双重PCR快速检测百日咳杆菌

目的:以百日咳毒素S1亚基启动子ptxA-Pr基因和插入序列IS481为目的基因,建立敏感、特异的双重PCR快速检测百日咳杆菌方法.方法:运用百日咳杆菌ptxA-Pr和IS481基因序列特异性引物,采用双重PCR技术同时扩增百日咳杆茵的特异性基因ptxA-Pr和IS481.通过构建目的质粒获得阳性对照,测序并与GenBank比对序列验证扩增产物.百日咳标准茵株DNA 10倍系列稀释为模板.采用此方法扩增双基因,检测此方法敏感性.扩增肺炎克雷伯茵、肺炎链球茵、铜绿假单胞茵、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及阳性样本DNA,检测此方法特异性.结果:百日咳杆菌标准株和阳性样本均能同时扩增ptxA-Pr和IS481目标序列,分别为191、145 bp.构建质粒后测序结果与GenBank对比一致.每个反应体系能检测到的标准菌株核酸最小量为1.65×10<'-2>ng.其他菌株检测未出现非特异性扩增.结论:双重PCR扩增百日咳杆菌ptxA-Pr和IS481基因的方法可用采特异快速的检测百日咳杆菌.     

瘦素与早泄关系研究进展

瘦素(Leptin)是一种由肥胖基因(Obesity Gene,OB Gene)编码并主要由脂肪细胞分泌的蛋白质激素,它在食物摄取、能量平衡及体重控制中有重要作用。Leptin通过与受体结合影响下丘脑-垂体-内分泌轴而发挥生理作用,其对5-羟色胺(5- HT)、多巴胺等神经递质均有一定的影响。而5- HI与早泄这种男科常见疾病存在明确的关系,通过5-HT探讨Leptin与早泄的关联性近年来受到关注。本     

逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因缺陷女性携带者

目的：探讨应用逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳法(RT-PCR-DGGE)对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因缺陷女性携带者人群进行分子诊断的可行性。方法：对54例G6PD基因缺陷可疑携带女性的血液标本,应用外周血提取总RNA并逆转录成cDNA;针对已报道的中国人群17种突变位点,以cDNA为模版,分段设计6对DGGE引物,PCR扩增、DGGE筛查分型,必要时进行测序验证。结果：54例可疑标本共检出1例1024C/T、20例1376G/T、12例1388G/A ,共检出杂合突变标本33例,总检出率为61.1%。结论： RT-PCR-DGGE对G6PD基因缺陷女性携带者人群具有较高的检出率,具有临床诊断意义。［中国当代儿科杂志,2009,11（8）：613-616］     

藤黄菌素体外对重组人蛋白激酶CK2全酶的抑制作用

目的:观察体外藤黄菌素对重组人蛋白激酶CK2的抑制效果及进行酶动力学分析以确定其抑制作用类型. 方法:利用基因工程技术进行克隆、表达和纯化,获得重组人CK2的α′及β亚基,并在体外等摩尔混合构成CK2全酶. 通过测定药物作用后转移到CK2底物上的[γ-32P]ATP的32P的放射性活度来检测藤黄菌素对酶的抑制作用及采用Line-weaver-Burk作图法分析其动力学. 结果:藤黄菌素能显著抑制重组人蛋白激酶CK2的活性(IC50=0.86 μmol/L). 酶动力学分析表明,藤黄菌素与ATP呈竞争性抑制CK2的活性(Ki=0.19 μmol/L),与酪蛋白则呈混合性抑制CK2的活性(Ki=0.11 μmol/L). 结论:藤黄菌素是一种较强的体外蛋白激酶CK2的抑制剂.     

