IQGAP1通过C末端促进肿瘤细胞增殖的初步研究

摘要：目的：探讨含IQ模序的GTP酶活化蛋白1(IQGAP1)对肺癌、乳腺癌和结肠癌细胞增殖的影响。 方法：转染编码IQGAP1和IQGAP1-C末端的腺病毒载体并检测细胞中IQGAP1和IQGAP1-C的表达水平;转染靶向IQGAP1的小干扰RNA（siRNA）,检测内源性IQGAP1的表达水平;用MTT和BrdU掺入法检测IQGAP1对肿瘤细胞增殖的影响;用western blot检测增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期素E的表达。 结果：转染腺病毒Ad-IQGAP1或Ad-IQGAP1-C使A549、MCF7和SW480细胞高表达IQGAP1或IQGAP1-C,其增殖能力较Ad-LacZ组均提高（t分别为19.418和25.643、29.283和16.261、23.138和56.739,P均<0.05）;A549细胞转染Ad-IQGAP1-C组的促增殖效果明显优于Ad-IQGAP1组（t=25.643,P<0.05);用siRNA沉默内源性IQGAP1的表达后,与对照siRNA组相比,A549、MCF-7和SW480细胞增殖活性受到显著抑制（t分别为18.324、18.931、19.609,P均<0.05）。BrdU掺入法结果显示,增加IQGAP1和IQGAP1-C表达均可明显提高A549、MCF7和SW480的细胞DNA合成率（t分别为14.224和12.079、13.035和15.677、11.291和16.675,P均<0.05）,在MCF7和SW480细胞中IQGAP1-C组促DNA合成效果明显优于IQGAP1组（t分别为15.677、16.675,P均<0.05）;抑制IQGAP1的表达可显著降低DNA的合成（t分别为8.043、11.381、5.966,P均<0.05）;western blot结果显示,在高表达IQGAP1或IQGAP1-C的A549、MCF7和SW480细胞中,PCNA和细胞周期素E表达明显增加（t_PCNA分别为6.541和7.460、17.769和13.048、10.261和6.544,P均<0.05;t_{细胞周期素E}分别为17.243和12.258、10.109和14.216、12.011和12.058,P均<0.05）;而干扰IQGAP1表达的细胞,与对照siRNA组比较,两者的表达明显降低（t分别为4.475和6.058,7.476和8.404,12.559和14.792,P均<0.05）。 结论：IQGAP1和IQGAP1-C促进肺癌、乳腺癌和结肠癌细胞增殖,且IQGAP1可能主要通过C末端影响细胞增殖。     

2000年嘉峪关铁路地区居住区成蚊密度及种群调查

[目的 ]了解嘉峪关铁路地区居住区成蚊密度及种群。 [方法 ] 2 0 0 0年 5～ 1 0月 ,在嘉峪关铁路地区居住区设 3个监测点 ,每旬的 5日在日落后用紫外灯诱捕成蚊 1h ,进行计数及种群鉴别。 [结果 ]嘉峪关铁路地区居住区成蚊密度综合指数为 2 3只 灯 ,旬密度最高峰为 8月下旬 ,达 1 0 3只 灯 ;嘉峪关公寓成蚊平均密度较高 ;成蚊旬密度与旬平均气温、降水量呈正相关关系 ;蚊种中中华按蚊、白纹伊蚊分别占 40 1 7%、2 9 91 %。 [结论 ]应根据本地区蚊密度、季节消长规律及蚊种组成采取综合防制措施     

痔疮诊治现状

人类对痔的认识已有千年的历史。长期以来,痔疮被认为是直肠下端或肛管存在丰富的静脉丛,如果在一处或多处发生扩张或曲张,即成为痔,亦是突出的静脉团,是各种原因造成的血管病变。1痔疮的诊断根据典型的临床表现和体格检查资料,多数病人在门诊就能做出明确的诊断。1.1痔疮的分类(1)内痔:由痔内静脉丛形成,发生在齿线上方。肛垫移位及病理性肥大,包括血管丛扩张、纤维支持结构组织松弛、断裂,常有便血。(2)外痔:由痔外静脉壁形成,发生在齿线下方,即肛周皮下血管丛扩张,表现为隆起的软团块。不常出血,常见的有血栓性外痔、结缔组织性外痔,炎症…     

