蛋白磷酸酶2A在三氧化二砷诱导NB4、MR2细胞株凋亡过程中的变化

本研究探讨三氧化二砷（arsenic trioxide，ATO）诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中蛋白磷酸酶2A（PP2A）活性与表达的变化．不同浓度ATO单用或与冈田酸（OKA）联合作用于NB4、MR2细胞，然后采用MTT法测定药物对细胞增殖的影响，用瑞氏染色法观察细胞形态学变化，流式细胞术测定细胞凋亡率，丝／苏氨酸磷酸化酶检测试剂盒分析药物对细胞内PP2A活性的影响，Western blot检测细胞内PP2A各亚基表达。结果表明：蛋白磷酸酶抑制剂OKA能明显增强ATO对NB4、MR2细胞的增殖抑制；OKA能促进ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡；ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中PP2A活性均下降，且随ATO浓度的增加PP2A活性下降越明显；与OKA连用后PP2A活性下降更加明显；在ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中，PP2A／A表达较对照组均明显减少，而B和C亚基表达与对照组比较变化不明显。结论：在ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡过程中，细胞内PP2A／A表达减少，PP2A活性降低．且随ATO浓度增加PP2A活性下降越明显，抑制PP2A活性有助于ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡，     

流式细胞术计数血小板

目的　建立流式细胞仪计数血小板的实验方法。方法　用PE标记抗人CD61抗体标记全血中血小板 ,同时加入 5 μl已知浓度的FITC 微球溶液。流式细胞仪检测血小板 (FL2 )和微球 (FL1)的数量 ,换算出患者血小板浓度。结果　流式细胞仪法与血细胞计数仪法计数结果无显著性差异 ,低血小板组两法相关程度低于正常血小板组 ,提示流式细胞仪计数血小板能排除多种干扰因素 ,最低检出血小板量为 0 15 0× 10 9/L。该方法CV =5 4 % (Plt=2 2 0×10 9/L)和 11 1% (Plt=1 5 7× 10 9/L)。结论　流式细胞仪法适合对低血小板标本血小板的精确计数。     

血液离子钙的测定与影响因素

人体内虽然只有 1%左右的钙存在于细胞间液和细胞内 ,但却具有极其重要的生理作用。血液中的钙几乎全部存在于血浆中 [1 ] ,通常临床上所说的血钙即指血浆钙。血浆钙包括蛋白质结合钙、有机酸结合钙和离子钙。其中离子钙约占总钙的 46 %～ 5 2 %。血液总钙的测量方法较为简单、快速 ,且廉价 ,适于大批量的自动操作 ,已广泛的应用于临床。直到 196 7年 Ross首先描述了第一支 Ca2 +选择电极及随后的离子钙分析仪的商品化 ,离子钙的检测才逐步应用于临床。国内 2 0世纪 90年代初即有许多关于离子钙测定的研究报道 ,但由于受仪器的性能与质量的…     

CD45RA／CD45RO T淋巴细胞检测的临床意义

ＣＤ4 5是白细胞共同抗原 ,属Ⅰ型跨膜蛋白 ,其胞浆端具有酪氨酸磷酸酶活性。ＣＤ4 5ＲＡ/ＣＤ4 5ＲＯ是ＣＤ4 5的两种亚型 ,由ＣＤ4 5肽链胞外区氨基端的三个外显子 (Ａ、Ｂ和Ｃ)发生旁路剪接而形成。缺乏三种外显子的同型称为ＣＤ4 5ＲＯ ,仅表达外显子Ａ的同型称为ＣＤ4 5ＲＡ。Ｔ细胞表达不同的ＣＤ4 5亚型与其功能差异有一定的关系。ＣＤ4 5ＲＡ可表达于髓质胸腺淋巴细胞和外周血Ｎａｉｖｅ/静止的ＣＤ4 +Ｔ淋巴细胞 ,Ｂ细胞也表达此抗原 ,而ＣＤ4 5ＲＯ表达于皮质胸腺淋巴细胞和外周血ＣＤ4 +记忆Ｔ细胞。单核细胞和粒细胞弱表达ＣＤ4…     

同行对读者来信的解读

《血浆因素对淋巴细胞HLA-B27流式细胞术表型分析的影响》一文的作者发现:用BD公司自动软件检测和分析HLA-B27时,对少数临床标本,软件无法找到要分析的目标细胞群(CD3阳性的T淋巴细胞),因而不能给出实验结果(见图A)。主要原因是:(1)仪器收集的淋巴细胞数量不足(淋巴细胞百分比较低的病人标本),软件拒绝分析。(2)标本中存在某些未知因素或者未能严格按SOP操作,导致细胞     

流式细胞仪ProCOUNT方法计数CD34^＋细胞

目的：评价流式细胞仪ProCOUNT方法计数CD34^ 细胞的方法及其临床应用，方法：用核酸染料设阈值，根据已知的干／祖细胞特点，表达CD34抗，CD45弱阳性或阴性，核酸染料着色强及侧向散射光低表达，用多参数设门策略精确识别干／祖细胞，结果：ProCOUNT方法批内精密度为15．8％（CD34^ ／有核细胞＝0．035％）和9．3％（CD34^ ／有核细胞＝2．785），平均回收率91．8％，12例标本中CD34^ 细胞平均为1．99％，结果为7511／μl。结论：ProCOUNT法操作简便，精密度高，能准确计数CD34^ 细胞，适合临床常规应用。     

Coulter JT─IR血细胞分析仪常见问题及处理方法

随着科技的发展．血细胞分析仪在临床上的应用日益普及，它不仅提高了工作效率，也为临床提供了丰富的资料，血细胞分析仪替代手工法进行血液学检验已成为临床检验发展的趋势。血液细胞分析仪种类、型号繁多，但是目前无论何种仪器都还不能完全替代人工检验，ICSH推荐手工法为临床血液学检验的参考方法。为了更好地使用好血细胞分析仪，我们分析了在日常工作中CoulterJT－IR血细胞分析仪常遇见的～些问题及处理方法。1白细胞无法分类。这主要是受温度的影响，冬季仪器和试剂都处于低温状态，应及时打开空调。需要注意的是尽管室温已经达…     

外周血白细胞HLA—B27的表达及临床意义

目的 观察非强直性脊椎炎与强直性兴椎炎（AS）病人外周血白细胞HLA－B27的表达，探讨各类白细胞HLA－B27表达对AS诊断价值。方法 用流式细胞术检测了20例AS和32例非AS患者外周血白细胞HLA－B27的表达。结果 对照组各群细胞HLA－B27表达量（以平均荧光强度表示）依次为单核细胞（65.33)、T淋巴细胞（52.55）、淋巴细胞（49.46）和粒细胞（17.02）。AS组各群细胞HLA－B27表达均显著高于对照组（P＜0.01），依次为单核细胞（337.51）、淋巴细胞（227.38）、T淋巴细胞（268.08）和粒细胞（98.47）。对照组与AS组淋巴细胞和T洒巴细胞HLA－B27的表达未见交叉。结论 检测淋巴细胞和T淋巴细胞HLA－B27的表达能最好地区别AS与非AS患者。