大鼠agrin基因实时定量聚合酶链反应的检测方法

目的：agrin基因对神经肌肉接l头的形成、维持起着决定作用，也对神经元轴突的形成、延长、维持有重要作用．其表达产物在机体内分布广泛。设计绝对定量嵌合荧光法检测大鼠agrin基因mRNA的实时定量聚合酶链反应方法，并检测其特异性、敏感性和可重复性。 方法：实验于2007—04／11在吉林大学基础医学院三综合实验室和吉林大学第一医院传染科实验室完成。以Primer 3软件设计大鼠agrin基因、ACTB基因mRNA嵌合荧光实时定量聚合酶链反应检测引物，经检索Blast验证特异性，并以Primer5设计构建agrin基因标准品引物。选择清洁级Wistar大鼠交配，获取3日龄乳鼠，取脑，获取mRNA、cDNA，常规反转录一聚合酶链反应获取agrin554个碱基DNA片断。PCR填加T7启动子后，T7 RNA Polymerase合成agrin基因标准品，消化模板。分光光度计测定其浓度，1：5倍比稀释3次；经反转录反应合成agrin基因cDNA标准品，测序验证特异性。以ACTB引物反转录cDNA，1：5倍稀释3次，构建ACTB基因标准品。常规聚合酶链反应确定、优化反应条件。标准曲线确定实时定量聚合酶链反应标准曲线的相关性，融解曲线验证检测方法的特异性，作重复性检测。 结果：①agrin基因有意义链引物序列：GAA GGC CAG GTG CGA ATC A，反义链引物序列：CAC AGG TAG CAG TGG AGC CAA G，内标：ACTB基因有意义链引物序列：GGA GAT TAC TGC CCT GGC TCC TA，反义链引物序列：GAC TCA TCG TAC TCC TGC TTG CTG，优化反应条件：95℃变性5S，60℃退火20S，72℃延伸20s。②agrin基因、ACTB基因标准品所获得的标准曲线确定实时定量聚合酶链反应标准曲线的相关性均〉0．95。③聚合酶链反应产物电泳、测序、实时定量聚合酶链反应融解曲线证明特异性高、重复性好、灵敏度达到精确定量要求。 结论：绝对定量嵌合荧光法检测大鼠agrin基因mRNA的实时定量聚合酶链反应方法可以作为大鼠agrin基因mRNA检测的标准方法。     

俯卧位颅后凹手术的麻醉体会

目的了解颅后凹手术的麻醉方法及处理。方法通过156例颅后凹手术麻醉,术中保留自主呼吸观察生命体征变化。术中呼吸心率变化75例。结果108例术毕清醒拔管,48例带管回ICU,5例术后3~15d死亡。结论颅后凹手术麻醉风险较大,做好术前准备,术中严密观察病情变化,及时处理,手术麻醉较安全。     

黛力新联合乌灵胶囊治疗脑卒中后抑郁的Meta分析*

目的系统评价黛力新联合乌灵胶囊治疗卒中后抑郁的安全性和有效性。方法检索PubMed，CNKI，VIP和Wan Fang Data。搜集黛力新联合乌灵胶囊治疗治疗卒中后抑郁的随机对照试验（截止时间为2017年9月）。根据统一的排除及纳入标 准，2名研究员独立挑选文献、提取研讨资料、评价文献品质分析采用RevMan5.3软件。结果纳入16篇RCTs，涉及1299例卒 中后抑郁患者（试验组653例，对照组646例）。Meta分析结果：试验组治疗卒中后抑郁的总有效率比黛力新组高 15%（P<0.05）；1周治疗后2组汉密顿抑郁量表（HAMD）评分无差异（P>0.05），2、4、6、8周后试验组对降低卒中后抑郁 患者的HAMD评分均优于对照组（P<0.05）；4、8、12周后试验组对提高卒中后抑郁Barthel指数（BI）均优于对照组 （P<0.05）；4、6、8周后美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分优于对照组（P<0.05）；试验组治疗卒中后抑郁的 不良反应发生率比黛力新组低34%（P<0.05）。结论黛力新联合乌灵胶囊改善卒中后抑郁患者的日常生活能力、神经功能、 抑郁症状优于对照组，且副作用更小。     

