浙江省人感染H7N9禽流感病毒的基因组序列分析

目的分析浙江省2013年4月初一例人感染甲型H7N9禽流感患者的病原学和基因组序列特征.方法提取患者标本的病毒RNA并用荧光定量RT-PCR方法检测,一步法RT-PCR扩增H7N9禽流感病毒基因组的8个片段,测序并拼接出基因组序列.下载目前已经公布的H7N9禽流感病毒和其他H7、N9亚型的病毒的HA和NA序列,采用Mega 5.1软件对其进行序列比对并构建进化树.根据测序的结果分析该例H7N9禽流感病毒的序列变异情况.结果该患者标本甲型流感、H7亚型和N9亚型均为阳性,通过扩增基因组各片段并进行测序.对血凝素和神经氨酸酶基因进行比对和进化树构建,结果显示该H7N9病毒HA基因与A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)的亲缘关系最近,NA基因与A/wild bird/Korea/A14/2011 (H7N9)的亲缘关系最近.编码内部蛋白的6个基因均与中国大陆近两年的H9N2毒株最为相似.该标本的病毒HA蛋白发生了Q226L突变,而与已经公布的人感染H7N9禽流感毒株均不一致的是PB2未发生E627K突变.结论从该份临床标本完成了检测和基因组各片段的扩增与测序.该病毒与已报道的人感染H7N9禽流感病毒同源性高,存在Q226L等重要位点的突变,但PB2未发生E627K突变.     

不同刺激参数对电针辅助药物流产作用影响的对照研究

目的：观察不同电针刺激参数对药物流产的辅助作用。方法：将109例早孕患者随机分成3组，在口服米索前列醇后30～60min内，电针1组（37例）和电针2组（38例）用电针治疗。电针1组同时电针双侧舍谷和三阴交，簇形波，频率100Hz；电针2组先电针舍谷20min后加针三阴交5min，连续波，频率50Hz。药物组（34例）不予电针治疗。记录完全流产率、排囊时间、阴道出血持续时间和腹痛情况。结果：电针1组、电针2组的完全流产率分别为91．9％和86．8％，均高于药物组的82．4％，但组间差异无显著性意义（P〉0．05）；2个电针组患者的平均排囊时间均显著短于药物组（P〈0．01，P〈0．05）；2个电针组阴道出血持续时间亦均显著短于药物组（P〈0．01）；电针2组减轻腹痛的效果显著好于药物组（P〈0．01）和电针1组（P〈0．05）。结论：不同刺激参数电针对辅助药物流产的效果不同。     

浙江省2006年柯萨奇B3病毒VP1基因分析

目的：研究2006年浙江省无菌性脑膜炎的病原柯萨奇B3（CoxB3）分离株（Zhejiang／52／06）的VP1基因特征。方法：采用RD、Hep-2细胞对患者脑脊液和粪便标本进行病毒分离，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增病毒VP1基因并进行序列测定，用BioEdit等软件分析处理。结果：浙江省柯萨奇B3分离株的VP1基因852个核苷酸，编码281个氨基酸，与北京、哈尔滨的CoxB3分离株核苷酸同源性在79．1％～79．2％，与欧美国家分离株的核苷酸同源性在78．5％～81，7％，与乌兹别克斯坦分离株核苷酸同源性为82．7％。进化树分析显示，浙江省柯萨奇B3分离株（Zhejiang／52／06）与B3／Uzbekistart／99、B3／Germany／PD00分离株亲缘关系最近。结论：柯萨奇B3分离株的变异特征及亲缘进化，分析对无菌性脑膜炎的流行病学研究具有重要意义。     

浙江省人禽流感病毒Zhejiang/16/2006株的基因特性分析

目的 分析浙江省首例报道的人禽流感H5N1病毒株A/Zhejiang/16/2006的基因特性与系统进化关系.方法 对A/Zhejiang/16/2006病毒株的全序列8个基因片段作序列测定,并与国内外相关病毒株进行同源性与系统进化比较.结果 A/zhejiang/16/2006的HA序列,与周边国家和地区的H5N1病毒株之间存在11个氨基酸的差异,但这些差异并未影响到相关糖基化位点的稳定;在NA区,1997年以后的毒株均缺少第49～68位的20个氨基酸.总体上中国大陆近年H5N1毒株的8个基因片段与周边国家和地区毒株相比形成另一个分支,并与1996-1997年香港及广东的H5N1毒株之间存在较大差异,但有个别毒株的基因片段在系统进化树上远离当前的毒株而更接近1997年的病毒株.结论 A/zhejiang/16/2006与中国大陆近年的病毒株自成一个体系,与周边国家和地区的H5N1病毒株之间存在一定差异.     

