国内外45,X/46,XY混合型性腺发育不全患者临床特征的比较分析

目的 总结和比较中国、南美洲及欧洲人群45,X/46,XY混合型性腺发育不全(45,X/46,XY MGD)患者的临床特点.方法 分析解放军总医院收治的7例45,X/46,XY MGD患者的临床特征,与北京协和医院总结的中国病例、巴西的南美洲及挪威和丹麦的欧洲人群病例的临床特征进行对比分析.结果 国内外45,X/46,XY MGD患者普遍身材矮小、面部多痣、存在较低的发际线等与特纳综合征相似的临床表现,易合并心脏、肾脏等内脏畸形,患者多表现为外生殖器表型不明确,性腺表现形式多样;实验室检查多表现为促性腺激素水平升高,性激素水平降低.45,X/46,XYMGD的治疗主要为手术切除有肿瘤发生风险的性腺组织,用生长激素促进患者的身高增长以及使用性激素替代治疗.但国内外患者在就诊原因和诊断年龄上有较大差异,国人多以生长发育迟缓就诊,国外患者就诊原因多样,除生长发育迟缓外,还包括外生殖器畸形、不孕、胎儿染色体异常等.国外患者多在产前或是出生时就诊断45,X/46,XY MGD,而中国患者平均诊断年龄较国外患者大4.7岁.结论 国内外45,X/46,XY MGD患者临床表现差别不大,但中国患者就诊年龄较大,主要以生长发育迟缓就诊.     

基于DNA熔解曲线技术的金银花种质鉴定

将高分辨率熔解曲线(high resolution melting curve analysis,HRM)技术应用于金银花种质鉴定中,对已知7对SSR(简单重复序列,simple sequence repeats)引物进行筛选,通过熔解曲线峰型及Tm差异,确定适合鉴别引物并考察其DNA模板浓度、退火温度及循环数的适宜范围。结合SIMCA-P软件对荧光信号进行处理分析,结果表明利用其中4对引物的熔解曲线可以区分金银花的3个主栽种质,为进一步完善金银花种质鉴定方法提供了依据。     

《内经》寒证的探讨与研究

《内经》中对寒证概念、范畴、表现都有较详细的记载,《内经》中不但体现寒气与藏象的密切相关性,更明确地指出了寒热与人体、五脏其象相应。现代医学对寒证的深入研究以内分泌代谢及免疫等生化指标的研究较多,而对分子生物学方向的研究相对不足。现基于《内经》条文中的启示来探讨寒证及现代医学对寒证本质的研究。     

长效化重组人粒细胞集落刺激因子的研究进展

重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)在临床上主要用于辅助治疗癌症患者因放/化疗引起的中性粒细胞减少症,但存在体内稳定性差、半衰期短等问题,需要反复多次给药,容易使患者产生药物耐受性及免疫排斥等不良反应,因此有必要开发长效化rhG-CSF来提高其临床药效。本文综述了近年来利用聚乙二醇(PEG)修饰、融合蛋白以及新剂型等技术开发长效化rhG-CSF的研究进展,展望了其未来发展趋势。     

全膝关节置换术中髌骨周围电灼去神经化对膝关节骨性关节炎早期临床疗效及膝前痛的影响

目的：探讨髌骨周围电灼去神经化对全膝关节置换术（total knee arthroplasty,TKA）后患者膝前痛及膝关节功能的影响。方法：选取行单侧TKA 治疗的膝关节骨性关节炎患者60例（60膝）,随机分为未去神经组（对照组）和去神经组（观察组）,每组30例（30膝）。两组术中均不行髌骨置换,观察组对髌骨周围电灼行去神经化处理。统计两组患者术后引流量,术前、术后西安大略和曼彻斯特大学关节炎指数评分（Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index,WOMAC）、膝关节活动度范围（ROM）及疼痛视觉模拟（VAS）评分。结果：两组患者治疗前WOMAC膝关节评分,膝关节活动度和VAS评分差异无统计学意义。对照组与观察组术后引流量差异无统计学意义（P>0.05）。对照组与观察组患者治疗后12月时WOMAC膝关节评分（450.7±83.5分,473.7±97.7分）,膝关节活动度（101.1±7.5分,105.8±8.4分）和VAS评分（2.1±0.8分,1.5±1.0分）与术前差异有统计学意义（P<0.05）。术后12月两组患者WOMAC膝关节评分差异无统计学意义（P>0.05）,但是观察组膝关节活动角度ROM及VAS与对照组差异有统计学意义（P<0.05）。结论：髌骨周围电灼去神经化处理可降低TKA后膝前痛程度并促进膝关节功能恢复。     