神经生长因子及其受体在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达及其生物学意义

目的：观察神经生长因子在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达．分布及其生物学作用。 方法：实验于2005—07／12在江苏大学医学院基础与临床研究中心完成。①U251培养3d后，于培养基中加入终浓度为2mmol／L羟基脲继续培养24h（≥1个细胞周期），使细胞同步化于DNA合成期。②用免疫荧光法对细胞内神经生长因子及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶受体A进行染色定位：③免疫印迹法检测U251培养上清液中的神经营养因子表达。④促胚胎脊髓神经细胞生长试验鉴定U251细胞培养上清液的神经营养因子活性。取怀孕16d的SD大鼠1只，断头处死，浸泡体积分数为0．75的乙醇20min后剖腹取胎鼠，分离脊髓组织，细胞培养2d后，分别加入无血清DMEM（对照组）及培养过U25124h的无血清DMEM（实验组）。 结果：①神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A在U251中高表达，神经生长因子主要呈颗粒状分布于胞浆及胞核内，酪氨酸蛋白激酶受体A分布于胞膜及核仁部位。②U251无血清培养上清液能够促进胚胎脊髓神经细胞集落的形成，实验组集落数明显多于对照组（345．38&;#177;14．15），（145．5&;#177;12．71）／孔，P〈0．01）；且在浓缩的U251无血清培养上清液中检测出相对分子质量为36000的神经生长因子肽链。 结论：人脑胶质瘤细胞株U251呈神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A强阳性表达，且能合成并分泌具有生物学活性的神经营养因子，相对分子质量为36000的神经生长因子是其中主要成分之一。     

某铁路局防控甲型H1N1流感体会

甲型H1N1流感在全世界范围内暴发流行,给人们的生产、生活构成极大危胁,其发病率、死亡率高,而且疫情有进一蔓延的态势。为加强甲流防控工作,更好的为铁路安全运输保驾护航,本研究通过对某铁路局甲流防控工作的分析、体会,既对防控工作取得的成绩和经验进行了总结,又对工作中的不足提出了改进建议。     

斜仰卧位微创经皮肾镜治疗上尿路结石37例临床观察

目的探讨斜仰卧位微创经皮肾镜取石术(MPCNL)治疗上尿路结石的可行性及疗效。方法上尿路结石患者37例,其中鹿角型结石8例,肾盂肾盏结石23例,肾结石合并输尿管上段结石2例,输尿管上段结石4例。所有患者均采用腰硬联合椎管内阻滞麻醉,取患侧垫高向健侧倾斜30~45度体位,在B超定位下作肾穿刺,建立经皮肾取石微通道,输尿管镜钬激光碎石,灌注泵冲洗结合取石钳取石。结果 37例均顺利完成手术,平均手术时间(145.6±53.7)min。一期清除结石者30例(81.1%);7例残余结石者,4例术后7~11 d行二期MPCNL,3例术后4周行体外震波碎石(ESWL)后结石排尽。术中大出血1例,留置肾造瘘管压迫,出血自行停止;无胸膜损伤、肠损伤及肾周围其他脏器损伤等并发症,无改开放手术者。术后随访3个月,术前26例伴有肾积水者12例肾积水消失,10例好转,4例无变化。结论斜仰卧位行MPCNL,仅需在腰硬联合椎管内阻滞麻醉下就可进行,效果良好,并发症少,有利于患者生理状态下的呼吸、循环及碎石块的冲出和麻醉监测,术者操作亦较舒适,并可降低医疗成本。     

