聚合酶链反应荧光偏振技术在乙型肝炎病毒DNA检测中的应用及价值

目的　探讨聚合酶链反应荧光偏振技术 (PCR FP)检测乙型肝炎病毒 (HBV)DNA的临床应用价值。方法　将PCR扩增得到的HBVDNA特定片段 ,与荧光素标记探针和PCR产物中的一条DNA链杂交 ,形成特异杂交体 ,用荧光偏振光检测仪检测特异杂交体 ,最终判断HBVDNA是否存在。并对对 10 2份乙型肝炎患者和 30份非乙型肝炎患者血清进行检测结果比较。结果　PCR FP检测HBVDNA的最低检测限为 1× 10 1拷贝 ,在 4 0份乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎e抗体 (HBeAg)和抗乙型肝炎核心抗原 (抗HBc)均阳性患者血清标本中检出HBVDNA阳性率为 10 0 % ;33份HBsAg、抗乙型肝炎e抗体 (抗Hbe)和抗HBc均阳性患者血清HBVDNA阳性率为 81 8% ;2 9份HBsAg和抗HBc阳性患者血清HBVDNA阳性率为 72 4 % ;14份乙型肝炎患者和 30份非乙型肝炎患者血清均为阴性。方法的灵敏性和特异性分别为 86 %和 10 0 %。结论　PCR FP操作简单、灵敏、特异 ,适用于临床HBV基因检测。     

两种不同型号全自动生化分析仪测定结果的比对及校正

目的通过对OlympusAU5400全自动生化分析仪和Vitros350干片式生化分析仪进行方法比对,探讨不同型号仪器间检测结果是否具有可比性。方法以OlympusAU5400作为参考仪器,Vitros350作为比对仪器,随机收集100例新鲜血清标本。分别在两台仪器上测定尿素（Urea）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（cK）三个项目,参照NCCLS的EP9一A文件分析两台仪器检测结果的可比性并对偏差进行校正。结果两种仪器检测Urea的结果一致,LDH和CK结果需进行比对校正。结论当同一项目在不同仪器上检测时,结果应进行比对扣校准,以保证检测测结果的一致性。     

精准医疗时代心血管药物个体化用药教学中PBL融合FC教学方法的探索

目的 探讨以问题为基础的学习（problem based learning,PBL）联合翻转课堂（flipped classroom,FC）教学方法在心血管疾病个体化用药教学中的应用。 方法 将学生随机分为试验组（PBL + FC教学法）和对照组（传统教学法）,通过考核和问卷调查方式评价两种教学方法联合在心血管疾病个体化用药教学中的应用效果。 结果 试验组的成绩高于传统教学组(P < 0.05)。与传统教学法相比,PBL + FC教学法能够增强学生学习兴趣,提高学生自主学习和分析解决问题能力。 结论 PBL + FC教学方法优于传统教学法。     

蛋白质芯片定量检测乙肝表面抗原系统的建立

目的：建立以蛋白质芯片检测乙肝表面抗原的方法,以期对乙肝患者血清中HBsAg进行定量检测,帮助动态分析病情和评估疗效。方法：用点样仪将一种抗-HBsAg单抗点到硝酸纤维素膜（NC膜）上制成芯片,HRP标记另一种抗-HBsAg单抗,以双抗夹心法捕获血清中HBsAg,建立HBsAg浓度与检测点灰度间关系的标准曲线并通过芯片阅读仪进行定量分析。结果：建立的蛋白质芯片检测系统能快速准确地对血清中HBsAg进行定性和定量检测,系统的定量检测范围是1-10000 ng/ml。结论：蛋白质芯片检测系统具有微型化和自动化的优点,与PCR HBV-DNA相比其操作更简便,所需时间更短,可以代替传统的ELISA方法,是更为科学的疗效评估方法。     

免疫金层析试验快速检测血清HBsAg

免疫金层析试验是20世纪90年代初在免疫渗滤技术[1]的基础上建立的一种快速简便的免疫检测技术.     

