支气管哮喘气道高反应性的遗传性及其相关基因的研究进展

支气管哮喘(下称哮喘)是一种以气道高反应性(Bronchi-airway Hyperreactivity,以下简称BHR)和慢性气道炎症为主要特征的变态反应性疾病,病因较为复杂,至今仍未阐明,其患病率和死亡率在很多国家都呈上升趋势,已成为严重的公共卫生问题而引起世界各国的极大关注[1].目前对哮喘的研究已进入分子研究阶段水平,在已证实哮喘是一种具有明显家族聚集性倾向的多基因遗传病基础上,确定哮喘易感性的相关基因成了目前国内外病因学研究热点之一.通过连锁分析,同胞配对分析等已筛选出一些与哮喘有关的特应性基因及其染色体侯选区域[2～4],现就目前BHR的遗传性及相关基因的研究方法和研究进展综述如下.     

P16基因甲基化和GSTM1基因多态性与非小细胞肺癌易感性研究

[目的]研究P16基因甲基化、谷胱甘肽硫转移酶M1基因（GSTM1）多态性和环境暴露与非小细胞肺癌（NSCLC）的关系。[方法]采用病例对照研究方法选择47例NSCLC患者和94例对照，用甲基化特异性PCR（MSP）检测P16基因甲基化，GSTM1基因多态性用限制性片断长度多态性PCR（PCR-RFLP）测定。[结果]肺癌组接触粉尘、毒物频率高于对照组（P〈0．01），食用蔬菜水果、饮用消毒水频率肺癌组低于对照组（P〈0．01）；肺癌组织甲基化率44．7％，高于癌旁组织的17％（P〈0．01），甲基化和吸烟高度相关（P〈0．01）；GSTM1多态性分布无统计学意义（P〉0．05），粉尘接触、吸烟和GSTM1缺陷型有协同作用，P16甲基化和GSTM1多态性关系不明显。[结论]接触粉尘、毒物明显增加NSCLC危险性，食用蔬菜水果和消毒水降低NSCLC危险性；吸烟致P16基因甲基化参与NSCLC的形成。粉尘、吸烟可能增加GSTM1缺失型患NSCLC危险性，未发现P16甲基化和GSTM1多态性有交互作用。     

呼吸道症状和气道反应与肺功能关系的分析

目的探讨呼吸道症状与气道反应之间的关系,以及不同呼吸道症状的肺功能变化.方法收集了269个哮喘核心家系的资料,并对其6～16周岁的子女资料进行分析.结果气道高反应是呼吸道症状发生的危险因素,气道反应高的人呼吸道症状咳嗽、咳痰、喘鸣发生率亦高,两种或多种呼吸道症状出现的危险性更大,尤其是女性患者;具有呼吸道症状的患者肺功能均发生了不同程度的改变,其中男性较为严重,肺功能指标FEV1, FEV1/FVC,FEF 25%～75%、PEF均显著减少,除女性喘鸣患者的FEV1,FEV1/FVC,FEF 25%～75%、PEF均显著减少外,其他症状的肺功能指标均无明显变化.结论呼吸道症状的发生伴随着肺功能的改变.     

非小细胞肺癌患者血浆DAPK基因甲基化检测及其临床意义

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆中死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因异常甲基化及其在NSCLC筛查和诊断方面的临床意义。方法用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nMSP)检测112例NSCLC患者癌组织、癌旁组织、外周血血浆和112例正常对照组血浆样品中DAPK基因的甲基化情况,并比较各组检测结果。结果癌组织DAPK基因甲基化率为59.8%,高于癌旁组织的8.0%(P<0.001),其中鳞癌、腺癌、腺鳞癌癌组织和癌旁组织间的甲基化检出率比较差异均有统计学意义(P<0.001);NSCLC患者血浆中DAPK基因甲基化检测率为21.4%,对照组血浆未检测到DAPK基因甲基化(P<0.001)。血浆中DAPK基因甲基化检出率与NSCLC临床分类、临床分期和病理类型无明显相关性。结论利用nMSP法对血浆样本DAPK基因甲基化检测可为非小细胞肺癌的筛查和诊断提供有价值的信息。     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对肺癌SPC-A-1细胞p16、MGMT基因甲基化及其表达的影响

目的观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对体外培养的肺癌SPC-A-1细胞p16、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响,探讨肺癌细胞p16、MGMT基因失活的机制及去甲基化制剂对p16、MGMT基因表达的调控。方法 5-Aza-CdR处理体外培养的肺癌SPC-A-1细胞,甲基化特异性PCR（MSP）法检测用药前后细胞p16、MGMT基因的甲基化状态,RT-PCR法检测用药前后细胞p16、MGMT mRNA。结果加入5-Aza-CdR前,SPC-A-1细胞p16、MGMTmRNA表达缺失,其启动子区域表现为DNA甲基化。加入5-Aza-CdR后,SPC-A-1细胞中p16、MGMT基因呈现DNA去甲基化,而且表达缺失的p16、MGMT mRNA重新表达。结论启动子区高甲基化是肺癌细胞p16、MGMT基因失活的主要原因之一,去甲基化制剂5-Aza-CdR能逆转p16、MGMT基因甲基化状态,从而调控p16、MGMT基因表达。     

非小细胞肺癌RARβ基因启动子CpG岛甲基化与P53基因突变的关系

目的 研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)维甲酸受体β(retinoid acid receptorβ,RAR)基因甲基化与P53基因突变的关系.方法 应用甲基化特异性PCR以及PCR产物直接测序法分别检测198例原发性NSCLC组织中RARβ启动子CpG岛甲基化以及P53基因第5～9外显子的突变情况.结果 RARβ甲基化和P53突变检出率分别为58.1％和36.4％.在吸烟及男性患者中二者检出率分别高于非吸烟及女性患者;TNMⅠ期以上患者RARβ甲基化率高于Ⅰ期患者;鳞癌和腺鳞癌中P53突变率均高于腺癌(P＜0.05).RARβ甲基化的癌组织,其P53 G:C＞T:A型突变、颠换及错义突变率均高于RARβ非甲基化的癌组织(P＜0.05).P53 G:C＞T:A型而不是其他类型突变的癌组织,其RARβ甲基化率高于P53未突变的癌组织(P＜0.05);在调整性别、年龄后该差异在整组肺癌患者(OR=3.737,95％CI:1.414～9.873)、吸烟者(OR=4.020,95％CI:1.263～12.800)、鳞癌患者(OR=5.480,95％CI:1.400～21.446)、TNM Ⅰ期以上患者(OR=3.446,95％CI:1.054～11.267)中均有统计学意义(P＜0.05).结论 非小细胞肺癌RARβ甲基化与P53 G:C＞T:A型突变有关.