骨髓间质干细胞与肿瘤细胞中FN1、NME2、TIMP3基因表达检测

目的探讨纤维连接蛋白1(FN1)、肿瘤转移抑制基因2(NME2)、组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)基因在胎儿骨髓间质干细胞(FMSCs)、成人骨髓间质干细胞(AMSCs)、F6、SGC及白血病细胞中的差异表达,寻找肿瘤和白血病的分子生物学特征。方法分别提取FMSCs、AMSCs、F6、SGC及白血病细胞的总RNA,逆转录cDNA,以cDNA为模板用PCR和实时PCR技术分别测定FN1、NME2、TIMP3基因表达水平。结果AMSCs组FN1、NME2、TIMP3基因表达水平均高于FMSCs、F6、SGC组(P<0.001);F6细胞以及白血病细胞中未能检出TIMP3基因的表达。结论FN1、NME2、TIMP3基因的下调以及TIMP3基因的缺如,可能是FMSCs突变为F6肿瘤细胞的分子特征之一;TIMP3基因的下调可能是肿瘤细胞的一种分子标志。     

Q－开关红宝石激光治疗246例太田痣

目的 报道Ｑ－开关红宝石激光治疗太田痣的临床观察和病理变化。方法 根据患者不同的年龄,性别以及太田痣色素的浅,分别采用４－６Ｊ／ｃｍ６２不同的能量密度,用Ｑ－开关红宝石激光治疗太田痣患者２４６例。脉冲时间为４０ｎｓ,光斑直径为５ｍｍ或６．５ｍｍ。每次治疗后色素仍未消退者,间隔３－６个月再行下一次治疗。治疗前,后及皮肤表面恢复正常后,各取活组织标本一份行光镜和电镜检查。结果 Ｑ－开关红宝石激光治疗３     

上皮细胞间质样转化相关基因在胃癌组织中的表达及其相互关系

目的:研究上皮细胞间质样转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的相关基因在胃癌组织中的表达及相互关系.方法:用实时定量PCR方法检测23例胃癌患者癌及癌旁组织中介导EMT发生的转录因子 Slug、Twist以及E-钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达情况,并分析胃癌...     

脐带间质干细胞心肌样分化中干细胞标志物的表达

目的:探讨人脐带间质干细胞 (human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)在体外特定条件下是否可以定向分化为心肌样细胞及干细胞标志物的表达变化.方法:采用脐带组织块贴壁培养方法分离人脐带间质干细胞,用第2代hucMSC进行体外心肌细胞诱导分化;采用 RT-PC...     

体外诱导人骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞

目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞.方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)及CCl4损伤的小鼠肝脏共培养等诱导方式,在不同时间点分别用RT-PCR和荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因的表达,免疫组织化学染色检测肝细胞标志. 结果: 在HGF和bFGF诱导第7天时甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin-18, CK18)和色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase,TDO)基因表达阳性,CK18和TDO的表达随诱导时间延长增高;第7天诱导细胞组织化学染色AFP、白蛋白(ALB)、肝细胞核因子(hepatocyte nuclear factor,HNF)、肝细胞特异性抗原(HSA)和CK18表达阳性.与损伤小鼠肝组织共培养21 d后细胞表达AFP和TDO.结论:HGF和bFGF联合诱导以及与CCl4损伤肝组织共培养的方法可体外促进人MSCs分化为肝细胞样细胞,可为肝脏疾病或肝损伤的干细胞治疗提供细胞来源.     

TGF-β1诱导人肝HL7702细胞发生上皮细胞间质转化的实验研究

目的:探讨体外培养的人肝细胞系在重组人转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下是否发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchyme transition,EMT)以及相关标志物的表达变化。方法:人类肝细胞HL7702在含20%小牛血清的1640培养液培养2 d,改用无血清培养并TGF-β1分别诱导24 h,48 h,72 h;观察诱导前后细胞的形态学变化,实时荧光定量RT-PCR及蛋白质免疫印迹技术分析细胞中EMT相关基因和蛋白表达情况。结果:显微镜下观察到TGF-β1诱导前,肝细胞是不规则的六边形,诱导后细胞形态拉长变成纺锤形,细胞间隙变大;实时荧光定量RT-PCR和免疫印迹显示上皮化标志物E-钙黏附蛋白在TGF-β1诱导后的细胞中表达显著下降,而间质化标志物N-钙黏附蛋白、波形蛋白和Twist却显著增加。结论:正常人类肝细胞株HL7702经重组人TGF-β1的诱导发生上皮-间质转化,这为深入研究TGF-β1和肝纤维化之间的关系奠定了基础。     

