CVB3-VP1基因免疫诱导特异性抗病毒免疫应答及保护作用

目的 :构建表达柯萨奇病毒B3(CVB3)主要包膜蛋白VP1的基因疫苗 ,并研究该疫苗诱导CVB3特异性免疫应答及免疫保护的作用。方法 :抽提CVB3RNA ,以RT PCR扩增VP1基因 ,克隆于真核表达载体 pcDNA3中 ,构建质粒pcDNA3 VP1。将该质粒转染Hela细胞 ,观察其表达情况 ;以 5 0 μgpcDNA3 VP1质粒DNA肌注免疫BALB/c小鼠 3次 ,检测CVB3特异性体液和细胞免疫应答。间隔 4wk以 5×LD50 的CVB3攻击小鼠 ,观察攻击后小鼠的存活情况。结果 :构建了重组质粒 pcDNA3 VP1,并在体外获得有效表达。以该质粒肌肉免疫BALB/c小鼠 ,可诱生高水平的IgM和IgG ,VP1多肽特异性淋巴细胞增殖反应及CTL活性均显著高于 pcDNA3免疫的对照组。病毒攻击试验表明 ,pcDNA3 VP1免疫组33.3%小鼠可长期存活 ,其心肌组织未见明显的病理学改变 ;而对照小鼠平均仅存活 6 .7d ,心肌显示大量的局灶性坏死和炎性细胞浸润。结论 :pcDNA3 VP1免疫可诱生CVB3特异性体液及细胞免疫应答 ,保护免疫小鼠抵抗CVB3的致死性攻击     

血清淀粉样P成分的DNA结合特性

目的 检测血清淀粉样P成分(SAP)与不同DNA的结合活性并研究SAP与DNA的结合是否有利于此类抗原的清除，探讨它在SLE发生发展中的作用及意义。方法 用亲和层析和凝胶过滤方法自小鼠和人血清中纯化SAP，分别提取来自细菌、质粒、酵母、小鼠淋巴细胞等不同DNA，用DOT-EIA方法检测SAP与它们的结合活性，用巨噬细胞吞噬实验观察SAP与DNA结合后对DNA清除的影响。结果 人和小鼠SAP均与细菌DNA结合最强，其次为质粒、酵母DNA，与淋巴细胞DNA和小牛胸腺DNA的结合较弱，与单链λDNA结合最弱；与来源于活化状态小鼠淋巴细胞DNA的结合力高于非活化状态；SAP与活化淋巴细胞DNA结合后可促进巨噬细胞对DNA的吞噬。结论 SAP与不同DNA结合活性各异。     

C3d-P28增强乙型肝炎病毒特异性基因免疫效果的研究

目的　观察补体C3d P2 8对基因免疫的调节作用及其不同拷贝数对调节作用的影响 ,为增强基因免疫效果寻求新方法。方法　PCR法获得补体C3d P2 8编码基因并以头尾串连方式将1～ 4拷贝C3d P2 8编码基因克隆至pVAON33,构建pVAON33 P2 8.[1～ 4 ]重组质粒 ,然后将HBV preS2 S编码基因分别插入pVAON33和pVAON33 P2 8.[1～ 4 ]质粒获得pVAON33 S2 S和pVAON33 S2 S P2 8.[1～ 4 ]重组质粒。肌肉注射各重组质粒DNA(每只 10 0 μg 10 0 μl)初次免疫小鼠 ,并以pVAON33为对照 ;12周后皮下注射HBsAg蛋白加强免疫各组小鼠 ,ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗 HBs IgG。结果　pVAON33 S2 S重组质粒免疫小鼠可诱导产生特异性抗 HBs IgG ,含不同拷贝C3d P2 8编码基因的重组质粒可诱导更高的特异性抗体 ,其中pVAON33 S2 S P2 8.4重组质粒诱导的抗体水平最高 (P <0 .0 1)。蛋白加强免疫后 ,含C3d P2 8编码基因重组质粒免疫组抗 HBs IgG迅速上升 ,并明显高于pVAON33 S2 S重组质粒免疫组 (P <0 .0 5 ) ,pVAON33 S2 S P2 8.4重组质粒诱导的抗体仍维持最高水平。结论　不同拷贝的C3d P2 8能不同程度地增强HBV preS2 S基因免疫诱导的特异性体液免疫及其蛋白加强后的回忆反应 ,其中 4拷贝C3d P2 8的增强作用较为显著。     

