可视吸痰系统的离体实验

目的探讨采用可视吸痰系统进行离体肺、气管内吸痰的可行性及有效性。方法在离体猪肺、气管的不同部位注入浓度为1.5%、3.0%的模拟痰液,吸痰的进入通道分别为咽喉插入吸痰、气管插管吸痰及气管切开吸痰,根据吸痰方式,将实验猪分为传统吸痰组(采用传统吸痰系统进行标准吸痰操作,n=40)及可视吸痰组(采用可视吸痰系统进行标准吸痰操作,n=40),吸痰时间为15s,设定吸痰负压为-200mm Hg。对两组的吸痰量进行比较。结果用1.5%浓度的模拟痰液进行试验,可视吸痰组采用咽喉插入吸痰、气管插管吸痰及气管切开吸痰的吸痰量分别为(6.91±0.49)、(7.27±0.71)及(6.59±0.88)g,传统吸痰组的吸痰量分别为(5.28±0.64)、(6.39±0.91)及(5.98±1.38)g;用3.0%模拟痰液进行试验,可视吸痰组采用咽喉插入吸痰、气管插管吸痰及气管切开吸痰的吸痰量分别为(6.37±1.15)、(7.98±0.97)及(7.35±1.79)g,传统吸痰组的吸痰量分别为(5.64±1.29)、(6.19±1.05)及(6.90±1.25)g;可视吸痰组与传统吸痰组的吸痰量比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论可视吸痰系统的吸痰效率比传统吸痰系统高,且更易操作,具有临床可行性。     

分离地龙DNA裂解蛋白过程中组织破碎法、pH及温度的选择

目的观察分离过程中三种处理方法制备的地龙组织匀浆及pH、温度对地龙DNA裂解蛋白（EWDNase）的影响。方法采用糖溶解法、机械法和超声破碎法制备地龙组织匀浆;不同温度、pH条件下进行EWDNase的粗提取。测定地龙组织匀浆及不同温度、pH条件下制备的粗提取液中EWDNase活性和蛋白含量,计算其比活性。结果三种方法获得地龙组织匀浆中EWDNase比活性大小无显著性差异（P〉0．05）;EWDNase耐热（75℃,30min仍有活性）,pH3．4—5．4具有较高比活性。结论机械法因其操作简便、经济实用、误差小、重复性高可以用来处理地龙组织制备组织匀浆。提取EWDNase过程中宜采用酸性缓冲体系和较高温度（65—75℃）的热变性条件。     

蜕皮甾酮对大鼠非酒精性脂肪性肝病核因子κB与PPAR-γmRNA表达的影响

目的 研究蜕皮甾酮对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型核因子κB与PPAR-γ mRNA表达的影响,并探索其可能的作用机制.方法 采用改良高脂膳食喂养法,建立大鼠非酒精性脂肪性肝病模型.健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、蜕皮甾酮处理组与吡格列酮处理组,每组12只.模型组应用改良高脂饲料喂养,蜕皮甾酮组与吡格列酮组在高脂饲料喂养同时应用药物灌胃,正常对照组应用基础饲料喂养.实验16周末,处死所有大鼠,观察检测肝脏指数、血清与肝组织生化指标及肝组织病理改变;免疫细胞化学法检测各组大鼠肝组织中核因子κB蛋白表达情况;实时荧光定量PCR技术检测PPAR-γmRNA 水平变化.结果 蜕皮甾酮组和吡格列酮组血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)明显低于模型组(P<0.05);蜕皮甾酮和吡格列酮组与模型组相比,肝组织丙二醛(MDA)水平降低明显,超氧化物歧化酶(SOD)活力增加显著;蜕皮甾酮肝脏指数显著降低;肝组织脂肪变性程度和炎症活动度明显减轻(P<0.05).蜕皮甾酮和吡格列酮组与模型组相比核因子κB水平明显降低(P<0.01),PPAR-γ mRNA显著增加(P<0.05).结论 蜕皮甾酮具有改善高脂饮食诱发的非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏酶学,通过增加肝组织SOD的含量和减少MDA的含量来减轻肝组织氧化应激水平,增加肝组织PPAR-γmRNA和减少核因子κB改善胰岛素抵抗,减轻肝脏炎症,发挥防治非酒精性脂肪性肝病的作用.     

