂种犬17只,体质量(12～18)kg,雌雄不限.干预犬17只,随机分为3组.①治疗组10只将动物制作左后肢缺血模型,制作后14 d,开始行患肢负压治疗10 d,结束后,取L1～5的脊髓及背根神经节,行免疫组化染色,检测降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维.②单纯造模组5只造模后不进行患肢负压治疗,处理、检查均同治疗组.③正常对照组2只不行缺血模型制作及负压治疗,仅行免疫组化染色检测.主要观察指标3组犬脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维分布.结果17只犬均进入结果分析.①脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维单纯造模组明显高于治疗组和正常对照组[(75.00±4.30)%,(68.20±2.60)%;(58.20±5.10)%,(52.20±6.20)%;(37.00±4 20)%,(34.00±1.40)%,P＜0.01].②阳性神经纤维检测结果治疗组比单纯造模组染色变浅,但仍较正常对照组加深,3组比较差异意义显著(P均＜0.01).结论肢体负压疗法可以减少周围动脉闭塞性病变后脊髓及背根神经节中降钙素基因相关肽免疫反应阳性纤维的合成与痛觉的传递,即减少伤害性刺激的传入,从而达到缓解肢体疼痛的效果.     

肢体负压对周围动脉闭塞犬背根神经节P物质免疫反应阳性神经纤维的影响

目的:观察肢体负压对周围动脉闭塞性病变犬背根神经节中P物质免疫反应阳性神经纤维的影响。方法:犬17只,随机分治疗组10只,非治疗组5只和正常对照组2只,治疗组和非治疗组均将动物制作左后肢缺血模型,治疗组在模型制作后14d,开始行患肢负压治疗10d(15min/次);非治疗组不做负压治疗。3组均行背根神经节免疫组化染色,检测P物质免疫反应阳性纤维。结果:背根神经节中的P物质免疫阳性神经纤维在各组中的变化:正常对照组(35.50±6.4)%,非治疗组(67.00±3.3)%,治疗组(51.70±4.0)%。非治疗组背根神经节中,患侧P物质免疫反应阳性纤维均较正常组染色明显加深(LSD-t=9.320,P<0.01),而治疗组较非治疗组染色变浅(LSD-t=6.915,P<0.01),但仍较正常组加深(LSD-t=5.177,P<0.01)。结论:提示肢体负压疗法可减少肢体动脉闭塞性病变伤害性刺激的传入,缓解肢体疼痛。     

动脉闭塞犬感觉神经纤维中前列腺素E1的变化

目的:观测正常犬及周围动脉闭塞性病变犬治疗前后皮肤、脊髓及背根神经节的感觉神经纤维中前列腺素E1(PGE1)的变化。方法:实验于2003-04/2004-05在第四军医大学西京医院动物实验室完成。犬17只。随机分治疗组10只、非治疗组5只和正常对照组2只,治疗组和非治疗组均将动物制作左后肢缺血模型,治疗组在模型制作后14d,开始行患肢负压治疗10d(15min/次);非治疗组不做负压治疗。3组均行患肢足趾皮肤、脊髓及背根神经节免疫组化染色,检测PGE1免疫反应阳性纤维。结果:PGE1免疫反应阳性神经纤维在皮肤中治疗组为(16.61±2.10)%较非治疗组(28.34±2.90)%减少,但仍较正常对照组(5.57±0.80)%增多。非治疗组较正常对照组明显增多。在脊髓及背根神经节中,治疗组分别为(43.22±3.70)%,(40.08±3.80)%,较非治疗组(75.23±4.30)%,(67.12±2.30)%染色变浅,但仍较正常对照组(22.00±5.80)%,(27.64±2.70)%加深(P均<0.01)。非治疗组较正常对照组染色明显加深。结论:周围动脉闭塞性疾病发病后,远端肢体皮肤、脊髓及背根神经节中的PGE1免疫反应阳性神经纤维数量明显增多,可能是机体的一种自身保护机制。肢体负压疗法可促进感觉神经纤维中PGE1的释放,扩张血管,缓解肢体疼痛,并能减少肢体动脉闭塞性病变伤害性刺激的传入。     

超声辅助下外周动脉闭塞性疾病的腔内治疗

腔内治疗已逐渐成为治疗外周动脉闭塞性疾病(PAOD)的主流方法。近年来,随着药物支架与长球囊等治疗手段的应用,PAOD的疗效显著提高,腔内治疗的适应证不断拓展。对于存在慢性肾病或者造影剂过敏体质的患者,超声辅助下的腔内治疗模式具有独特的优势并逐渐进入临床实践。本文概述了超声辅助实施PAOD腔内治疗的临床应用进展。     