曲美他嗪联合呋塞米及硝酸甘油治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病急性心力衰竭的临床观察

冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)是指机体冠状动脉血管出现动脉粥样硬化病变而引发血管阻塞或狭窄,导致机体心肌血氧不足或坏死而引起的心脏病,常并发急性心力衰竭[1]。急性心力衰竭是指机体心力衰竭急性发作或加重的一种临床综合征,常见临床症状有体液潴留、呼吸困难、乏力等[2]。冠心病急性心力衰竭患者若未得到有效及时治疗,严重者甚至威胁其生命安全[3]。故本研究分析曲美他嗪联合呋塞米及硝酸甘油治疗冠心病急性心力衰竭的临床效果,现报告如下。     

子痫前期并可逆性后部白质脑病综合征分析

目的:探讨子痫前期并可逆性后部白质脑病综合征(reversible posterior leukoencephalopathy syndrome,RPLS)的临床表现、影像学特点,以便早诊断、早治疗,获得良好的预后。方法:回顾性分析57例病例报道及同仁医院发生的1例子痫前期并可逆性后部白质脑病综合征。结果:产前46例,产后9例,3例发生时间不详。58例均有高血压、蛋白尿伴头痛、视物不清、进而皮质盲。58例中30人行头颅CT检查,2l例未发现异常,7例表现为局灶性低密度改变,以双侧枕部多见,2例表现为病灶广泛、弥漫性水肿。19例行头颅MRI,5例未发现异常,12例提示后部脑白质血管源性水肿。积极治疗、及时终止妊娠视力完全恢复47例,2例视力未恢复,8例未报结局,1例入院后未及时终止妊娠19 h死于脑出血。结论:高血压、蛋白尿伴头痛、皮质盲是子痫前期伴RPLS常见的临床表现,其特点是可逆性大脑皮质性视觉障碍,MRI是诊断的首选方法;早期诊断,及时终止妊娠,合理治疗,预后良好。     

胰腺实性假乳头状瘤的多层螺旋CT表现

目的 总结胰腺实性假乳头状瘤（SPTP）的多层螺旋CT（MSCT）表现,提高对该疾病的认识。 方法 回顾性分析9例经手术病理证实的SPTP患者的临床资料与多层螺旋CT表现。 结果 肿块均呈圆形或卵圆形,位于胰头4例,胰体3例,胰颈、胰尾各1例。9例肿块均囊实相间,1例包膜弧线样钙化,2例实质内点状钙化,3例可见新鲜出血;双期增强扫描所有病灶实性部分动脉期明显强化,静脉期渐进性强化,但强化程度低于周围正常胰腺组织,囊性部分无强化,其中2例动脉期肿瘤内见不规则细小血管影,其中胰管扩张者2例。9例肿物病理切面均见出血、坏死及囊变,镜下见特征性假乳头状结构。 结论 胰腺实性假乳头状瘤的CT表现有一定的特点,能反映病理特征,是术前诊断该疾病的主要方法;多排螺旋CT的重建技术能帮助空间定位。     

COPD无创机械通气治疗现状及存在问题

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)由于其患病人数多,死亡率高,社会经济负担重,已成为一个重要的公共卫生问题.应用无创间歇正压通气(NIPPV)治疗COPD急性呼吸衰竭成功率较高,但在COPD无创机械通气治疗实际应用中仍存在比较多的问题,本文就这方面研究现状综述如下.     

左乙拉西坦治疗妊娠期癫痫的研究进展

左乙拉西坦(Levetiracetam,LEV)是一种新型的抗癫痫药物,相比于传统的抗癫痫药物,LEV具有良好的药代动力学特点,其血药浓度在妊娠期显著下降、在分娩后迅速升高;在妊娠期间具有较好的癫痫控制效果和较低的后代致畸率;不增加妊娠期并发症的发生率且可与胎盘转运蛋白特异性结合。目前,LEV用于妊娠期癫痫治疗并取得了良好的治疗效果。本研究从LEV在癫痫患者妊娠期间的药代动力学特征、在妊娠期的使用、不良反应以及对胎盘的影响几个方面进行了综述。     

电解可脱性弹簧圈血管内治疗基底动脉末端动脉瘤

1991年10月～1995年4月,使用电解可脱性铂弹簧圈经血管内治疗33例基底动脉末端动脉瘤病人,女26例,男7例,年龄37岁～74岁(平均52.5岁)。其中12例外科手术夹闭失败,15例预计外科手术困难,5例条件差,1例拒绝手术。条件差的5例中包括3例近期蛛网膜下腔出血Hunt-Hess分级Ⅴ级病人。23例病人有出血,3例有占位效应,7例为偶然发现。有2例伴有枕叶动静脉畸形。23例出血病人中13例