长脉冲翠绿宝石激光脱毛的组织学研究

目的 :通过动物模型Ｃ5 7小鼠及人头皮的激光脱毛实验探讨翠绿宝石长脉冲激光的脱毛机制。方法 :用翠绿宝石长脉冲激光 (波长 75 5ｎｍ ,脉宽 2 0ｍｓｅｃ ,光斑直径 10ｍｍ)对Ｃ5 7小鼠和人头皮进行脱毛实验研究 ,治疗能量 10～ 2 5Ｊ ｃｍ2 ,两次治疗间隔为 2～ 4周。临床观察激光照射前后的毛发改变情况和光镜、电镜观察治疗前后毛囊及皮肤其它结构的病理改变。结果 :翠绿宝石长脉冲激光对生长期毛囊有选择性损伤作用 ,通过损伤毛囊根鞘细胞及毛母质细胞 ,最终达到毛囊萎缩 ,毛发不再生长的目的。结论 :应用适当能量进行治疗 ,翠绿宝石长…     

人骨髓间质干细胞分离纯化及基本生物学特性研究

目的　分离纯化人骨髓间质干细胞 (MSC) ,研究其基本生物学特性。方法　用比密 1 .0 73Ficoll淋巴细胞分离液分离成人骨髓MSC ,体外扩增 ,观察细胞生长特性 ,流式细胞仪检测骨髓MSC表面抗原表达及细胞周期 ,染色体技术分析骨髓MSC遗传特性。结果　成人骨髓MSC培养 3d后有散在呈针尖状的贴壁细胞 ,7～ 1 0d后形成集落或融合呈纤维状 ;体外扩增原代可获得 (4～ 6 )× 1 0 5个细胞 ,1 0代可获得 (1～ 5 )× 1 0 1 0 个细胞 ,5～ 6代以后的细胞增殖能力下降 ;流式细胞仪检测结果显示 :CD1 3、CD2 9、CD4 4、CD71表达阳性 ,CD3、CDl4、CD33、CD34、CD38、CD4 5、HLA DR不表达 ;染色体核型正常 ;细胞周期分析显示 ,G0 /G1 期 :79.4 8% ,G2 /M期 :6 .1 0 % ,S期 :1 4 .4 2 %。结论　人骨髓MSC体外具有较好的增殖更新能力 ,3～ 6代的人骨髓MSC作为组织工程细胞具有广阔的应用前景     

猪骨髓间质干细胞生物学特性及分化为成骨细胞和心肌细胞的能力

目的：建立猪骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)体外分离培养方法。对猪MSCs的生物学特性及分化为成骨细胞和心肌细胞的能力进行研究。方法：抽取猪骨髓体外培养MSCs，绘制生长曲线，用流式细胞仪检测细胞周期。选择第二代MSC体外诱导分化为成骨细胞和心肌细胞。通过碱性磷酸酶染色及钙沉积对成骨细胞进行鉴定；用免疫组化，透射电镜鉴定心肌细胞。结果：MSC细胞形态呈长梭形或多边形，细胞生长曲线呈S形，群体倍增时间为26h，细胞周期显示有69．22％细胞处于Go／G1期，24．44％细胞处矛S期，细胞化学染色显示POX、SB阴性，PAS、α-NAE阳性，约1％细胞ALP阳性。MSC经体外诱导分化后可形成骨细胞和心肌细胞。结论：猪骨髓MSCs可在体外长期、稳定培养，具有多潜能分化活性，可以为何质干细胞系及组织工程研究提供较理想的细胞来源。为临床何质干细胞的应用研究提供动物模型，并为进一步的临床康复研究提供实验依据。     

电针对大鼠脊神经节内乙酰胆碱代谢的影响

脊神经节是体躯一级感觉神经元胞体集积区,是研究一级感觉传入神经化学性质的一个重要部位。本文拟用电针和切断背根的方法以观察脊神经节内乙酰胆碱(Ach)含量及乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的变化,旨在探讨外周Ach与针感一级传入的关系。     

LncRNA在肿瘤及微环境中的作用研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)在肿瘤发生、发展和转移过程中具有重要作用。肿瘤微环境是由多种细胞构成的局部病理环境,参与肿瘤发生、发展和转移。最新研究表明lnc RNA能够调控肿瘤细胞和微环境之间的相互作用,进而影响肿瘤发生、发展和转移。该文就lnc RNA在肿瘤及其微环境中的作用、分子机制和临床意义作一综述。     

胎儿骨髓间质干细胞体外诱导为神经细胞的初步实验研究

目的：体外定向诱导胎儿骨髓问质干细胞(MSC)分化为神经细胞。方法：采用Ficoll淋巴细胞分离液分离MSC，体外扩增、传代，采用β-巯基乙醇等诱导剂诱导MSC分化为神经细胞，免疫组化鉴定神经丝蛋白(NF200)、神经元烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)，并且用RT-PCR鉴定NF200、NSE和GFAP的mRNA表达情况。结果：胎儿骨髓MSC在体外扩增第5代以后，经诱导后，形态学上可呈现神经细胞形态特征；免疫组化显示诱导出的神经细胞NF200、NSE和GFAP均有阳性表达；RT-PCR也显示诱导后表达量明显增加。结论：胎儿骨髓MSC在体外可以分化为神经细胞。     

