早产孕妇胎盘促肾上腺皮质激素释放激素mRNA的表达及脐血硫化去氢表雄酮测定及其意义

目的探讨胎盘促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropinreleasinghormoneCRH)mRNA水平及脐血硫化去氢表雄酮(DHEAs)含量与早产的相关性。方法选取2002年1月至2003年6月在镇江第四人民医院分娩的初产妇共33例。各组胎盘组织的CRHmRNA采用RTPCR方法测定。脐血DHEAs含量采用ELISA方法检测。结果自发性早产组、医源性早产组胎盘CRHmRNA呈高度表达且显著高于正常产组,差异有显著性意义(P<005);医源性早产组脐血DHEAs含量显著低于正常产组及自发性早产组,差异有显著性意义(P<005);医源性早产组虽CRHmRNA也呈高度表达但其脐血DHEAs含量却显著降低。结论自发性早产的分娩动因可能与胎盘CRHmRNA异常高度表达有关,早产的病理生理机制与CRH在早产时的分泌增加有关;脐血DHEAs含量高低在早产中的意义尚不明确。     

白细胞介素-2与信号转导

白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )是一种重要的免疫调节细胞因子 ,是由被抗原活化的Ｔ细胞产生的糖蛋白 ,具有导致Ｔ细胞的活化与增殖 ,Ｂ细胞的生长和分化 ,促进ＬＡＫ细胞生成等作用[1] 。此外 ,它还有促使成熟Ｔ细胞凋亡的负调节作用。这些生物活性的发挥都是通过与细胞表面ＩＬ 2受体 (ＩＬ 2Ｒ)结合 ,活化一系列信号分子 ,最终导致一系列基因的表达来实现的。ＩＬ 2信号传递的研究结果显示 ,ＩＬ 2与ＩＬ 2Ｒ的结合诱导了ＩＬ 2Ｒβ和γ链间的异源二聚体的形成 ,导致几个非受体蛋白质酪氨酸激酶 (ＰＴＫｓ)活化 ,即Ｊａｋ ,Ｓｙｋ ,Ｓｒｃ家族 …     

长非编码 RNA 在消化系统肿瘤中的研究进展

长非编码 RNA（lncRNA）是一类长度大于200个核苷酸的 RNA 分子,缺乏功能性开放阅读框,无编码蛋白能力。最近,越来越多的研究证据表明 lncRNA 促进了肿瘤的发生发展。lncRNA 表达异常与消化系统肿瘤生长、转移及耐药等密切相关,可作为消化系统肿瘤诊断、治疗及预后判断的分子标志物。     

耐药金葡菌皮肤感染一例报道

临床资料患者女,27岁,职业为废旧物品回收者;因肛周疼痛溃破伴发热10d就诊。在门诊拟诊“肛周脓肿”,经切开排脓,无脓液,后持续高热,且肛周红肿范围迅速扩大,给予了胺卡那、菌必治等药物治疗,无明显效果,以“肛旁蜂窝织炎”收入院。体检T38．5℃,P108次／min,...     

人磷酸二酯酶同工酶3A在昆虫杆状病毒系统中的表达

目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同工酶3A(HPDE3A)在Tn细胞中的表达。方法用重组HPDE3A杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达，通过RT-PCR，SDS-PAGE和Western blotting技术检测HPDE3A表达情况。结果重组杆状病毒在感染Tn细胞后形态变化明显，获得表达产物,RT-PCR扩增结果证实了Tn细胞中HPDE3A的mRNA水平增高，Tn细胞能够表达出与HPDE3A多克隆抗体结合的蛋白，蛋白分子质量约为120 kD。结论HPDE3A在昆虫杆状病毒表达系统中可以稳定表达，为进一步研究HPDE3A的生物学活性及筛选HPDE3A抑制剂奠定了基础。     

间质干细胞、肿瘤干细胞和肿瘤

近来研究认为肿瘤来源于干细胞,提出了肿瘤中存在极少量肿瘤干细胞(CSC)的新学说.问质干细胞(MSC)作为间质细胞的来源,与肿瘤的关系尤为密切.本文就间质干细胞,肿瘤干细胞和肿瘤的发生,发展作一综述.     

PKH26标记大鼠骨髓间质干细胞的实验研究

目的建立PKH26标记大鼠骨髓间质干细胞（MSCs）的方法，并探讨标记MSCs的基本生物学活性。方法大鼠MSCs按PKH26标记程序进行标记后培养，采用激光共聚焦显微镜、流式细胞分析仪等观察细胞生长状态和荧光标记活性变化；应用RT-PCR检测标记后MSCs的GAPDH、nucleostemin及Bmi-1基因的表达；选用碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色及骨形成蛋白3（BMP3）基因表达分析等技术，观察标记后MSCs体外分化成骨细胞的特性。结果PKH26标记后细胞呈红色荧光，荧光的强度随着PKH26浓度的增加而递增，并与传代时间和代数相关；标记后细胞生长状态良好，基本生长特性如传代培养和生长曲线无明显改变；细胞GAPDH、nucleostemin及Bmi-1基因表达未见改变；标记MSCs诱导后ALP、Von Kossa染色阳性，呈现典型的成骨细胞形态和生物学特征，并表达BMP3基因。结论PKH26可稳定标记大鼠骨髓MSCs并能传代培养，标记后细胞形态、生长活力及多向分化潜能等无明显影响，该技术可用于追踪MSCs转归、可塑性及干细胞移植方面的实验研究。     

