淫羊藿总黄酮对成骨细胞中OPG和RANKL mRNA基因表达影响的实验研究

目的:探讨淫羊藿总黄酮对大鼠成骨细胞中骨保护素(OPG)和核因子κB受体激活因子配体(RANKL) mRNA基因表达的影响.方法:体外培养成骨细胞,分别加入含0.1、1、10、100 ng/ml淫羊藿总黄酮(HEF)的培养液,48 h及96 h后分别提取细胞总mRNA,用RT-PCR方法分析OPG/RANKL的mRNA的表达,进行半定量分析.结果:培养48 h后,与对照组比较,HEF增强了OPG mRNA的表达,有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01),VOPG/VRANKL比值增大;96 h后,HEF明显增强了OPG mRNA的表达,各浓度组与对照组相比,均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01),各浓度组VOPG/VRANKL比值增大,有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论:淫羊藿总黄酮可能通过增加成骨细胞OPG的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,从而抑制骨吸收,达到治疗骨质疏松症的目的.     

补肾活血方对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的观察中药补肾活血方对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。方法取新生的SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞：应用MTT法,对硝基苯磷酸盐法（PNPP）及茜素红染色方法观察不同浓度补肾活血方对体外培养成骨细胞在24、48、72h不同时段的增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性及矿化结节形成的影响。结果不同浓度的补肾活血方均可促进成骨细胞增殖率提高,以中、高浓度组的作用较为明显（P〈0．01）;不同浓度补肾活血方可使ALP活性增强（P〈0．01）;中、高浓度组补肾活血方矿化结节数量,显著多于对照组（P〈0．01）。结论补肾活血方具有促进成骨细胞的增殖、分化及矿化的作用。     

透明质酸对体外培养大骨节病软骨细胞增殖与凋亡的影响

目的 通过观察透明质酸(HA)对体外培养的大骨节病(Kashin-Beck disease,KBD)软骨细胞增殖、凋亡的影响,为临床上HA治疗KBD提供实验依据.方法 依据<大骨节病诊断标准>(GB 16003-1995)收集KBD患者和遭遇意外事故的病人(对照组)关节软骨,分离、体外培养关节软骨细胞.选用第2代细胞进行实验.两组软骨细胞分别给予不同剂量的HA,按HA剂量分为0、100、500 mg/L组.通过二苯甲唑溴盐(MTT)实验,测定第2、4、6天HA对KBD组、对照组软骨细胞增殖的影响.并通过流式细胞检测观察HA对软骨细胞凋亡的影响.结果 对照组在第4天时,500 mg/L组(0.140 ±0.049)促软骨细胞增殖作用大于0 mg/L组(0.116±0.021);KBD组在第6天时,500 mg/L组(0.179±0.081)与0 mg/L组(0.128 ±0.017)比较,显示了明显的促增殖作用(P<0.05).KBD组细胞凋亡率100、500 mg/L组(10.458±1.143、7.877±1.346)均较0 mg/L组(12.860±2.159)下降(P<0.05);对照组500 ms/L组(4.045±1.204)较0 mg/L组(7.128±1.244)细胞凋亡率下降(P<0.05).结论 HA对KBD软骨细胞具有促进增殖和抑制软骨细胞凋亡的作用,其中500 mg/L的HA改善KBD软骨细胞代谢的作用较100 mg/L明显.     

94例腰椎间盘突出症的体感诱发电位

应用皮肤电极刺激，针电极记录的体感诱发电位，检查９４例腰椎间盘突出患者的胫后神经和节段性（根性）皮神经刺激时的皮层电位，并以５０例正常人作对照，结果发现患者的异常率为８４％，其中Ｌ（４·５）突出者异常率为７１％，Ｌ５·Ｓ１突出者异常率为６１．５％。认为体感诱发电位检查是一种判定腰骶神经根损伤的可靠方法。     