两种取材方法体外培养结膜细胞的实验比较

目的比较离体人结膜上皮细胞组织块培养法与刮片培养法的差异。方法选择原发性翼状胬肉患者10例,术中在相邻结膜部位,分别予以切取组织块和结膜刮片。组织块进行贴壁法培养,刮片离心后进行细胞培养,观察两种不同方法结膜上皮细胞生长情况,并进行结膜细胞鉴定。结果组织块培养法,细胞1～3 d贴壁,细胞呈多角形或纺锤形,胞体梭长;细胞5～7 d铺满瓶底,排列紧密,呈椭圆形或圆锥形。刮片培养法,获得细胞较少,一般1～3 d贴壁,贴壁效率较低,死亡率较高,细胞形态同组织块培养法。两种方法培养细胞荧光染色TRITC标记CK和FITC标记PCNA皆阳性。结论组织块培养法和刮片培养法都能培养出活性较高的结膜上皮细胞,但是组织块培养法培养效率更高,结果稳定性好。     

碱裂解法快速提取中药炒制品DNA的研究

该文旨在探索一种适用于中药炒制品DNA快速提取的方法。以氢氧化钠,1%PVP40和1%Triton X-100配制成碱裂解缓冲液,Tris-HCl为中和液,经加热裂解和中和2步提取不同炒制方法制备的中药炮制品的DNA,选择2种方法对DNA进行纯化,并以纯化后DNA作为模板利用通用引物进行PCR扩增。结果表明优化碱裂解法可简单快速的提取出药材DNA,槐米炒制品DNA质量浓度为(420.61±123.91)g·L-1,且使用5%Chelex-100树脂纯化可以提高DNA提取浓度。研究结果证明优化碱裂解法适用于中药炒制品的DNA快速提取。     

快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用

为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材(乌梢蛇,金钱白花蛇,蕲蛇)真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础,采用碱裂解法提取基因组总DNA,加入特异性PCR引物,采用两步法进行PCR扩增,从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察,分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30~45 min完成,为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。     

超声引导粗针活检在诊断甲状腺结节中的应用价值

目的：探讨超声引导下粗针活检（ultrasound-guided core-needle biopsy,US-CNB）在诊断甲状腺结节中的应用价值。方法将术前超声诊断为甲状腺恶性结节的120例患者分为两组,观察组60例,采用超声引导下粗针活检;对照组60例,采用超声引导下细针穿刺细胞学检查（fine needle aspiration cytology ,FNAC）。比较两组病例取材满意度、诊断准确性和安全性。结果观察组取材满意度、诊断准确性明显高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。两组敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和并发症比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论超声引导下粗针活检甲状腺结节取材满意度和诊断准确性高于细针活检,同时也安全可靠,更值得临床推广应用。     

小儿宝泰康颗粒中浙贝母浸膏制备工艺改进

目的 优化小儿宝泰康颗粒中浙贝母的最佳提取工艺. 方法采用正交实验,以浙贝母总生物碱的提取量为指标,以药材前处理方法、浸润时间、乙醇用量、回流时间为因素进行正交实验. 结果 优选出小儿宝泰康颗粒中浙贝母最佳提取工艺为整粒,提取前浸润12 h,加6倍量70%乙醇,每次提取2 h. 提取液浓缩成稠膏后,在降温过程中加入浸膏量0.1倍70%乙醇作稳定剂. 结论 该提取工艺合理,浸膏稳定剂安全可行,为小儿宝泰康颗粒中浙贝母的浸膏制备提供了科学依据.