液质联用测定血浆中阿奇霉素及其人体药动学和相对生物利用度研究

 目的建立人血浆中阿奇霉素的高效液相色谱-质谱测定方法,用于研究阿奇霉素分散片的人体药动学及相对生物利用度。方法血浆样品中加入内标克拉霉素后,经乙酸乙酯提取,采用高效液相色谱-质谱法,电喷雾电离源选择性正离子峰检测。用建立的方法测定18名健康男性志愿者单剂量口服阿奇霉素分散片实验制剂或参比制剂的体内经时过程,由血药浓度数据获得各自的药动学参数,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果在2.5～800μg·L^-1内呈良好的线性关系,r= 0.999 3,平均回收率为98.1％,日内RSD≤11．3％,日间RSD≤8.6%,单次服用500 mg阿奇霉素分散片实验制剂或参比制剂后的药动学参数AUC_0-120,ρ_max,t_max,t_1/2分别为(5 856.5±1 423.6)和(6 096.8±1 111.0)μg·h·L^-1,(520.1±94.1)和(558.8± 74.0)μg·L^-1,(1.4±0.4)和(1.3±0.2)h,(36.1±10.2)和(36.2±11.7)h。相对生物利用度为(96.3±16.0)%。结论该方法灵敏度高,无杂质干扰,结果准确。测得的实验制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异,两种片剂为生物等效制剂。     

改建型STAT1-CC基因慢病毒载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达

目的:构建携带STAT1基因和突变型STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,转染肺癌A549细胞并检测STAT1和STAT1-CC基因在肺癌A549细胞内的表达.方法:采用PCR技术从质粒模板中扩增得到目的基因STAT1和STAT1-CC,将其接入含有CMV启动子和绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体中,构建慢病毒载体表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,双酶切和测序鉴定.分别将重组子Lenti-STAT1、LentiSTAT1-CC和包装质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,感染非小细胞肺癌细胞株A549.荧光显微镜观察A549细胞EGFP表达,Western Blotting验证STAT1在A549细胞株中的表达.结果:酶切及测序结果显示成功构建重组慢病毒表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,将慢病毒颗粒感染A549细胞48 h后,观察到宿主细胞内EGFP表达,Western Blotting证实STAT1蛋白在A549细胞中过表达.结论:本实验成功构建了携带STAT1基因和STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,并在A549细胞中过表达STAT1基因.     

一种兔耳中期增生性瘢痕动物模型的建立

目的建立兔耳中期瘢痕动物模型,寻找兔耳瘢痕形成的最佳位点。方法选用日本大耳白兔20只,在兔耳腹侧选定6个位点,作直径1cm直达软骨表面的皮肤全层及软组织缺损240个。创面暴露,于伤后7d去除软骨上面的肉芽及血浆痂壳一次。术后连续3个月观察创面自然愈合及瘢痕增生情况;用HE及苦味酸-天狼星红染色观察瘢痕形成及胶原分布情况;用计算机图像分析系统测定胶原含量。结果兔耳腹侧可制作类似人的增生性瘢痕模型,瘢痕的发生率42.5%～56.7%,瘢痕增生的高峰在造创后30～50d。不同位点瘢痕增生程度不同,胶原含量也不同。结论兔耳腹侧可建立中期瘢痕动物模型,兔耳腹侧的中分和耳尖外侧部分是制作兔耳增生性瘢痕的理想位点。     

重组体p5 TBF在大肠杆菌中表达产物的活性鉴定

目的为了进一步深入了解BDNF的生物作用,开展基因工程以及应用基础的研究,需要大量的BDNF.因此构建原核表达重组体就显得非常重要.方法从本室已构建的pGEMBF克隆中获取人BDNF全长编码片段与原核表达载体pGEX-5T连接,构成p5TBF重组体后,经转化大肠杆菌和IPTG诱导.结果该重组体经蛋白质含量测定,免疫狭缝杂交和ELISA测定,表明该菌体裂解液具有人BDNF抗原活性.结论p5TBF重组体在大肠杆菌中表达成功.     