氟宁抗氟作用机理研究

目的 探讨氟宁抗氟的作用机理。方法 将48只兔随机分为4组,A组为染氟加氟宁组,B 组为染氟加维生素C组,C组为染氟组,D组为空白对照组,观察各组动物骨、骨骼肌组织学和超微结构变化及血、尿、粪、器官组织的含氟量变化。结果 A组骨骼肌超微结构无明显改变;B、C组骨骼肌肌原纤维部分断裂、溶解,线粒体水肿,嵴消失;A、B、C组骨、骨骼肌组织学结构正常。A组骨、牙齿含氟量显著低于B、C组（P＜0．05）,血、尿中含氟量显著高于B、C组（P＜0．05）。结论 氟宁可促进氟的排泄,减少氟在组织中的沉积和对组织的损害,具有有明显的抗氟作用。     

特发性股骨头缺血性坏死发病机制与治疗研究

l.国内外研究现状自1957年Perrogrend和Mastomarine首先报道长期大剂量应用糖皮质激素引起股骨头缺血性坏死以来,特发性股骨头缺血性坏死已逐步被人们重视。近年来随着糖皮质激素的广泛应用,其发病率呈上升趋势,且其致残率高,因而许多国家的学者对其进行仔细研究,提出多种发病机制的假说,如脂代谢紊乱、脂肪栓塞,骨质     

体感诱发电位监测在青少年脊柱矫形术中的价值

随着椎弓根三维矫形系统在脊柱外科中的应用，因矫形应力点分散，把持力强，脊柱畸形矫正强度较以前Harrington器械平面矫形有明显增加，但脊髓损伤的风险也随之增加，术中脊髓监护受到重视。本文就我院1996—2002年46例脊柱畸形术中应用体感诱发电位(SEP)监护的总结，了解其应用价值。     

马尾神经慢性压迫的病理变化与脊髓诱发电位和MRI之间的关系

目的:探讨犬马尾神经慢性压迫的病理变化与脊髓诱发电位(CESEP)和M RI之间的关系,为临床诊治该病和判断预后提供实验依据。方法:家犬10只,2只为对照组,8只为实验组,在L5~L6椎板下,潜行置入可控式硅胶水囊,对照组不注水,实验组每周注入0.5m l,在压力为20m m H g(第4周)、60m m H g(第7周)及120m m H g(第9周)和120m m H g持续1周(第10周)后随机抽取2只犬,用诱发电位和M RI检查后处死动物,观察其相应的组织学变化。结果:当压力<60m m H g,椎管狭窄<50%时,诱发电位潜伏期延长,波幅下降,但无统计学意义,M RI示硬膜外脂肪存在,马尾神经无压迫,病理学无器质性变化;当压力≥60m m H g,椎管狭窄≥50%时,诱发电位潜伏期延长,波幅下降,有显著性差异。M RI示硬膜外脂肪消失,受压处硬膜囊明显变细,局部马尾信号增高,病理学示神经纤维出现不可逆变化。结论:随着压力和压迫时间的增加,马尾神经的病理变化逐渐加重,诱发电位和M RI均有相应变化,M RI示椎管狭窄≥50%时病理学上神经纤维出现不可逆变化。     

重组转化因子β_1的表达及修复骨缺损的研究

目的　运用基因重组的方法 ,对人TGF β1的进行基因克隆 ,在大肠杆菌中表达 ,并进行重组TGF β1修复骨缺损的实验研究。方法　以pBV2 2 0 作为原核细胞表达载体 ,将TGF β1cDNA片段定向重组到pBV2 2 0 的多克隆位点上 ,构建原核细胞表达质粒pTGF β1并转化至大肠杆菌中进行温度诱导表达。在兔顶骨两侧各制造直径为 10mm的骨缺损 ,左侧缺损植入纤维蛋白加重组TGF β110 0ug作为实验组 ,右侧缺损单纯植入纤维蛋白作为对照组 ,术后进行组织学和平均灰重测定。结果　表达产物经SDS PAGE分析 ,该表达体系可高效表达TGF β1,其表达产物占菌体可溶性蛋白的 2 3% ,用NRK细胞检测本研究生产的TGF β1具有该蛋白的野生活性。实验组缺损区组织学及平均灰重明显优于对照组 (P <0 0 5 )。结论　TGF β1原核表达体系的建立为TGF β1的生产提供了高效的表达工程菌 ,重组TGF β1能有效地修复骨缺损