小儿颅内肿瘤P-糖蛋白表达的定位检测及临床意义

目的 为了探讨小儿颅内肿瘤化疗失败的原因,本实验对２０例小儿颅内肿瘤Ｐ－糖蛋白的表达情况进行研究。方法 用单克隆抗体ＪＳＢ１及免疫组化法检测Ｐ－糖蛋白。结果 小儿颅内肿瘤Ｐ－糖蛋白表达很低,２０例中８例表达于血管内皮细胞,７例表达于纤维细胞,５例表达于浸润的淋巴细胞,肿瘤细胞只１例表达。结论 ８小儿颅内肿瘤化疗失败的原因是患儿血脑屏障Ｐ－糖蛋白表达,表现为对抗癌药物较强耐受而非肿瘤细胞表达Ｐ－糖蛋     

肝母细胞瘤患儿及其母亲孕期特点回顾性分析

目的 探讨肝母细胞瘤发生的危险因素,包括婴儿出生以及孕产妇分娩相关的特征.方法 采用病例-对照研究设计,收集肝母细胞瘤患儿及其母亲的病历资料,用Logistic回归模型对婴儿特征指标、母亲怀孕与分娩有关指标进行多因素统计检验. 结果发生肝母细胞瘤风险中低出生体质量儿的比值比为26.0(95%可信区间为14.0～65.7).母亲≤20岁和≥30岁的比值比分别为1.5(95%可信区间为0.6～4.6)和2.6(95%可信区间为1.0～6.7).超重和肥胖母亲的比值比为3.2(95%可信区间为1.0～6.7).孕妇吸烟的比值比为2.9(95%可信区间为1.1～4.2),对>2岁及H{生体质量正常儿童影响较大. 结论肝母细胞瘤的发生与患儿出生体质量及孕妇超重、吸烟等因素有关,应重视围产期卫生保健.     

496例婴幼儿阑尾炎临床分析

目的总结3岁以下婴幼儿阑尾炎的临床表现及实验室检查等结果,以提高婴幼儿阑尾炎早期诊断率,降低病死率,减少并发症。方法完整统计该院1984年1月至2009年10月收治的8 622例小儿阑尾炎的临床资料,并将其中496例婴幼儿阑尾炎的症状、体征、实验室检查以及手术结果进行回顾性分析。结果婴幼儿阑尾炎全组无死亡病例,穿孔率为43%,并发腹膜炎患儿占45.8%,手术460例,病理结果以化脓及坏疽性阑尾炎为主。结论婴幼儿阑尾炎的症状、体征不典型,病情进展快,穿孔率高,易出现各种并发症,早期准确诊断和及时有效治疗是提高治愈率和减少术后并发症的关键。     

5种经典耐药基因在儿童常见恶性肿瘤的表达及临床意义

目的通过检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)5种耐药基因表达蛋白在儿童常见恶性肿瘤组织中的表达,探讨儿童恶性肿瘤耐药的机制,为临床选择敏感的个体化化疗方案提供实验室证据。方法选择40例儿童常见恶性肿瘤的病理切片标本,采用免疫组化的方法检测5种耐药蛋白(P-gp、MRP1、LRP、GST-π、Topo-Ⅱ)的表达,分析常见儿童恶性肿瘤耐药蛋白的表达及差异,分析儿童常见恶性肿瘤多药耐药的机制。结果(1)P-gp在卵黄囊瘤所有结构中都呈高阳性率、高强度的表达,说明P-gp过度表达是造成卵黄囊瘤耐药的主要机制。MRP1所介导的药物耐药性可能为卵黄囊瘤耐药的补充机制。LRP、GST-π在卵黄囊瘤多药耐药机制中可能起着协同作用。(2)横纹肌肉瘤中P-gp、GST-π的表达较其他耐药蛋白高。(3)神经母细胞瘤中P-gp、MRP1、Topo-Ⅱ的表达较高。(4)肾母细胞瘤中LRP、Topo-Ⅱ的表达较其他几种耐药蛋白低。(5)恶性淋巴瘤中5种耐药蛋白的表达均低。结论不同的肿瘤类型具有不同的耐药基因表达特点,其肿瘤...     

骨髓间充质干细胞的生物学特性及其临床治疗应用*☆

学术背景：骨髓间充质干细胞是来源于骨髓基质的一类具有自我更新能力、可分化为中胚层细胞系的干细胞。可分化为组成组织功能细胞的内在能力，使它们成为细胞和基因治疗的潜在来源。 目的：综述骨髓间充质干细胞的生物学特性和治疗应用的研究进展。 检索策略：应用计算机检索Pubmed1999-01/2006-12期间相关文章，检索词为“Bone marrow mesenchymal stem cells, gene therapy, transplant”，并限定文章语言种类为English。同时机检索万方数据库1999-01/2006-12期间相关文章，检索词为“骨髓间充质干细胞，基因治疗，移植”。对资料进行初审，并查看每篇文献后的引文。纳入标准：文章所述内容应与骨髓间充质干细胞生物学特性、治疗中应用相关进展研究。排除标准：重复研究或Meta分析类文章。共收集到95篇相关文献，78篇文献符合纳入标准，排除的45篇为内容陈旧或重复文献。 文献评价：文献的来源主要是骨髓间充质干细胞的各种生物学特性、细胞移植、基因治疗等基础和临床相关研究。选用符合纳入标准78篇文献中的33篇，4篇关于骨髓间充质干细胞分离，3篇关于骨髓间充质干细胞的表面标志，6篇关于骨髓间充质干细胞生物学特性，3篇关于骨髓间充质干细胞移植与宿主间的免疫反应，17篇关于骨髓间充质干细胞在疾病治疗中的运用。 资料综合：骨髓间充质干细胞在合适条件下可分化为骨、软骨、脂肪、肌肉、肌腱、神经样细胞、心肌细胞、支持造血干细胞的基质细胞等多种细胞。研究表明，由于骨髓间充质干细胞具有免疫抑制性和非常低的免疫原性，骨髓间充质干细胞被用于实验和临床的治疗研究中，主要包括4个方面的应用：局部移植；系统移植；结合干细胞的基因治疗；组织工程领域中的应用。尽管目前的研究大部分在动物实验中，但部分临床运用已取得了成功，这些有效的结果尚需临床足够的随机患者的研究。 结论：对骨髓间充质干细胞生物学特性已有了一定的认识，这对其运用于临床治疗提供了坚实基础，随着对其特性的不断揭示，骨髓间充质干细胞在临床治疗应用中有着理想前景。     

