从贵州白纹伊蚊体内分离到一株2型登革病毒

从贵州省独山县麻尾镇白纹伊蚊标本中分离到一株病毒 ,用抗DEN1 4型单克隆抗体经间接免疫荧光法和RT PCR产物酶切分型鉴定为DEN 2 ,并对其NS1和E基因RT PCR产物进行部分基因序列测定 ,与DEN 2NGC株比较 ,麻尾株的NS1基因区有 7个碱基发生点突变 ,E基因区有 1个碱基的插入 ,两个序列被GenBank收录 ,编号分别为AY2 774 0 2、AY2 782 2 6 ;麻尾分离株与其他 9株DEN 2型病毒进行系统发育关系的分析 ,结果显示与D2 - 4 3株系统进化关系最近 ;证明贵州省存在DEN感染的自然循环。     

IL-12基因重组卡介苗免疫效应研究

目的:本研究在已构建人IL-12基因重组卡介苗(rBCG-12),并在体外成功诱导表达IL-12的基础上,进一步研究其免疫后在小鼠体内诱导细胞和体液免疫应答的能力,探讨rBCG-12免疫后对小鼠免疫效应的影响。方法:近交系BALB/c小鼠36只,随机分3组:BCG组、rBCG-12组与PBS组。实验小鼠皮下多点注射细菌悬液0·3mL/只,其中活菌量为1×106 CFU/mL,免疫一次,PBS组仅注入PBS液。末次免疫后6周、8周、10周、12周分别分离小鼠血清测定特异性抗体水平,同时分离脾细胞,体外培养经BCG-PPD刺激后检测脾细胞增殖(XTT比色法)活性和脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)分泌水平。结果:PBS对照组各时间点均未检测到特异性抗体的产生。免疫后8周时rBCG-12组检测到抗体产生,而BCG组在免疫后10周才检测到抗体产生,且10周时与rBCG-12组抗体水平差异无统计学意义,之后两组抗体水平均有明显增高,免疫后12周时抗体滴度分别达到了1/640(rBCG-12)组和1/320(BCG组)(P<0·05)。BCG组与rBCG-12组间脾细胞增殖反应变化趋势相同,但rBCG-12组增殖反应明显强于BCG组(P<0·05)。免疫后10周时两组细胞增殖均达到最高峰,之后逐渐下降,rBCG-12组较BCG组下降缓慢,12周时rBCG-12组的增殖反应仍然维持在高水平。免疫后6~8周BCG组和rBCG-12组IFN-γ的产生均呈逐渐上升趋势。BCG组IFN-γ量在免疫后8~10周达到最高峰,12周时IFN-γ量降至100pg/mL。rBCG-12组8周时IFN-γ的量上升到约为200pg/mL,之后仍继续增加,10周时达最高峰,约为350pg/mL,12周时IFN-γ的量约为250pg/mL,明显高于BCG组(P<0·05)。而各时间点各组IL-4产生水平均不明显,BCG组与rBCG-12间P>0·05。结论:rBCG-12免疫后能明显改善机体免疫反应向Th1型极化,产生高水平的细胞免疫反应,而其对体液免疫反应有抑制的趋势,有利于机体抵抗结核菌感染。     

间充质干细胞在造血干细胞移植中的应用

应用计算机检索PubMed数据库2000—01／2008-01期间有关间充质干细胞与造血干细胞移植相关的文章，检索词为“MSC，HSCT”，限定文章语言种类为English。同时计算机检索维普数据库2000-01／2008-01期间相关文章，检索词为“间充质干细胞，造血干细胞移植”，限定文章语言种类为中文。并查阅与干细胞实验研究有关的书籍。对资料进行初审，选取符合要求的有关文章查找全文。纳入标准：①有关间充质干细胞对造血干细胞移植影响的研究。②造血干细胞移植机制的相关性研究。排除标准：重复性文章。共收集到66篇相关文献，28篇文献符合纳入标准。临床资料显示，两者共移植安全可行，可提高移植效果，降低近期死亡率。但其确切效果还需前瞻性随机对照临床实验进一步证实。     