胃癌间质干细胞活化Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞增殖及迁移作用的探讨

目的探讨胃癌间质干细胞(gastric-cancer-derived mesenchymal stem cells,GC-MSCs)活化Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞增殖、迁移的作用。方法采用贴壁培养法从胃癌组织中分离GC-MSCs,成骨、成脂培养基诱导GC-MSCs分化。收集GC-MSC上清,胃癌细胞系HGC-27分别经L-DMEM培养液(Control组)、GC-MSC上清(GC-MSC组)、GC-MSC上清及20μmol/L ICG001(GC-MSC+ICG001组)处理24 h,克隆形成试验和Transwell迁移试验分别检测细胞增殖、迁移能力,免疫荧光染色或western blot检测Wnt/β-catenin信号相关蛋白(β-catenin、CD44、CyclinD3)的表达水平。结果 GC-MSC上清处理组HGC-27细胞增殖形成的克隆数[(203.700±8.762)个]显著高于Control组[(33.670±1.856)个](t=18.98,P0.01),且其迁移细胞数[(349.700±7.881)个]较Control组[(145.000±3.712)个]亦显著增多(t=23.46,P0.01)。GC-MSC上清可促进HGC-27细胞β-catenin入核,诱导Wnt/β-catenin信号下游蛋白CD44、CyclinD3的表达。Wnt/β-catenin信号抑制剂ICG001可下调上述分子的表达,逆转GC-MSC上清对HGC-27细胞的促增殖、促迁移作用。与GC-MSC组[(203.000±3.606)个]相比,GC-MSC+ICG001组的克隆细胞数[(70.667±2.603)个]显著减少(q=39.24,P0.01),且迁移细胞数[(166.000±3.215)个]较GC-MSC组[(352.700±4.096)个]显著降低(q=47.73,P0.01)。结论 GC-MSCs活化Wnt/β-catenin信号并促进胃癌细胞增殖及迁移。     

BMI-1干扰基因重组腺病毒质粒的构建及鉴定

背景：BMI—1的表达对于维持干细胞特别是造血干细胞、神经干细胞、肿瘤干细胞的自我更新能力是不可缺少的。目的：以细菌内同源重组法构建携带BMI-1干扰基因的重组腺病毒载体，制备重组腺病毒pShuttle—H1—AdEasy—1—P1P2／P3P4。设计、时间及地点：开放性实验，于2006-02，2007-08在江苏大学医学技术研究所完成。材料：限制性内切酶由NewEnglandBioLabs提供，腺病毒骨架质粒pAdEasy—1、大肠杆菌BJ5183、Ad293细胞由南京师范大学生科院分子医学生物技术江苏省重点实验室惠赠。方法：采用细菌内同源重组法构建RNA干扰腺病毒载体pShuttle—H1，PmeI线性化质粒，通过同源重组腺病毒骨架蛋白pAdeasy—1，得到重组的腺病毒干扰质粒；经PacI线性化后用脂质体转染方法转染293A细胞，收获腺病毒重组病毒子，以未转入小干扰RNA片段的重组质粒为对照，包装后收集细胞，反复裂解细胞获得腺病毒。主要观察指标：腺病毒质粒重组构建及鉴定情况。结果：经酶切鉴定，已成功构建siRNA的重组腺病毒表达载体pShuttle—H1—AdEasy—1—P1P2/P3P4，获得了重组病毒子。结论：利用新型腺病毒载体pAdeasy—1系统可在短期内制备BMI—1干扰基因的腺病毒表达载体，并制备出重组腺病毒P1P2/P3P4。     

脐带间质干细胞来源的外切体对顺铂诱导的人肾小管上皮细胞损伤的修复作用

［摘要］目的: 研究人脐带间质干细胞来源的外切体（hucMSC-Ex）对顺铂诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的修复作用,并探讨可能的作用机制。方法: 体外建立顺铂诱导的HK-2细胞损伤模型,实验组以16 μmol/L浓度的顺铂作用HK-2细胞16 h,再加入hucMSC-Ex共培养,同时选择人肺成纤维细胞的外切体（HFL1 Ex）为对照,8 h后采用蛋白质印迹法和FITC-Tunel技术检测hucMSC-Ex对损伤HK-2细胞的抗凋亡和促增殖情况。未经任何处理的HK-2细胞作为正常对照组,单纯顺铂损伤并加等量PBS为PBS对照组。结果： 成功建立了顺铂诱导的HK-2细胞损伤体外模型, 蛋白质印迹分析显示hucMSC-Ex处理改善了顺铂对HK 2细胞的损伤,凋亡蛋白Bax表达降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达相应升高。FITC-Tunel检测也显示HK-2细胞的凋亡明显减弱。而MTT分析显示hucMSC Ex处理后,HK 2细胞的增殖能力显著增强。结论：HucMSC-Ex对顺铂诱导的HK-2细胞损伤有一定的修复效果,可能是通过促进HK 2细胞的增殖和抑制其凋亡来实现的。