TaqMan荧光定量RT—PCR法快速检测肠道病毒EV71

手足口病（Hand foot mouth disease，HFMD）是婴幼儿常见的传染病，由人肠道病毒属的柯萨奇病毒（Coxsaekie vials）A组16、4、5、7、9、10型，B组2、5型；埃可病毒（ECHOviruses）和肠道病毒71型（EV71）感染引起，其中以EV71及CoxA16型最为常见。EV71感染儿童引起的手足口病大部分病例病情较轻，可治愈，但少数患者可出现心肌炎、无菌性脑膜炎和肺水肿等并发症，     

荧光素钠注射液稳定性研究

目的：考察氧气、二氧化碳、空气、金属离子存在对荧光素钠溶液光学性能的影响及抗氧化剂对荧光素钠注射液的稳定作用，提高荧光素钠注射液造影质量。方法：将荧光素钠溶液置于光照、高温（60℃）或通入氧气、二氧化碳、空气，加入金属离子进行影响因素实验，采用高效液相色谱等方法测定含量，与加入抗氧化剂实验结果比较。结果：金属离子存在或与氧气、二氧化碳、空气接触产生强烈的荧光猝灭，是影响荧光素钠注射液稳定性的关键因素。结论：加入0．1％连二亚硫酸钠等抗氧化荆可消除氧气、二氧化碳、空气引起的荧光猝灭作用，提高荧光素钠注射液造影质量和稳定性。     

氰戊菊酯人体毒性的调查和实验研究

江苏激素研究所Fen农药厂合成和分装车间空气中Fen浓度分别为0.023和0.122mg/m~3,分装工人手工操作,室内和工人均缺乏防护设备。接触者的主要症状是皮肤瘙痒,并有“星期一加重现象”,同时可使工人的视觉-运动反应时延长,这也许与动物实验中Fen使大鼠坐骨神经运动传导潜速率的延长有关。动物实验还提示Fen使大鼠“y迷宫”达标所需训练次数增加,前肢悬挂耐力时间缩短(呈现一定的剂量-效应关系)。即Fen可影响大鼠的记忆、学习能力和神经肌肉协调性及肌耐力。Fen还使小鼠及工人血细胞中的微核发生率明显升高,说明Fen对人类遗传效应存在一定威胁。建议车间中特别是灌药和封口工段加用局部密闭通风罩等防护措施,接触者皮肤抹用益灵霜。     

糖尿病住院病人的能量需要

用间接测热法对47例糖尿病住院病人进行基础代谢和各种活动的能量消耗量的测定。结果表明:男女糖尿病住院病人的基础代谢率低于我国同年龄正常人群的基础代谢率。其各种活动的能量消耗也低于国外健康人同种活动的能量消耗。以卧床和静坐为主的病人一天总能量消耗,平均男性为1722 Kcal,女性为1513 Kcal,与目前临床所采用对糖尿病人所供给的能量,以每公斤30 Kcal的参考标准相近。     

血栓通注射液配合西药治疗动脉硬化闭塞症60例

目的:观察血栓通注射液配合西药治疗动脉硬化闭塞症的临床疗效.方法:对60例动脉硬化闭塞症患者给予血栓通注射液15 mL·d-1加入生理盐水注射液或5%葡萄糖注射液中静滴,qd,治疗24 d后评定疗效.结果:60例患者中痊愈36例,显效12例,总有效率为91.67%.结论:血栓通注射液配合西药治疗动脉硬化闭塞症疗效满意,值得推荐应用.     

应用环介导等温扩增法快速检测O139群霍乱弧菌

目的 建立一种适合基层检验部门及小型实验室使用的快速检测O139群霍乱弧菌的方法.方法 应用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),针对O139霍乱弧菌wbfR基因设计4条引物(2条内引物、2条外引物);优化LAMP反应条件和反应体系,对反应体系中的引物、dNTP、Mg2+/Mn2+离子及Calcium等浓度进行优化;并对13株种系背景明确的霍乱弧菌不同实验对照株、30株O139群霍乱弧菌地方分离株、10株O1群霍乱弧菌地方分离株、32株其他肠道菌进行检测,验证该方法的特异性;通过肉眼目测或电泳检测比较结果.结果 所有O139群霍乱弧菌经LAMP榆测均呈绿色并电泳有阶梯状条带为阳性,O1群霍乱弧菌及其他肠道菌均检测呈橙色并电泳无相应条带为阴性;该体系最低检测限为63 CFU/反应;检测结果在白光下通过肉眼即可判断;从菌株核酸的提取至检测完成仅需1.5 h左右.结论 本研究建立的LAMP方法能够快速、灵敏、特异地检测O139群霍乱弧菌,无需昂贵的仪器,简单方便,非常适合基层检验部门或小型实验室以及流行病学人员于应急车上或现场监测等使用,值得推广.