FA/BRCA途径参与肺癌细胞对顺铂耐药的机制

目的:研究顺铂(DDP)对肺癌细胞FANCC、FANCF、FANCL表达水平的影响,探讨FA/BRCA途径DNA损伤修复功能在肺癌细胞对顺铂耐药机制中的作用。方法:采用CCK-8法测定经不同浓度顺铂处理24、48 h后两种肺癌细胞株(A549和Calu-1)的细胞增殖抑制率。应用实时荧光定量PCR技术(RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测两类肺癌细胞株中的FANCC、FANCF、FANCL mRNA和蛋白的表达。结果:肺癌A549细胞和Calu-1细胞的增殖抑制率均随顺铂浓度和作用时间的不同而变化,呈剂量依赖性(P<0.05)和时间依赖性(P<0.05),Calu-1细胞的半数抑制浓度(IC50)明显高于A549细胞。肺癌A549细胞除在10μg/ml浓度顺铂处理24 h后FANCF和FANCL mRNA表达水平增高外,2.5～5μg/ml和20μg/ml浓度顺铂时FANCF和FANCL mRNA呈无变化和低表达(P<0.05)。细胞Calu-1经不同浓度顺铂处理后的FANCC和FANCF mRNA表达水平先增高后降低(P<0.05)。肺癌A549细胞中的FANCC、FANCF和FANCL蛋白表达水平随顺铂浓度增高呈进行性降低。而肺癌Calu-1细胞的FANCF蛋白表达水平在顺铂浓度5～10μg/ml范围内较对照组明显增高。结论:Calu-1细胞对顺铂的耐药性显著高于A549细胞,其机制之一可能是FA/BRCA途径中FANCF蛋白高表达的结果。     

前尿道断裂急诊吻合术37例报告

男性前尿道断裂伤的手术修复时机与方法，分为急症与择期两类。我们多年来对一般情况较好，无其它重要脏器损伤，伤程＜72h的前尿道断裂者，行急诊尿道吻合术，不加膀眈选疾，效果满意，报告如下。1临床资料1．1病例：年龄19－62岁。均有血尿、尿道口滴血、会阴血肿；排尿困难或急性尿潴留。皆因外伤。尿道球部伤29例，尿道防囊部伤5例，尿道明茎部伤3例。试插导尿管均失败。1．2手术方法：截石位，会明了弧形或纵形切口，逐层切开，清除积血，找出尿道远近断瑞，如有部分尿道未断时，将其剪断、修整。游离近端尿道1－！，scm，远端尿道游离…     

改制单角穿刺架经直肠超声引导前列腺随机活检的应用研究

目的探讨改制单角穿刺架在直肠内超声（endorectal ultrasound,TRUS）引导下对前列腺进行随机活检的应用价值。方法选择有TRUS导向穿刺活检适应证的72例,将改制后的经阴道导向的单角穿刺架,在TRUS引导下采用Stamey的10点法做前列腺穿刺活检,并对取样标本、TRUS表现、血浆前列腺特异性抗原（PSA）浓度与前列腺癌的关系进行分析比较。结果本组用改制单角穿刺架作TRUS导向前列腺穿刺取材的成功率为99.23%,取样标本平均长度为（1.25&#177;0.32）cm,能满足病理科的诊断要求。本组活检诊断为前列腺癌34例（47.22%）,其中TRUS示弥漫性病变20例（58.82%）,无明确占位病变的8例（23.53%）,局灶性病变6例（17.64%）。弥漫性病变者穿刺活检7个穿刺点以上均找到癌细胞,无占位病变和局灶性病变半数以上病例癌灶受累范围≤4个穿刺点,但仍分别有37.50%（3/8）、33.33%（2/6）的病例癌灶受累范围≥7个点,前者与无占位病变、局灶性病变比较差异有统计学意义（P〈0.01）。PSA浓度与前列腺癌的受累范围呈线性相关（α=0.51,P〈0.05）,局灶性前列腺癌的平均PSA值与前列腺增生者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论釆用改制单角穿刺架作TRUS引导前列腺随机活检,方法简便、安全,对早期诊断前列腺癌具有十分重要的临床价值。