LncSox4在非小细胞肺癌中的表达及生物学作用

目的检测LncSox4在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平变化,初步探讨其生物学作用及机制,为NSCLC诊断和治疗提供新的生物指标。方法采用qRT-PCR检测LncSox4在NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平。通过克隆形成试验、生长曲线分析、Transwell迁移和侵袭试验检测敲除LncSox4对A549细胞生物学功能的影响;采用流式细胞术分析细胞周期情况;采用qRT-PCR和western blot检测上皮-间质转化(EMT)相关基因及蛋白质的表达水平。结果与癌旁对照相比,LncSox4在NSCLC癌组织中呈显著高表达(t=7.109,P0.01);LncSox4基因沉默后,A549细胞生长速度减缓,细胞克隆形成数量减少(P0.01),细胞迁移和侵袭能力降低(P0.01),诱导细胞发生G_1期阻滞(P0.01);LncSox4基因沉默抑制A549细胞中Cyclin D1、c-Myc、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达;LncSox4基因沉默还显著降低EMT相关转录因子Snail、Slug和Twist的表达水平。结论 LncSox4在NSCLC中高表达,通过影响细胞增殖、迁移和侵袭促进NSCLC恶性进展,有望成为NSCLC诊疗新靶点。     

间质干细胞通过调控miR-92b修复顺铂诱导的急性肾损伤

目的探讨骨髓间质干细胞(BM-MSCs)修复顺铂诱导的急性肾损伤的分子机制。方法以6 mg/kg顺铂的剂量经腹腔注射大鼠体内,24 h后经尾静脉输注BM-MSCs(BM-MSCs组)或PBS(PBS组),以未注射顺铂者作为正常对照组;HE染色及免疫组织化学染色法检测BM-MSCs对肾损伤的修复情况;体外培养NRK-52E细胞并经顺铂作用6 h后,继续培养48 h(顺铂组)或与BM-MSCs共培养48 h(细胞组),未用顺铂处理的NRK-52E细胞作为对照组;qRT-PCR检测其miR-92b及其靶基因PTEN的表达水平,western blot检测其p-Akt蛋白的表达水平。结果 HE染色结果显示,BM-MSCs组的肾小管蛋白质管型明显少于PBS组,肾小管结构明显改善;免疫组织化学染色结果表明,BM-MSCs组的增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数[(131.0±14.4)个]明显高于PBS组[(42.2±6.1)个],差异有统计学意义(t=11.28,P0.01);qRT-PCR结果表明,体内试验中,与正常对照组miR-92b和PTEN基因的表达水平(1.11±0.78,1.01±0.21)相比,PBS组分别为4.64±1.06和0.61±0.2,差异有统计学意义(P0.05),BM-MSCs组分别为2.27±0.81和1.1±0.1,差异亦有统计学意义(P均0.05);体外实验中,与阴性对照组miR-92b和PTEN基因的表达水平(1.12±0.77,1.02±0.13)相比,顺铂组分别为7.64±0.72和0.58±0.2,差异有统计学意义(P均0.05),细胞组分别为4.38±0.50和1.15±0.23,差异亦有统计学意义(P均0.05);western blot检测结果显示,与顺铂组p-Akt蛋白的表达水平(0.96±0.18)相比,细胞组p-Akt蛋白表达水平为2.11±0.11,差异有统计学意义(P0.01)。结论 BM-MSCs能够修复顺铂诱导的急性肾损伤,可能通过下调miR-92b发挥作用。     

DiO标记对人骨髓间充质干细胞生物学功能的影响

目的用细胞膜绿色荧光探针Di O标记人骨髓间充质干细胞(h BMMSCs),探讨其对h BMMSCs生物学功能的影响。方法采用Ficoll密度梯度离心法分离、培养h BMMSCs;流式细胞术检测Di O对h BMMSCs的标记效率;通过Transwell迁移实验、平板克隆实验、生长曲线分析、成脂及成骨诱导实验分别检测Di O对h BMMSCs迁移、增殖和多向分化能力的影响。结果Di O对h BMMSC的标记效率可达(99.5±0.4)%;Transwell迁移实验、平板克隆实验、生长曲线分析、成脂及成骨诱导实验结果表明,与未标记h BMMSCs相比,标记后的h BMMSCs迁移、增殖及成脂、成骨分化能力未见明显改变,差异均无统计学意义(P均0.05)。结论经Di O处理未见明显影响h BMMSCs的生物学功能,可做为安全、有效的h BMMSCs体外标记绿色荧光染料。     

LINC00978在非小细胞肺癌中的临床价值和生物学作用

目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)LINC00978在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达变化及生物学功能,并初步探讨其作用机制。方法采用qRT-PCR检测NSCLC患者肿瘤组织与血清中LINC00978的表达水平。通过CCK-8、平板克隆、Transwell迁移和侵袭实验观察LINC00978敲减和过表达对A549细胞生物学功能的影响。采用流式细胞术、qRT-PCR和western blot探究LINC00978的作用机制。结果 LINC00978在NSCLC患者肿瘤组织(t=2.465,P0.05)和血清(t=8.781,P0.01)中呈高表达。LINC00978敲减抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭能力(P均0.01),诱导G_1期阻滞以及细胞凋亡(P均0.01)。LINC00978敲减下调Cyclin D1和Bcl-2的表达而上调Bax的表达(P均0.05)。此外,LINC00978敲减抑制N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug和Twist的表达而促进E-cadherin的表达(P均0.05)。LINC00978过表达则具有相反作用。结论 LINC00978在NSCLC中高表达,并促进NSCLC发生、发展,具有成为NSCLC诊断及治疗新靶点的潜能。