儿童实体恶性肿瘤抗癌药物敏感试验

本文采用ＭＴＴ法对１０例淋巴肉瘤、神经母细胞瘤、肾母细胞瘤等实体恶性肿瘤患儿作抗癌药物敏感试验。结果显示ＶＰ－１６、丝裂霉素及顺铂等抗癌药物对儿童实体恶性肿瘤较为敏感。本文讨论了影响试验结果的三个主要因素：肿瘤细胞浓度，培养时间及药物浓度。笔者认为ＭＴＴ法是一种简便易行重复性好的试验方法，抗癌药物敏感试验应逐渐成为化疗药物选择的重要依据。     

腹腔镜在小儿外科的临床应用及进展

小儿腹腔镜技术要求高，风险大，起步较晚。近10年随着腹腔镜器械的不断创新和手术技术的成熟开始取得迅猛发展。小儿腹腔镜主要应用于小儿消化系统和泌尿生殖系统的外科疾病，不仅在临床诊断上有着独特的优势。在临床治疗上也有着无可替代的微创优势。大多数小儿剖腹手术都能安全应用腹腔镜技术完成，包括阑尾切除、腹股沟斜疝修补术、脾脏切除、胃底折叠术、巨结肠根治术、肾切除、肾盂成形术、肿瘤切除等。很多术式都已成熟并逐渐取代传统的开腹手术，一些新的术式也不断的被创新、探索和发展。机器人腹腔镜系统的出现将为小儿腹腔镜外科带来一次质的飞跃。腹腔镜在小儿外科具有广阔的应用前景和活力。     

儿童肝母细胞瘤诊治进展

肝母细胞瘤(hepatocastoma,HB)是儿童最常见的肝脏恶性肿瘤,约占15岁以下儿童恶性肿瘤的1%和肝脏原发恶性肿瘤的79%.HB总的发病率是0.5～1.5/1 000 000,但在18个月以内的婴幼儿中被确诊者发病率是11.2/1 000 000.男孩多见,男女比例为1.2～3.6∶1[1].HB在临床上较少见,起病隐匿,多无症状,常给诊断和治疗带来一定难度.本文就最近HB的诊断治疗进展有关文献作一综述,为临床HB的诊治提供有益的参考.     

热休克蛋白70在人胶质瘤耐药过程中的作用

目的 应用热休克人胶质瘤细胞的方法,观察热休克蛋白70(HSP 70)在人胶质瘤细胞耐药过程中的作用.方法 经43 ℃热处理2 h的人胶质瘤细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化技术检测HSP 70 mRNA及蛋白的表达情况;应用hoechst 33258荧光染色的方法观察化疗药物阿霉素(adriamycin,ADM)作用后,不同处理组人胶质瘤细胞的凋亡情况.结果 HSP 70免疫组化,HS ADM组阳性率为(61.5±18.3)%,与HS组(61.0±14.1)%比较没有统计学意义,但显著高于对照组(8.50±4.09)%(P＜0.05),RT-PCR结果与免疫组织化学一致;ADM组凋亡细胞比率为(52.7±19.1)%,显著高于对照组(6.5±3.6)%(P＜0.05),HS ADM组(25.0±10.7)%高于对照组但显著低于ADM组(P＜0.05),HS组(7.2±3.6)%与对照组没有明显差异(P＞0.05).结论 热休克的方法可以诱导人胶质瘤细胞HSP 70的表达;HSP 70可能是引起人胶质瘤细胞耐受ADM的机制之一.     

纳米载体介导人胰岛素样生长因子1基因转染兔骨髓间充质干细胞及其表达

目的：构建增强型绿色荧光蛋白基因（enhanced-green fluorescent protein，EGFP）标记的人胰岛素样生长因子（human insulin-like growth factor，hIGF-1）真核表达载体，转染至兔骨髓间充质干细胞，为组织工程关节软骨的构建提供基因改良的种子细胞。方法：实验于2005—03／2006—01在重庆医科大学儿科研究所完成。根据GeneBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物，从质粒pcDNA3．1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1，亚克隆至pMD-T18载体，测序鉴定后酶切出目的基因片段并插入pIRES2-EGFP中，构建成真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1，经PCR及双酶切鉴定正确后用非病毒类纳米材料基因转移载体PAMAM-D介导转入兔骨髓间充质干细胞，通过荧光观察、流式细胞仪、RT-PCR等方法从各个水平检测hIGF-1在细胞的表达。结果：成功构建了增强型绿色荧光蛋白基因标记的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1，并检测到目的基因hIGF-1在兔骨髓间充质干细胞的理想表达。结论：新型纳米材料PAMAM-D是高效、简便、表达持久的基因转染方法，经IGF-1基因修饰的骨髓间充质干细胞是软骨组织工程种子细胞的理想选择。