分泌表达人IL-12基因重组卡介苗菌株的构建和筛选

目的 筛选获得分泌表达人白介素12(IL-12)的基因重组卡介苗菌株.方法 采用PCR反应从pORF-h IL-12载体中扩增得到人IL-12基因的完整序列,克隆入大肠杆菌-分枝杆菌(E.coli-BCG)穿梭载体pMV361中,构建含人IL-12基因的重组质粒rpMV-IL-12.将纯化的rpMV-IL-12电穿孔转化卡介苗(BCG),通过卡那霉素抗性筛选、基因组PCR方法进行初步鉴定,再经热休克诱导表达后,分别收集培养上清液和细菌沉淀,进行SDS-PAGE分析,筛选得到IL-12基因重组BCG(rBCG-12).结果 成功构建含人IL-12基因的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒rpMV-IL-12,测序结果与GenBank收录序列一致,未发生突变.rpMV-IL-12电穿孔转化BCG,经卡那霉素抗性筛选及基因组DNA的IL-12目的 片段PCR扩增筛选得到rBCG-12重组菌.rBCG-12热休克诱导表达后的SDS-PAGE电泳,从培养上清液中检测到相对分子质量为70×103的蛋白质条带,而细菌沉淀中未见到特异性条带.结论 分泌表达人IL-12蛋白的重组BCG菌株构建、筛选成功.     

多发性骨髓瘤循环miRNAs的研究进展及应用

多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)是一种多发于中老年人群的恶性浆细胞肿瘤.近年来,随着新药的开发及造血干细胞移植的广泛应用,MM患者的生存时间明显延长,但仍旧不能治愈,几乎所有患者均会复发、难治、甚至不治.在MM发生发展以及治疗过程中,精准的预后分层、及时准确的疗效评估对临床诊治有着重要意义.MM细...     

外泌体在多发性骨髓瘤发生发展中的作用及其临床应用前景

多发性骨髓瘤(MM)是好发于中老年人群的恶性浆细胞肿瘤,发病率位居血液肿瘤的第2位。MM细胞通过与骨髓微环境间的相互作用参与疾病的发生发展。外泌体是由细胞主动分泌产生的细胞外小囊泡,参与介导细胞间的蛋白质、脂质以及核酸等物质的转移来完成信息传递过程,促进肿瘤细胞的增殖存活、血管生成、溶骨病变、免疫逃逸和肿瘤细胞耐药等多种病理生理学过程。本文重点阐述外泌体在MM发生发展中的作用及相关研究进展,并讨论其临床应用价值及前景。     

SOX11基因在套细胞淋巴瘤患者中的表达及其临床意义

目的 探讨套细胞淋巴瘤(MCL)及其他B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者中SOX11 mRNA的表达情况及其在MCL中的预后意义.方法 采用实时定量RT-PCR方法 检测80例B-NHL患者(其中MCL 20例)肿瘤细胞SOX11 mRNA的表达水平,以GAPDH为内参照物,所得数据进行对数转化,组间分析采用Mann-Whitney非参数检验.结果 80例B-NHL患者SOX11 mRNA的中位表达水平为2.90(0.75～4.63),MCL患者的SOX11 mRNA水平明显高于其他B-NHL患者(P=0.014);白细胞增高、12号染色体三体、MYC基因扩增和近期疗效＜部分缓解(PR)的MCL患者SOX11 mRNA表达水平明显低于其他MCL患者(P值分别为0.042、0.013、0.028和0.009),但其与套细胞淋巴瘤国际预后指数(MIPI)分层、LDH、共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM)异常和P53缺失无显著相关性(P值分别为0.333、0.790、0.865和0.116).中位随访25个月,SOX11 mRNA高表达患者的无进展生存、总生存均优于低表达患者(P值分别为0.002和0.043).结论 SOX11 mRNA在MCL患者中高表达,且与部分预后因素相关;SOX11 mRNA高表达可能为MCL患者预后良好的指标.     

两株登革2型病毒E、NS1蛋白基因序列测定及其系统发生分析

目的 :对从登革出血热 (denguehemorrhagicfever ,DHF)病人血清分离到的一株登革 2型病毒 (denguevirustype 2 ,DEN 2B株 )和DEN 2NGC株作E、NS1蛋白部分基因序列测定并进行系统发生树分析 ,了解其变异及分子进化特证。方法 :利用RT PCR法扩增B株和NGC株E、NS1部分基因片段 ,PCR产物直接测序 ;利用DNAssist软件预测其氨基酸序列 ,以及PHYLIP软件的CLUSTAL方法绘制系统发生树。结果 :B株与NGC株E蛋白基因区第 1～ 4 76nt(4 76bp)碱基序列存在 8个位点的差异 ;编码氨基酸存在 4个位置的不同 ;NS1基因区第 5 89～ 1 0 0 …