HPV与乳腺癌关系的争鸣——谈HPV研究热潮下中国学者的机遇与挑战

近期,《柳叶刀》（Lancet）、《新英格兰杂志》（NEnglJMed）及《临床医师肿瘤杂志》（CACancerJClin）连续发表多篇关于人乳头状病毒（HPV）与肿瘤相关性文章,探讨HPV疫苗的应用等热点问题。我科于2007年开始关注HPV,并开展其与乳腺癌相关性的研究,取得了一定进展。我们对HPV的相关文献进行梳理和分析,并于2010年5月连续在《CACancerJClin》上发表两篇Letter,同时与诺贝尔奖获得者Hausen教授书信往来,就HPV与乳腺癌关系深入交换意见,我们的创新性观点很快引起国际同行的关注。     

早期乳腺癌血清VEGF水平与骨髓微转移的相关性及临床意义

目的：检测早期乳腺癌患者血清中VEGF及骨髓标本中CK19的表达水平,探讨二者的相互关系及临床意义。方法：应用ELISA法分别检测6例乳腺纤维腺瘤及64例乳腺癌患者血清中VEGF的水平,同时抽取相应的骨髓血标本,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测标本中CK-19的表达水平,并进行相关性分析。结果：VEGF在乳腺癌患者血清中的表达水平明显高于乳腺纤维腺瘤患者,二者差异显著（P=0.012）;在HER2阳性患者中,血清VEGF水平明显高于HER2阴性患者（P=0.016）。CK19在乳腺纤维腺瘤患者骨髓标本中未见表达,在乳腺癌患者骨髓血中,阳性表达24例（37.5%）,而骨髓中CK19阳性的乳腺癌患者血清VEGF水平显著高于CK19阴性的患者（110.46±90.65 vs 70.88±77.13,P=0.038）,且二者的表达呈正相关。结论：早期乳腺癌患者血清VEGF水平与骨髓微转移密切相关,提示VEGF可能参与了肿瘤细胞的侵袭和播散,可作为早期乳腺癌微转移的血清学指标。     

转化生长因子β对异种骨移植局部免疫因子表达的调节

背景：异种骨移植免疫排斥反应是影响预后的主要问题。然而，对异种骨移植中免疫因子表达和调节的认识尚少。白细胞介素1，白细胞介素6和肿瘤坏死因子α是重要的免疫因子．与移植后排斥反应密切相关。目的：观察异种骨移植局部白细胞介素1、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达，并探索转化生长因子β对这些免疫因子的调节作用。设计：随机对照实验。单位：解放军第四军医大学西京医院骨科研究所。对象：雄性βαlb／c小鼠72只，体质量20～25g，随机分为3组，复合松质骨载体组，单纯松质骨载体组和空白对照组，每组24只。方法：实验于2003—06／2004—06在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。复合松质骨载体组小鼠左侧股部肌间隙植入复合转化生长因子β的松质骨载体；单纯松质骨载体组植入单纯松质骨载体；空白对照组仅行手术，不植入材料。术后4，7，14和21d观察各组小鼠植骨或手术区周围组织中增殖细胞记数；应用原位杂交和免疫组化技术检测植骨局部多种免疫因子的表达。主要观察指标：各组小鼠移植骨局部组织学观察及细胞密度测定；移植骨局部白细胞介素1α，白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达。结果：①各组小鼠移植骨局部组织学观察及细胞密度测定：7d时，复合松质骨骨粒组较单纯牛松质骨骨粒组增殖组织中细胞密度明显高[（470．63&;#177;132．89），（311．46&;#177;93．69）个／视野，P＜0.01]；但14，21d时两组间则无明显差异。②各组小鼠移植骨局部白细胞介素1α，白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达：异种骨移植后的7，14d，复合了转化生长因子β的异种骨移植局部白细胞介素1α和白细胞介素6蛋白质表达分别较单纯异种骨低（7d白细胞介素1α：42．55&;#177;9．65比67．95&;#177;17．82，白细胞介素6：48．26&;#177;11．17比77．21&;#177;15．16；14d白细胞介素1αmRNA：84．77&;#177;7．42比112．94&;#177;7．02，白细胞介素6：78．10&;#177;17．22比121．18&;#177;15．44，P〈0．01），但对肿瘤坏死因子α而言，则无明显差异（P〉0．05）。结论：在异种骨移植局部，多种细胞可以表达白细胞介素1α，白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质，且这种表达受到转化生长因子β的调节。提示了转化生长因子β调节异种骨移植免疫的一种方式。