急性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1和5的表达及功能的实验研究

目的观察脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1β(IL1β)对大鼠肺微血管内皮细胞(LMECs)水通道蛋白1(AQP1)表达和功能的影响;同时在LPS诱发的大鼠急性肺损伤(ALI)模型观察AQP1、AQP5表达的变化。方法(1)体外实验:将第3代LMECs随机分为LPS组、TNFα组、IL1β组和DMEM对照组,实验组分别给予LPS、TNFα、IL1β刺激,应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定AQP1mRNA的表达以及免疫组化测定AQP1蛋白表达,同时采用放射性核素示踪法测定LMECs内氚水(3H2O)的放射强度。(2)体内实验:40只雄性Wistar大鼠随机分为LPS2h组、LPS4h组、LPS6h组、LPS8h组和对照组,LPS各组制成ALI模型,采用RTPCR测定ALI大鼠AQP1、AQP5mRNA表达以及免疫组化观察AQP1、AQP5蛋白表达。结果(1)体外实验:LPS、TNFα、IL1β组LMECsAQP1mRNA和蛋白表达显著低于DMEM对照组(mRNA表达分别为0.428±0.026、0.446±0.029、0.454±0.023和0.793±0.035,蛋白表达分别为0.366±0.009、0.374±0.014、0.377±0.007和0.660±0.013,P均<0.01);且LMECs内3H2O掺入量[(726±58)、(738±45)、(774±44)脉冲数/min]也显著低于DMEM对照组[(1148±70)脉冲数/min,P均<0.01]。(2)体内实验:ALI大鼠肺组织AQP1、AQP5mRNA表达(LPS2h组0.409±0.018、0.421±0.020,LPS4h组0.421±0.023、0.412±0.023,LPS6h组0.435±0.020、0.388±0.031,LPS8h组0.438±0.016、0.386±0.019)也显著低于对照组(0.794±0.015、0.787±0.022,P均<0.01)。结论AQP1、AQP5可能参与ALI/ARDS液体的异常转运,可能与肺水肿的发病机制有关。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型支气管肺组织CD44表达及其与气道炎症的关系

CD44在炎症反应等方面发挥重要作用,探讨CD44活化在慢性气道炎症发病中的作用,对于理解慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺内大量炎性细胞聚集的机制及防治COPD可能具有重要意义。一、材料与方法1.模型制备与分组:雄性Wistar大鼠 44只,体重 (200±20)g,随机分为 4组:每组 11只。(1)A     

急性呼吸窘迫综合征的机械通气治疗

急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syn-drome,ARDS),多发生于原心肺功能正常的患者,是由于心源性以外的各种肺内、肺外致病因素引起的以肺泡-毛细血管炎症损伤为主的急性Ⅰ型呼吸衰竭,为临床上常见的危重症之一。采用常规吸氧疗法难以纠正患者缺氧症状,即使采用有效的机械通气治疗,病死率仍可达40%~70%[1]。ARDS特征性病理生理改变为弥漫性、非均匀性的肺泡损伤,肺泡腔内大量蛋白质的渗出,肺实变、肺不张及顽固性低氧血症,主要的治疗措施是机械通气,但在机械通气过程中为使ARDS患者动脉血氧分压达到或超过55~60mmHg(1mm…     

关注肺肿瘤血栓性微血管病

最近,Uruga等报告了30例经尸检证实的肺肿瘤血栓性微血管病患者 （ pulmonary tumor thrombotic mieroangiopathy, PTTM）,较之以往零星的报道,该文更系统地对FITM进行了描述。PTTM是肿瘤患者一种严重而少见的并发症,目前尚未引起国内临床医生关注。研究报道,因肿瘤死亡患者的PTTM的发生率为1．4％,     

鞭毛蛋白致肺微血管内皮细胞炎症诱发共培养肺泡上皮细胞炎症的级联放大效应与信号传导通路

目的探讨鞭毛蛋白感染后炎症级联放大效应与信号传导通路。方法建立Transwell共培养体系,将人肺微血管内皮细胞株（ human pulmonary microvascular endothelial cells, HPMECs ）接种于Transwell小室的下层,培养2h后,将人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549细胞株接种于小室的上层与HPMECs共培养15d。实验分为3组：HPMECs与A549细胞共培养空白对照组、鞭毛蛋白（2μg／mL）感染HPMECs再与A549细胞共培养组（实验组I）、HPMECs加DAPT（Notch信号阻断剂,终浓度10μmol／L）预处理再行鞭毛蛋白感染与A549细胞共培养组（实验组Ⅱ）。用ELISA法检测各组HPMECs和A549细胞培养上清液TNF-α蛋白表达,检测HPMECs上清液Notchl蛋白表达水平。结果与共培养空白对照组比较,鞭毛蛋白感染HPMECs后,共培养HPMECs和A549细胞上清液TNF-α蛋白[（11．45±1．59）pg／mLvs（6．13土0．86）pg／mL,（P〈0．01）、（9．93±1．46）pg／mLvs（5．895：0．83）pg／mL,（P〈0．01）]和HPMECs上清液中Notchl蛋白[（7．03±1．06）pg／mL坩（5．39±0．76）pg／mL,（P〈0．05）]表达水平皆明显升高,提示鞭毛蛋白引起HPMECs炎症,且向A549细胞传导级联放大,而HPMECs使用Notch信号阻断剂处理后,HPMECs上清液Notchl蛋白表达水平明显降低[（3．78±0．53）pg／mLvs（7．03±1．06）pg／mL,（P〈0．01）],共培养A549细胞上清液TNF-α蛋白表达水平也显著下降[（7．47±1．05）pg／mL坩（9．93±1．46）pg／mL,（P〈0．05）],表明HPMECs炎症反应经过Notch信号通路传导向A549细胞级联放大。结论鞭毛蛋白感染肺微血管内皮细胞能引起炎症反应,并可能经过Notch信号通路传导向肺泡上皮细胞级联放大。     

