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目的探讨恒河猴胰岛分离和纯化的技术方法。方法采用自制的半自动胰腺消化分离装置,对3只成年恒河猴胰腺进行消化分离,用非连续密度梯度高渗枸橼酸盐嘌呤溶液(HCA液)-蔗聚糖液(Ficoll液)纯化恒河猴胰岛,通过双硫腙染色在倒置显微镜计数胰岛的数量和纯度,用胰岛素释放试验检测胰岛的分泌功能。分离和纯化结果采用配对t检验进行统计分析。结果消化后平均每个胰腺可获得(101420±12054)胰岛当量(IEQ),纯化后平均每个胰腺可获得(71480±8054)IEQ,平均每克恒河猴胰腺组织可获得(2310±252)IEQ,纯化后胰岛平均纯度为(89.8±8.7)%,活率为(93.1±2.8)%。纯化后的胰岛对葡萄糖刺激反应良好,高糖(16.7mmol/L)时胰岛素的释放量为低糖(3.3mmol/L)时的5.9倍(t=45.2,P〈0.01)。分离胰岛在移植到糖尿病大鼠肾包膜下后能够影响降低血糖至支持水平。结论通过采用半自动胰腺消化分离装置,胶原酶P灌注消化及非连续密度梯度法纯化,能获取较高纯度及生物活性良好的恒河猴胰岛。 相似文献
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目的 比较2010年美国糖尿病协会(ADA)新增糖化血红蛋白(HbA1c)≥6.5%糖尿病(DM)诊断标准和2003年ADA 空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L的糖尿病诊断标准用于糖尿病诊断的效果,探讨HbA1c作为诊断标准的可行性.方法 对广州市海珠区568名无糖尿病史的常住居民进行75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT),以PG 2 h≥11.1 mmol/L为金标准,评价HbA1c和FPG诊断DM的敏感度和特异度.结果 根据2010年ADA中HbA1c≥6.5%的标准,诊断DM的检出率为6.34%,2003年ADA标准中FPG≥7.0 mmol/L诊断DM的检出率为7.8%.HbA1c≥6.5%和FPG≥7.0 mmol/L的敏感度分别为35.0%和37.3%,特异度分别为99%和98%.HbA1c和FPG两种诊断方法的吻合系数为K=0.57.结论 HbA1c≥6.5%与FPG≥7.0 mmol/L吻合度较好.作为诊断标准,HbA1c与FPG无明显差别. 相似文献
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教学查房是临床教学的重要组成部分,但在临床实践中却往往因各种原因而难以落实到位。以内分泌代谢科为例,在教学查房特别是英语教学查房中存在教师及学生积极性不高、准备不充分等问题,教学查房难以达到预期效果。针对上述现状,基于PBL理念,将英语学习与临床教学查房合二为一的英语教学查房,既是提高带教医务人员及医学生英语水平、培养医学生临床思维的重要方法,也是医学教育改革和完善重要举措,在临床实践中具有较高的实用性和可行性。 相似文献
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背景:胰岛移植为有望根治糖尿病的一种方法,而移植排斥问题阻碍了移植的开展,诱导受体对供体移植物的免疫耐受是解决同种异体移植排斥反应的关键。
目的:观察骨髓间充质干细胞输注对糖尿病小型猪同种异体胰岛移植物存活时间的影响。
方法:无菌条件下抽取动物骨髓,离心弃上清。取单核细胞层,洗涤后加入L-DMEM培养基,调整细胞浓度为1×109 L-1。培养48 h后换液去除未贴壁的细胞,依据贴壁培养法分离和扩增间充质干细胞。取第5代细胞作为移植供源,调整细胞浓度为1×1010 L-1。四氧嘧啶制备糖尿病小型猪模型,随机分为骨髓细胞组和干细胞+骨髓细胞组,经肝门静脉分别植入胰岛细胞、骨髓细胞,胰岛细胞、骨髓细胞和骨髓间充质干细胞。
结果与结论:骨髓间充质干细胞联合骨髓细胞输注较单纯骨髓细胞输注能显著延长同种异体小型猪胰岛移植物存活时间(P < 0.05),同时受体血清胰岛素能较长时间维持较高水平。提示骨髓间充质干细胞输注能显著延长猪胰岛移植物存活时间,并促进胰岛移植物正常功能的发挥。 相似文献
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目的报道南方医科大学珠江内分泌科收治的1例以四肢乏力为主要表现的Gitelman综合征(GS),复习国内外文献,阐述GS的诊断与治疗。方法患者女,21岁,因"反复四肢乏力5年,加重1月"入院,血压不高,甲状腺无肿大,心、肺、腹检查无异常。患者存在低血钾、低血氯、碱中毒、低血镁、低尿钙、尿钙/肌酐比值小于0.2,血压偏低,肾素活性升高,临床诊断为GS。予氯化钾缓释片1.5 g口服,一天三次;门冬氨酸钾镁片1片口服,一天三次;螺内酯(安体舒通)60 mg口服,一天三次。结果 3周后(2012年9月4日),患者乏力症状明显改善,复查血钾3.29 mmol/L,血镁、钠、钙、氯、总二氧化碳均正常。3个月后(2012年11月5日)复诊,无乏力不适,复查血钾3.07 mmol/L。结论部分GS被诊断为巴特综合征,两者有不同的生化特点为,GS除了有低血钾、代谢性碱中毒等外,还伴有低尿钙、低血镁、高尿镁,尿Ca/Cr<0.2,而巴特综合征患者尿Ca/Cr>0.2。 相似文献
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背景:间歇性高糖可阻滞胰岛β细胞生长,增加β细胞的凋亡,但具体作用机制尚不清。目的:观察间歇性高糖对大鼠胰岛素细胞增殖、凋亡及对细胞周期进程的影响。方法:实验对大鼠胰岛素细胞进行培养,分为正常糖对照组,恒定性高糖组和间歇性高糖组,分别含葡萄糖5.5,30,30和5.5mmol/L间歇换液。采用细胞计数试剂盒检测细胞增殖活性,流式细胞仪测定细胞周期,Annexin-V/PI双标流式细胞术检测细胞凋亡,应用Westernblot检测细胞周期调控蛋白CyclinD1的表达水平。结果与结论:与正常糖对照组相比,恒定性高糖组及间歇性高糖组均明显抑制大鼠胰岛素细胞细胞的生长(P〈0.01),增加大鼠胰岛素细胞的凋亡(P〈0.01),明显抑制细胞周期进程,使大鼠胰岛素细胞的细胞周期更多滞留在G0/G1期(P〈0.01),能显著减弱细胞周期调控蛋白CyclinD1的表达(P〈0.01)。与恒定性高糖组相比,间歇性高糖以上各指标作用均更显著(P〈0.01)。结果证实,间歇性高糖能够抑制大鼠胰岛素细胞的生长,增殖和诱导凋亡,其机制可能是通过降低CyclinD1的活性,使细胞阻滞在G0/G1期,抑制细胞周期进程,从而减弱细胞的增殖活性。 相似文献
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