毒素蛋白PE40的基因克隆及序列分析

细胞因子－受体介导的靶向杀伤作为导向治疗白血病与肿瘤的第二代新策略,是现代分子导向药物研究的最新领域之一。它是利用细胞因子与其受体的特异性结合来导向传递重组细胞因子－细菌外毒素融合蛋白以达到特异性杀伤高表达相应细胞因子受体的白血病及肿瘤细胞〔１～３〕...     

白细胞介素6受体的β亚单位基因和蛋白人白血病细胞中的表达

胞因子-受体系统介导的靶向杀伤作为新一代导向治疗策略的创立已经引起临床血液学及肿瘤治疗学研究者的极大关注[1].我们先前的动物实验结果业已证明,重组白细胞介素6(IL-6)-PE40外毒素融合蛋白能高度特异性地杀伤高表达人IL-6受体(IL-6R)的BNML大鼠急性早幼粒细胞白血病细胞,明显延长白血病大鼠的生存期,而对正常造血细胞无不良反应[2,3].新近我们的研究结果则显示,粒、单、红白血病细胞不但高表达IL-6Rα亚单位的基因和蛋白,而且还高表达高亲和力IL-6R.鉴于IL-6R的β亚单位在高亲和力IL-6R形成中所发挥的关键性作用[4,5],因此从理论上讲,白血病细胞表面高亲和力IL-6R的多寡与重组IL-6-PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病的生物学效应密切相关[6].所以,全面系统地阐明人类白血病细胞是否表达IL-6R的β亚单位基因和蛋白具有十分重要的临床指导意义.我们首次采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术并结合流式细胞术(FACS)对IL-6R的β亚单位mRNA和蛋白在8种极具代表性的人类白血病细胞系U937、HL-60、KG1、TF1、K562、HuT 28、CEM及Raji中的表达进行了深入的探索.     

人正常骨髓CD34~ 造血细胞体外扩增形成粒单系造血祖细胞的能力

CD34 造血细胞以其独特的生物学功能正成为造血调控、造血于细胞移植和基因治疗最理想的靶细胞。本文探讨人正常骨髓CD34 造血细胞在体外扩增形成单个核细胞（MNC）及粒单系集落形成单位（CFU－GM）的能力，采用CIMS－100新型免疫磁性无菌分离术可获得纯度＞90％的CD34 造血细胞，其直接形成CFLJ－GM的能力要较骨髓MNC提高的倍，并且在含EGIIS组合造血生长因子的无基质液培养系统中，CD34 造血细胞在四周内可持续扩增产生大量MNC及CFU－GM，最高分别可达1770倍和48倍，但不同个体问CD34 造血细胞的这种能力差别较大。上述结果提示，CD34 造血细胞在最佳组合HGFs的无基质液培养条件下，能扩增产生大量成熟及晚期造血祖细胞，可以适用于临床治疗的需求，     

我国部分少数民族HLA抗原分布调查

HLA系统以高度等位基因多态性为特征。在70年代初就说明它在人类研究中是一个特异性的遗传标记。国外对不同人种和民族的HLA分布调查作了大量工作。研究表明HLA抗原频率、单倍型频率以及它们的连锁不平衡等在不同民族、不同地区、不同人群间具有显著性差异。我国由五十多个民族组成,各民族的发源、迁徙和融合的过程是非常复杂的。因此进行不同民族的HLA调查,比较民族之间HLA频率分布上的差异,对探讨民族之间遗     

HLA与十二指肠溃疡病相关的研究

本文报告了31例十二指肠溃疡病与HLA-A、-B抗原相关研究。与50例北方汉族正常人对照,未能发现与十二指肠溃疡病有关的HLA抗原,但HLA-A30/31可能为十二指肠溃疡病的保护性抗原。     

人正常骨髓CD34~ 造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力

根据阳性选择策略，采用ＣＩＭＳ－１００免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞，然后将其在含Ｅｐｏ＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＳＣＦ（简ＥＧＩＳ）组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增４周，定期进行单个核细胞计数、ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｍｉｘ的培养。经ＦＡＣＳ鉴定所富集的ＣＤ３４＋造血细胞纯度平均＞９０％。人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞，最高可扩增１７７０倍。与ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ相反，ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ扩增量较低，最高仅为２．３６和２．４倍，且仅在第１周出现，随后迅速减少至停止。     

HLA-A*110104新等位基因的克隆与序列分析

目的识别并确认中国人群HLA新等位基因。方法采用基因克隆、测序及生物信息学技术,分析HLA新等位基因与HLA已知基因序列的差异。建立HLA新等位基因序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)分型方法,并对1200名HLA-A*11阳性的造血干细胞移植无关供者(包含100名HLA-A*11纯合子个体)进行HLA新等位基因筛选和频率分析。结果HLA新基因与A*110101的差异只是在外显子3区域中279位碱基发生C→T突变,导致93位密码子由CAC变为CAT,但氨基酸未发生变化,并最终被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-A*110104。该新基因出现在2个无关家系中,分别具有2～3代遗传史。在1200名无关供者中未发现其他带有新基因的个体。其基因频率为0．000 83。结论HLA-A*110104新基因具有稳定的遗传性和一定的普遍性,对无关供者的选择和人类学、遗传学等的研究具有一定意义。