人肺癌组织细胞Na+/H+交换泵mRNA表达及其意义的研究

Ｎａ＋／Ｈ＋交换泵（Ｎａ＋／Ｈ＋ｅｘｃｈａｎｇｅｒ１，ＮＨＥ１）是维持细胞内ｐＨ在中性或偏碱性的一种重要膜蛋白。体外培养的肿瘤细胞在酸刺激下，通过上调ＮＨＥ１的表达而加强Ｎａ＋／Ｈ＋交换，从而防止细胞内酸化［１，２］。由于肿瘤细胞的糖酵解优势...     

脂多糖、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的　通过观察脂多糖 (LPS)、肿瘤坏死因子 α(TNF- α)、白细胞介素 1β(IL- 1β)对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白 1(AQP- 1)表达的影响 ,为研究急性肺损伤时肺水异常代谢的机制提供实验依据。方法　在体外培养大鼠肺微血管内皮细胞 ,分为LPS组、TNF α组、IL- 1β组和对照组 ,前三组分别给予LPS 10 0ng/mL、TNF -α 10 0 0U/mL、IL -1β10 0 0U/mL刺激 4h ,应用半定量RT- PCR法以及免疫细胞化学染色法检测AQP- 1的表达。结果　刺激组AQP -1的表达显著低于对照组 (P <0 . 0 1)。结论　LPS、TNF -α、IL- 1β刺激下AQP- 1表达下降 ,提示AQP -1在急性肺损伤时可能与肺水代谢异常有关。     

临界压在睡眠呼吸暂停低通气综合征诊断及治疗中的作用

临界压是指维持上气道开放所需的最低气道内压，其反映上气道塌陷的程度，其遵循Starling—Resistor模型的数学原理，能用加压振荡技术（Forced oscillation technique，FOT）进行测定；提出了睡眠呼吸暂停低通气综合征的治疗原则为：病因治疗、保持呼吸道通畅、防治并发症。     

Effects of NHE-1 ribozyme gene transfection on apoptosis of rat pul-monary artery smooth muscle cells in vitro

Objective: To investigate the effects of the transfection of NHE-1 ribozyme gene on the apoptosis of pulmonary artery smooth muscle cells (PASMC) in vitro. Methods：After NHE-1 ribozyme gene was de-signed, synthesized and then cloned into plasmid pLXSN, the recombined plasmid was tansfected into cul-tured rat PASMC. Expression of NHE-1 mRNA was detected with semi-quantitative RT-PCR. Intracellular pH (pHi) was measured by using fluorescence dye BCECF-AM. Cell cycle was measured with aid of flow cy-tometric DNA analysis. Cell apoptosis was observed with electron microscopy and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labelling (TUNEL) respectively. Results. The NHE-1 mRNA expres-sion level and pHi value were significantly lower in PASMCs transfected with NHE-1 ribozyme gene than those transfected with pLXSN or without transfection. Meanwhile, the apoptosis rate of cells transfected with NHE-1 ribozyme gene was increased significantly. Morphology of cell apoptosis was observed in the cells transfected with NHE-1 ribozyme gene under an electron microscope. Conclusions The transfection of NHE-1 ribozyme gene induces the apoptosis of PASMCs by inhibiting NHE-1 expression and intracellular acidification.     

代谢性酸中毒犬脑脊液［HCO－_3］与Pco_2的关系

作者旨在探讨代谢性酸中毒时脑脊液（ＣＳＦ）［ＨＣＯ－３］与ＰＣＯ２的相互关系。两组代谢性酸中毒模型均由静脉内输入０．２ｍｏｌ／ＬＨＣＩ产生，［ＨＣＯ－３］ａ１ｈ内下降到（１２２）ｍｍｏｌ／Ｌ。实验６ｈ时ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］：１组（正常碳酸血性代酸）下降了１．６ｍｍｏｌ／Ｌ；组（低碳酸血性代酸）下降了７．０ｍｍｏｌ／Ｌ．ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］与ＣＳＦＰｃｏ２，显著正相关（ｒ＝０．８３４，Ｐ＜０．０ｌ）．结果说明代谢性酸中毒时ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］并不受［ＨＣＯ－３］ａ的明显影响，主要取决于ＣＳＦＰｃｏ２的变化，其调节机制与脉络丛上皮细胞内ＣＯ２的水化作用和ＣＡ活性有关。