抗B-CLL-IgM Id×抗CD3双功能抗体对LAK细胞杀伤活性的影响

抗肿瘤双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)由于具有同时与效应细胞及靶瘤细胞两种不同抗原特异性结合的双重特异性,从而提高了效应细胞对靶瘤细胞的特异性杀伤活性,因此,其在肿瘤靶向生物治疗中的应用日益受到重视.本研究通过体外实验,观察了抗人慢性B淋巴细胞白血病LgM独特型×抗CD3双特异性抗体(抗B-CLL-LgM Id×抗CD3 BsAb)对LAK细胞杀伤靶瘤细胞活性的影响,现报道如下.     

丙肝病毒NS5B-EGFP融合蛋白真核表达载体的构建及稳定转染HepG2细胞系的建立

目的　构建可表达丙型肝炎病毒 (HCV)NS5B EGFP融合蛋白的真核表达载体 ;获得重组质粒稳定转染的HepG2 细胞系。方法　利用PCR技术从HCV基因组中扩增出ns5b基因片段 ,XhoⅠ KpnⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pEGFP N3真核表达载体 ,转化TG1菌株感受态细胞 ,获得阳性重组质粒pEGFPN3 ns5b。将阳性克隆用脂质体法转染HepG2 细胞 ,经持续G4 18压力选择和有限稀释法克隆化获得稳定转染的细胞系。结果　成功构建了真核表达载体pEGFPN3 ns5b ;建立了其重组质粒稳定转染的HepG2 细胞系。结论　重组质粒稳定转染的HepG2 细胞系可表达NS5B EGFP融合蛋白 ;该HepG2 细胞系可以应用于以ns5b基因为靶位的抗HCV感染研究     

CTLA4Ig修饰树突状细胞对实验动物淋巴细胞增殖及胞毒效应的影响

目的：探讨CTLA4Ig修饰的DC对实验动物免疫功能的影响。方法：将经CTLA4Ig基因修饰或未修饰Dc腹腔注射C57BL／6致敏小鼠，以致敏或未致敏C57BL／6单个核细胞作为反应细胞，以未修饰DC细胞及修饰DC为刺激细胞，共培养6天，采用MTT比色法检测细胞增殖，乳酸脱氢酶法测定细胞毒活性。结果：CTLA4Ig融合蛋白对未修饰DC致敏或未致敏小鼠的同种细胞刺激的增殖反应有明显的抑制作用。CTLA4Ig修饰DC诱导不同组小鼠淋巴细胞增殖反应均明显降低，CTLA4Ig融合蛋白对CTL细胞毒活性有显著抑制作用。CTLA4Ig修饰DC对不同组小鼠CTL细胞毒活性均具有抵抗作用，未修饰DC细胞对未致敏小鼠以及未修饰DC对致敏小鼠CTL细胞毒活性敏感。结论：稳定表达CTLA4Ig融合蛋白的DC诱导显著降低同种小鼠淋巴细胞的增殖反应和对CTL细胞毒活性的抵抗。     

转Weel基因靶细胞抗CTL介导的细胞毒效应

目的：研究Weel转基因细胞抗CTL介导的细胞毒效应及抗穿孔素抗体对抗细胞毒效应的影响。方法：体外混合NTT及淋巴细胞培养获得CTL，并测定淋巴细胞增殖指数(MTT法)；采用脂质体将重组体Weel Hu／GFP导人哺乳动物细胞NIT；以转染重组体前后的NIT为靶细胞，检测CTL介导的胞毒效应(LDH法)，同时测定抗穿孔素抗体对此效应的影响。结果：混合细胞培养可诱导CTL的增殖；转染Weel基因及加入抗穿孔素抗体NIT组发生的细胞溶解的数量最少。结论：转Weel基因靶细胞在一定程度上可抵抗CTL介导的细胞毒作用，穿孔素抗体可协同增强此抗胞毒作用。     

转Wee1基因靶细胞抗CTL介导的细胞毒效应

目的 :研究Wee1转基因细胞抗CTL介导的细胞毒效应及抗穿孔素抗体对抗细胞毒效应的影响。方法 :体外混合NIT及淋巴细胞培养获得CTL ,并测定淋巴细胞增殖指数 (MTT法 ) ;采用脂质体将重组体Wee1Hu GFP导入哺乳动物细胞NIT ;以转染重组体前后的NIT为靶细胞 ,检测CTL介导的胞毒效应 (LDH法 ) ,同时测定抗穿孔素抗体对此效应的影响。结果 :混合细胞培养可诱导CTL的增殖 ;转染Wee1基因及加入抗穿孔素抗体NIT组发生的细胞溶解的数量最少。结论 :转Wee1基因靶细胞在一定程度上可抵抗CTL介导的细胞毒作用 ,穿孔素抗体可协同增强此抗胞毒作用。     

郑新老中医治疗尿毒症崩漏经验

郑新主任医师为重庆市著名中医肾病专家,全国名老中医.郑师早年跟随唐阳春先生学习中医,从事中西医结合肾病防治研究近 40年,学验俱丰.笔者师从郑老,收益良多.现将郑师治疗尿毒症患者崩漏的经验介绍如下.     

肾药对腺嘌呤所致肾功衰动物肾功能保护作用的实验研究

目的：探讨补肾胶囊和肾衰灵联合应用(肾药)对肾功衰的保护作用。方法：采用腺嘌呤皮下注射造模法，观察肾药对模型小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响及肾衰大鼠用药前后各种肾功能指标的变化。结果：肾药可明显增加小鼠巨噬细胞吞噬功能，小剂量尤为明显，可明显降低肾衰大鼠血清肌酐、尿素氮水平，对白蛋白有升高趋势，且未见毒副作用。结论：补肾胶囊和肾衰灵治疗肾功能衰竭有明确疗效。     

乙型肝炎病毒截短C基因与前S1基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化

目的：构建乙型肝炎病毒（HBV）截短C基因和前S1基因重组原核表达质粒,获得融合蛋白的表达并进行抗原性分析．方法：PCR扩增获得截短C基因片段和前S1基因,双酶切后克隆至原核表达质粒pET28a,转化E．coli DH5α,酶切鉴定得阳性重组质粒pET28a并测序;然后转化E．coli B121,IPTG诱导融合蛋白表达,薄层扫描分析表达蛋白组成;可溶性分析后用Ni^2＋ -NTA凝胶亲和层析柱纯化、透析并浓缩融合蛋白,Westem Blot分析特异性和抗原性．结果：成功构建了HBV截短C基因和前S1基因融合的原核表达质粒pET28a—Ct—preS1,目的基因可高效表达,表达产物主要以包涵体形式存在,Ni^2＋ -NTA纯化可获得目的蛋白,纯化蛋白具有良好的抗原性和特异性．结论：HBV截短HBcAg和preS1抗原融合蛋白可高效表达并得到纯化,为研究新型乙肝疫苗奠定了基础．     

运用"医-会联动"模式搭建学术交流平台研究与实践

目的:通过对首都医科大学宣武医院会议服务需求调研和对医院医、教、研资源摸底,精准对接供需双方,建立充分发挥医疗机构特点的"医-会联动"专业会议服务模式.方法:通过问卷调查了解医院目前医疗专业会议服务需求和医院可提供的医、教、研资源,以该院会议服务中心为平台,以精准对接供需双方的流程、方案和制度为主要方式,形成"医-会联...