金黄色葡萄球菌原发血流感染血细胞反应与预后关系探讨

目的探讨原发性金黄色葡萄球菌血流感染血细胞反应,为更好地发挥血细胞抗感染作用提供证据。方法收集南昌大学第一附属医院2008年1月-2014年12月原发性金黄色葡萄球菌血流感染患者的个人及医疗处理信息和血细胞反应指标。采用χ~2检验及二元线性Logistic回归预测各种因素与预后关系。结果共发现189例原发性金黄色葡萄球菌感染病例,其中33例因血流感染死亡。多因素分析表明,患者年龄大于65岁、MRSA感染、机械通气、中性粒细胞降低、中性粒细胞升高、血小板降低是住院期间金黄色葡萄球菌血流感染死亡的独立危险因素,其中中性粒细胞升高与血流感染死亡呈负相关。结论原发性金黄色葡萄球菌血流感染患者如果出现血细胞降低等异常时应及时采取措施调整血细胞反应值,改善患者预后。     

不同科室分离金黄色葡萄球菌耐药差异及意义探讨

目的探讨南昌大学一附院不同科室来源金黄色葡萄球菌耐药差异,为更加合理地抗感染治疗提供依据。方法通过医院信息系统收集我院2014年11月-2015年10月临床分离的金黄色葡萄球菌,并对患者特征、来源、耐药状况等信息进行统计分析。结果 1.2014年11月-2015年10月内共收集金黄色葡萄球菌菌株616株,其中男性404株,女性212株;标本来源主要是分泌物、痰液和血流;主要感染科室为骨科、五官科、烧伤科、脑外科和肾内科。2.各科抗生素耐药水平存在较大差异,例如骨科和五官科分离株对庆大霉素、利福平、四环素耐药水平低于平均值(P0.05);烧伤科和脑外科菌株对苯唑西林、氨苄西林/舒巴坦、利福平和四环素耐药水平高于平均值(P0.05),且脑外科的喹诺酮类药物耐药率最低。未出现利奈唑胺和万古霉素耐药菌株。3.MRSA菌对青霉素、庆大霉素、氨苄西林/舒巴坦、苯唑西林、利福平、复方新诺明、红霉素、四环素、氯林可霉素和奎努普叮/达福普叮的耐药率均高于MSSA菌(P0.05)。结论各科室分离的金黄色葡萄球菌耐药水平差异明显,各科室应根据本室耐药监测数据合理使用抗菌药物。     

血管瘤组织总ERK1/2及磷酸化ERK1/2的免疫印迹检测

目的检测细胞外信号调节激酶1/2(总ERK1/2)及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)在血管瘤组织中的表达并探讨其意义。方法应用免疫印迹法检测10例增生期血管瘤组织和8例退化期血管瘤组织总ERK1/2及p-ERK1/2的蛋白表达。结果增生期血管瘤组织总ERK1/2的蛋白表达(0.87±0.14)与退化期血管瘤组织总ERK1/2的蛋白表达(0.79±0.05)差异无统计学意义(P>0.05);增生期血管瘤组织p-ERK1/2的蛋白表达(0.44±0.04)明显高于与退化期血管瘤组织p-ERK1/2的蛋白表达(0.23±0.08),差异有统计学意义(P<0.01)。结论血管瘤增生与ERK活性增高及ERK通路激活有关。     

加替沙星注射液的不良反应26例分析

目的 探讨加替沙星注射液致不良反应特点,为临床合理用药提供参考.方法 对我院加替沙星注射液致不良反应26例进行统计、分析.结果 不良反应主要表现为皮肤过敏、神经系统、消化系统及内分泌系统等症状.结论 重视加替沙星注射液的不良反应,以便安全合理用药.     

SARS后广州市护士工作满意度及其影响因素分析

目的探讨SARS后护士工作满意度的水平及其影响因素。方法采用Mueller/McCloskey满意度量表对广州市667名工作1年以上的在职护士进行调查。结果护士的工作满意度水平较SARS前有所提高,但总满意度均分≥4分的仅占17.09%,其中最不满意的是福利待遇较低,其次是缺乏社会或专业上交流、交往机会;不同职务、有无按职上岗、家人支持度及入学志愿是影响护士工作满意度的主要因素。结论护理管理及护理教育者应进一步采取有效措施,提高护士的工作满意度。