基于复杂网络的秀丽隐杆线虫神经系统性质研究进展

秀丽隐杆线虫具有结构简单、易于开展实验、组成与人类神经系统类似的特点，在复杂神经功能与神经系统疾病相关研究中具有重要地位，因而成为了第一个被完全测定连接组，即全体神经连接的生物。本研究关注以复杂网络为出发点的秀丽隐杆线虫神经网络的研究工作，归纳总结了该领域的研究进展。介绍了秀丽隐杆线虫的研究背景，并从静态、时变、动力学这3种研究性质出发，分别进行概述与分析讨论，并说明了相关研究成果的实际应用情况，最后探讨了线虫神经系统性质研究方面可能存在的问题，为下一步研究提供思路。     

人脐带间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞样细胞及ERK1/2通路活化研究

目的探讨人脐带间充质干细胞(hucMSC)体外诱导分化为肝细胞样细胞(HLC)的机制。方法用组织块贴壁培养法分离、纯化和扩增hucMSC,观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志;经肝细胞生长因子(HGF)/碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)/抑瘤素M(OSM)联合诱导后,用RT-PCR、免疫荧光法检测肝细胞和hucMSC中特异基因AFP、ALB、TDO、CK18和ABCG2、CD44、OCT4及ALP、AFP、CK18蛋白的表达;用western blot检测经诱导后的hucMSC中ERK1/2信号通路活化情况。结果流式细胞术结果表明,分离培养的hucMSC表达干细胞特异性标志CD13、CD29、CD44,不表达造血干细胞标志CD34、CD45和HLA-DR;RT-PCR结果表明,诱导后的hucMSC ALB、AFP、TDO、CK18基因表达增强,ABCG2、CD44、OCT4表达降低;免疫荧光结果表明,hucMSC可在体外诱导分化为具有肝系细胞表型细胞,其ALP、AFP、CK18蛋白表达增强;western blot结果表明诱导后hucMSC的ERK1/2磷酸化水平增加。结论 hucMSC可在体外诱导分化为HLC,其机制可能与ERK1/2磷酸化相关。     

IL-6在胃癌细胞株HGC-27上皮间质转化中的作用

摘要：目的：探讨白细胞介素-6(IL-6)对人胃癌细胞株HGC-27上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition, EMT)的影响。 方法：体外用IL-6刺激培养HGC 27细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;实时荧光定量RT-PCR及western blot检测EMT相关标志分子E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达情况;Transwell迁移实验和平板克隆形成实验分别检测IL-6处理前后HGC-27细胞迁移和克隆形成能力的变化。 结果：IL-6能诱导HGC-27细胞向间质细胞样形态转化,多数细胞表现为类似成纤维状,部分细胞呈明显的梭形;实时荧光定量RT-PCR结果表明,IL-6作用于HGC-27细胞后E-cadherin表达量明显降低(P<0.01),而N-cadherin和Vimentin表达则显著增强(P均<0.05)。western blot结果表明,IL-6作用HGC-27细胞后E-cadherin蛋白表达量降低(P<0.05),而N-cadherin和Vimentin蛋白表达量均增加(P均<0.05);Transwell实验及平板克隆形成实验结果显示,IL-6作用后HGC-27细胞的克隆形成能力及迁移能力均增强(P均<0.01)。 结论：IL-6可诱导胃癌细胞发生EMT和进一步恶化的潜能。     

血浆肺特异性X基因mRNA检测对诊断肺癌的意义

摘要：目的：探讨肺特异性X基因（lung-specific X gene,LUNX）mRNA检测在肺癌辅助诊断中的意义。 方法：荧光定量PCR法检测肺癌患者、肺良性疾病患者、肺外肿瘤特异性对照患者及体检健康者血浆LUNX mRNA,评估循环LUNX mRNA对肺癌的诊断意义。 结果：肺癌患者血浆LUNX mRNA相对含量（0.287±0.106）显著高于健康组（0.045±0.018）（q=30.34, P<0.01）、肺良性疾病组（0.064±0.041）（q=24.33,P<0.01）和特异性对照组（0.032±0.024）（q=30.44,P<0.01）。肺癌组血浆LUNX mRNA相对含量在不同性别、年龄段及病理类型的患者中无显著性差异（P>0.05）,Ⅲ~Ⅳ期患者该基因含量（0.334±0.096）显著高于Ⅰ期（0.253±0.081）（q=4.09,P<0.05）和Ⅱ期（0.271±0.083）（q=3.49,P<0.05）患者。 结论：血浆LUNX mRNA检测对肺癌有特异的辅助诊断价值。