重视咽异感症的诊治

咽异感症，全称咽部感觉异常，足耳鼻咽喉科常见的病症。本症主指患者咽部有异物、阻塞或刺激等感觉症状的一种病症。由于主诉症状明显，往往又查无器质性病变，有时易被忽略。本症严重者，其痛苦表现及造成的后果不亚于某些器质性病变，且其症状义是多种相关疾病的表症。故应引起广大耳鼻咽喉科医师的重视。     

肝门部胆管癌的磁共振诊断和评价

肝门部胆管癌起源于肝内胆管，发生左右肝管汇合区，在肝脏恶性肿瘤中位居第二，在胆管肿瘤中位居第一，占胆管癌的58％-75％。由于肿瘤生长缓慢和隐蔽，早期影像学诊断困难；但由于肝门区有许多重要的血管，手术时多数癌肿已侵犯周围组织，手术切除难度大，预后很差。笔者搜集术前行MR检查、经手术和病理证实的肝门部胆管癌28例，旨在探讨MR在肝门部胆管癌中的诊断价值。     

采用CRISPR/Cas9技术构建新品系HBeAg转基因小鼠

目的培育一种HBeAg转基因小鼠新品系。方法克隆乙型肝炎病毒HBeAg基因;采用CRISPR/Cas9技术,通过同源重 组的方式分别在Rosa26基因位点定点插入pliver-HBeAg表达框,获得含有HBeAg基因的表达载体pliver-HBeAg,经酶切得到 含有HBeAg基因的线性DNA 片段,将Cas9 mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,再将其移植 入C57BL/6J雌性代孕小鼠子宫,获得F0代建系小鼠;采用长片段PCR对出生小鼠进行鉴定,共获得HBeAg基因正确同源重组 的F0代建系小鼠;F0代阳性小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配,繁育获得F1代小鼠,经PCR鉴定及测序确认阳性F1代小鼠;将 携带HBeAg基因的F1代转基因小鼠再次回交,对子代小鼠进行PCR基因型鉴定,直至获得纯合子子代转基因小鼠;采用全自 动化学发光免疫分析仪、胶体金法和免疫组织化学方法分别检测HBeAg转基因鼠血浆和肝组织中HBeAg和HBeAb的表达。 结果采用CRISPR/Cas9技术共获得56只F0代小鼠,其中2只为正确同源重组的F0代小鼠;F1代小鼠中6只阳性F1代小鼠。 截至目前,共获得22只F2代纯合子和29只杂合子HBeAg转基因小鼠。所有HBeAg转基因小鼠外周血中均可检出高浓度的 HBeAg蛋白,但未检出HBeAb的表达。而且免疫组化结果显示HBeAg转基因小鼠肝脏肝细胞中可特异性表达HBeAg蛋白。 结论采用CRISPR/Cas9技术成功构建了能在肝脏肝细胞中稳定表达HBeAg蛋白且对HBeAg免疫耐受的新品系HBeAg转基 因小鼠,为HBV的研究提供了新的实验动物模型。     

p16INK4a蛋白在人恶性肿瘤组织中的表达及临床意义#br# #br#

目的 探讨p16INK4a蛋白在多种人恶性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法 收集2014年至2015年手术切除的肿瘤标本642例。免疫组化染色检测并分析p16INK4在肿瘤组织中的表达。 结果642例肿瘤样本中良性肿瘤120例、恶性肿瘤522例。免疫组化检测p16INK4a在恶性肿瘤组织中表达阴性（-）、弱阳性（+）、中等阳性（++）和强阳性（+++）表达率分别为17.43％（91／522）、11.11％（58／522）、19.16％（100／522）和5230％（273／522）,而在良性病变中表达率分别为34.17％（41／120）、23.33％（28／120）、26.67％（32／120）和1583％（19／120）,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在不同组织来源的肿瘤中p16INK4a蛋白阳性表达率也并不相同（P＜0.05）。分别以阳性免疫组化染色“++”和“+++”作为p16INK4A阳性表达界值,则p16INK4A 蛋白作为恶性肿瘤分子标志的灵敏度、特异度和阳性预测值分别为71.46％、57.50％、87.97％和52.30％、84.17％和93.49％。结论 p16INK4A 代偿性高表达是人恶性肿瘤特异性的免疫表型,可作为恶性肿瘤诊断、鉴别诊断和分子分型的分子标志。     

PBL结合CBL教学法在儿科方向本科生实习教学中的应用研究

目的:探讨CBL结合PBL教学法在儿科方向本科生实习教学中的效果.方法:50名五年制临床医学实习生先后进行第一阶段的传统教学法教学以及第二阶段的PBL+CBL联合教学法教学,采用问卷调查评价两种教学方法的教学效果.结果:第二阶段教学后学生对PBL+CBL联合教学模式持满意态度的人数多于第一阶段教学后学生对LBL教学模式...     

巨大喉室含气囊肿2例

１病例摘要例１：女患，５４岁。主诉：左颈包块３年，肿痛增大５天。３年前无诱因左颈部出现约３ｃｍ×３ｃｍ×３ｃｍ无痛性肿块，轻度声嘶。在感冒咳嗽时有增大，未曾治疗。于５天前突感疼痛，并且明显增至手拳大小，声嘶加重，活动后呼吸困难，进食水正常。静滴头孢拉...