逆转录病毒载体PLIL-2SN转导人CD3AK细胞方法的建立

目的 :探讨CD3AK细胞在基因治疗中的应用 ,并对逆转录病毒载体转导CD3AK细胞IL 2基因的方法进行研究。方法 :利用逆转录病毒载体PLIL 2SN向人CD3AK细胞中导入IL 2基因。结果 :从转导细胞中RT PCR扩增出 347bpNeoR 基因特异性片段 ,并测出培养上清液中IL 2浓度为 3 .2 76 μg·L-1。结论 :转导的IL 2基因得到表达 ,转导成功。这有助于进一步研究转导后淋巴细胞的功能 ,以开展基因免疫治疗的研究     

双黄连注射液滴注致过敏1例

双黄连注射液临床多用于病毒性感染的治疗 ,如呼吸道感染、支气管炎、急性扁桃体炎等疾病。近期有一患者因感冒、低烧不退 ,经化验 ,系病毒感染 ,滴注双黄连注射液 ,出现严重过敏反应 ,现报告如下 :患者 ,38岁 ,男性 ,2 0 0 2年 3月 9日上午 ,因低烧多日 ,疲倦 ,到医院就诊 ,经化验检查诊断为病毒性感冒。即开处方用 5 %葡萄糖注射液 2 5 0ｍｌ ,加双黄连注射液 3支(2 0ｍｌ 支 ,黑龙江珍宝岛制药有限公司生产 ,批号2 0 0 2 0 12 0 )在家静脉滴注 1小时 30分钟后 ,液体大约剩2 0ｍｌ时 ,患者即感觉到怕冷 ,很快出现寒战、发抖 ,即停药。首…     

通脉口服液治疗慢性肾炎气虚血瘀证32例疗效观察

目的：探讨纯中药制剂通脉口服液对慢性肾炎的治疗作用。方法：按要求选择62例患者，随机分为2组，治疗组32例给予通脉口服液（含黄芪、三七等），对照组30例给予金水宝口服液。疗程均为6月。观察用药前后2组患者临床症状以及肾功能、尿蛋白、免疫功能、血液流变学及血脂变化情况。结果：治疗组总有效率93．75％，对照组总有效率60．0％；2组疗效比较，差异有非常显著性意义（P＜0．01）。结论：通脉口服液可以明显地改善患者的临床症状，具有改善肾功能，减少尿蛋白含量、调整免疫功能、改善血液流变学、降低血脂等作用。     

糜烂性胃炎146例治疗前后舌苔的变化研究

目的 :观察舌苔在糜烂性胃炎治疗前后的动态变化。方法。 14 6例经内镜诊断的糜烂性胃炎 (EG) ,采用清热解毒法治疗 ,进行治疗前后临床症状、胃镜、病理、Hp、舌苔等动态观察。结果 :舌苔与糜烂程度、HP感染 ,症状轻重有密切关系 ,Hp感染者 ,糜烂程度及症状重者 ,黄苔发生率显著增高 (P <0 .0 1) ,糜烂治愈后 ,黄苔发生率为 2 7.7% ,较治疗前的 82 .19% ,明显减少 (P <0 .0 1)。结论 :黄苔在胃热辨证及疗效评价中有重要参考意义 ,黄苔应引为胃热辨证的主证之一。     

通腑醒神液直肠滴注对出血中风神昏患者意识状态的影响

目的 :初步肯定通腑醒神液治疗脑出血昏迷疗效的基础上 ,评价直肠滴注该药对脑出血昏迷患者意识状态的影响。方法 :采用随机对照方法 ,将符合受试标准的病例在基础治疗上 ,治疗组给予通腑醒神液直肠滴注 ,对照组给予胃管鼻饲通腑醒神胶囊 ,疗程 7天 ;评价患者神志转清时间、昏迷评分、临床神经功能缺损积分改变。结果 :治疗前两组患者一般情况比较 ,基线基本一致。治疗后患者意识转清时间比较 ,治疗组患者意识转清时间短于对照组 (P <0 .0 5 ) ;疗程后昏迷评分 ,治疗组分值提高优于对照组 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1 )。治疗后 1 4天神经功能缺损评分改变比较 ,治疗组总显效为 5 4 .84 % ,总有效率为 80 .6 5 % ,与对照组比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :初步表明通腑醒神液直肠滴注较经胃给药 ,能尽快促使神志清醒 ,减轻昏迷的程度。提示通腑法直肠用药是治疗脑出血急性期神昏的有效方法 ,值得进一步的探讨