大鼠骨折二期愈合模型的建立

目的：利用大鼠制备骨折二期愈合模型。方法 SD：大鼠股骨中段分别给予（1）骨折切开髓内针固定（髓内针置于髓腔内）,不外露）、（2）骨折切开髓内针固定（髓内针股骨远端外露）、（3）闭合骨折髓内针固定和（4）闭合骨折不固定四种方法处理,术后X线摄片和组织学检查。结果：骨折切开髓内针固定且针不外露组骨折重演二期愈合过程,效果最好。其他三组个别骨折愈合良好。但是大多数对位不佳。发生不愈合。结论：骨折切开髓内针固定且针不外露的方法可以建立骨折二期愈合模型。     

16例Dieulafoy病的急诊胃镜诊疗分析福建医科大学附属漳州市医院消化内科 赖亚栋 陈俊杰 许秋泳 林淑惠 刘麒樱 陈雪芬

目的：分析急诊胃镜在Dieulafoy病诊疗方面的作用。方法：回顾性分析2004年1月-2014年12月,求诊我科的16例Dieulafoy病的临床特点,急诊胃镜诊疗成功率等。结果：15/16例首次急诊胃镜明确诊断并给予止血夹、注射或联合止血治疗,1/16例经二次内镜得到诊疗,14例一次性成功止血,1例二次内镜成功止血,1例急诊胃镜经注射后转外科追加手术后无再出血,未出现相关并发症。结论：对 Dieulafoy病诊断治疗,急诊胃镜是简便、安全、有效的方法。 关键词： Dieulafoy病,急诊胃镜诊疗,分析     

Effect of Microgene pSVPoMcat Implanted to Modify Genetically Schwann Cells on Apoptosis After Spinal Cord Injury

Recent years, with the advancement of molecular biology, it has been recept that cell apoptosis is the result of gene expression and is regulated by extracellular factors.Crowe et al[1]have demonstrated in their study that cell apoptosis and necrosis coexsisted and both exacerbated CNS injury after CNS was injured. Many experiments showed that large amount of apoptosis proved that cell apoptosis is the key to secondary injury after SCI.Secondary degeneration and chrocic demyelination are c…     

小儿埋藏阴茎21例诊治分析

小儿埋藏阴茎是一种先天性畸形 ,若不及时手术 ,不仅会阻碍阴茎的正常发育 ,而且会对患儿的心理造成创伤。我院1998— 2 0 0 2年共收治埋藏阴茎患儿 2 1例 ,现分析报告如下。1　临床资料本组 2 1例 ,年龄 3～ 13岁 ,平均 6 .5岁。 19例伴包茎 ,2例在当地医院曾行包皮环切术。全部病例阴茎外观短小 ,耻骨联合下方可扪及与年龄大小相符的阴茎体。部分病例阴茎外观呈鸟嘴样。阴囊内可扪及发育正常的睾丸 ,性激素检查均在正常范围。2　手术方法19例行埋藏阴茎矫形术。操作如下 :①解除包茎。在阴茎包皮最狭窄处做环形切开 ,将阴茎包皮脱套至阴茎…     

人脑发育过程中髓鞘碱性蛋白基因的表达

为探索人脑髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）基因表达时空的秩序与髓鞘发生和形成之间关系，采用＾３２Ｐ－和生物素标记鼠ＭＢＰｃＤＮＡ和地高辛标记人ＭＢＰｃＤＮＡ探针，对发育过程中人脑进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交和原位杂交研究。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点分析结果显示：１６周胎龋脑ＭＢＰｍＲＮＡ表达已明显，Ａ５９０值近２．０／μｇＲＮＡ，随发育逐渐增国，至成年其表达增至９倍。８－２５周期龄脊髓和延脑切片以及２０、２２和２     

肺部超声评分与重症肺炎患者病情进展的相关性

目的 探讨肺部超声评分(LUS)与不同程度重症肺炎患者病情进展的相关性.方法 选取189例重症肺炎患者为研究对象,根据急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分分为非危重症组(53例)、危重症组(86例)及极危重症组(50例),随访3个月,比较各组LUS、临床肺部感染评分(CPIS)、序贯器官衰竭评分(SOFA)、氧合指...