胶体金免疫层析试验快速检测HBsAg

0　引言　胶体金免疫层析试验是 2 0世纪 90年代初在免疫渗滤技术[1 ] 的基础上建立的一种快速简便的免疫检测技术 .我国有 40 %左右的人感染过乙型肝炎病毒 ,其中约有 1 0 %的人携带 HBs Ag,因而快速准确地检测和普查 HBs Ag,对于乙型肝炎的预防、诊断和治疗 ,具有极大的实用价值 .为此 ,我们研究建立了快速检测 HBs Ag的胶体金免疫层析试验 (GI-CA) ,取得了较为满意的结果 .1　材料和方法1 .1　材料　氯金酸购于上海试剂一厂 ;免疫层析的材料由吸水玻璃纤维、吸附胶体金的玻璃纤维纸、硝酸纤维素薄膜和塑料支持物四部分构成 ;抗 - H…     

A rapid and sensitive method to detect mycobacterium tuberculosis DNA by fluorescence polarization

Objective: To develop a new high sensitivity, rapid and simple mycobacterium tuberculosis DNA detection method using fluorescence polarization technology. Methods: In our asymmetric PCR protocol, 100 times mole of TB-R primer was added than in the usual symmetric PCR to get enough single strands PCR product. The probe TB-5‘-TAMRA and PCR products were mixed in a tube and incubate for 5 - 15 min at 46℃.The polarization (mp) was measured using victor2 Multilabel Plate Reader. Results: Asymmetric and symmetric PCR products were analyzed by the FP method. Asymmetric PCR products are detected more sensitively than symmetric ones. The polarization values of probe associated with asymmetric products were much higher than with symmetric products. Conclusion: This fluorescence polarization assay in conjunction with asymmetric PCR is a powerful and widely applicable method for the rapid and sensitive detection of micro-organisms in clinical laboratories.     

一步PCR快速扩增血清中HCVRNA

一步ＰＣＲ快速扩增血清中ＨＣＶＲＮＡ阎小君，肖乐义，李陕区，郭晏海，苏成芝，刘君，候瑜，陈远鑫（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应；丙型肝炎病毒；核糖核酸中图号Ｑ５２３．３反转录巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测丙型肝炎病毒（...     

运用自血光量子疗法治疗脑梗塞体会

自血光量子疗法(简称UBI),在八十年代后期国内已广泛应用于临床,是目前医学界认为的一种新型的治疗方法——清除疗法。我院自1992年7月～1994年底共用此法治疗脑梗塞病人64例。并将同期以病情、病程、年龄相仿的34例脑梗塞患者进行对照观察。现将结果报告如下。     

解脲支原体Ⅰ型MB抗原主蛋白氮端基因的克隆及原核表达

目的 从新鲜培养的解脲支原体（URA）I型培养液获得其MB抗原主蛋白N端1／3保守区的基因，并体外表达，获得具有抗原活性的原核表达蛋白，为研制广谱、低廉及方便准确的URA感染的诊断及治疗方法提供物质基础。方法 从新鲜培养的URA标准株I型培养液提取DNA模板，采用特异引物及聚合酶链方法获得其MB抗原主蛋白N端1／3保守区的基因，经克隆入测序载体验证DNA大小及序列后，将MB抗原主蛋白N端1／3保守区的基因克隆入高效原核表达载体，并在大肠杆菌中表达，初步以Western-blot测定表达产物的抗原性即与感染者阳性血清的反应活性。结果 以笔者设计的特异引物，能得到预期大小的PCR产物，并能插入预定的克隆载体中测序，所得基因的序列符合目的基因的序列，其插入原核表达载体能获得表达，且表达产物具有抗原活性，能与感染患者的血清发生抗原抗体反应。结论 所得到的MB抗原主蛋白N端1／3保守区片段的基因，与GENE BANK检索序列一致。在大肠杆菌中表达此片段所获得的表达产物，有抗原活性，有望用于URA抗体检测及疫苗研制。