刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的克隆与表达

目的　克隆编码刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的基因,构建原核表达载体pET MMIC3,并在大肠杆菌BL2 1株中表达。方法　采用PCR技术从刚地弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码微线体蛋白MIC3成熟肽的基因,并克隆到T载体上,经测序鉴定后,将目的基因亚克隆到表达载体pET30a(+)上,构建质粒pET MMIC3。表达产物用Westernblot进行进一步确认。结果　经初步菌液PCR鉴定,提取质粒双酶切鉴定并测序,确认插入T载体的序列为所需的目的序列;亚克隆构建pET -MMIC3,转化到宿主菌大肠杆菌BL2 1,得到分子量为37.2kDa的重组表达蛋白,Westernblot的结果与预测相符。结论　成功的克隆并融合表达了刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽,为进一步研究其在弓形虫粘附和入侵中的作用奠定了基础。     

贵阳市社区人群代谢综合征多重危险因素干预前后的对比分析

目的 通过对心脑血管病社区防治示范点人群进行综合干预,来观察代谢综合征(MS)各项有关指标,评价干预效果并指导干预措施.方法 2001年按照中国预防医学科学院设计的示范点基线调查要求,对贵阳市黔灵镇社区心脑血管病综合防治示范点人群(＞15岁)的多重危险因素进行调查和综合干预.抽样方法采用三阶段固定样本随机抽取1817人.经过5年综合干预后,2006年按上述方法再次三阶段固定样本随机抽取1231人进行复查.同时对该社区人群在干预前后分别进行心脑血管病事件发生率的抽样调查.结果 干预后人群MS的患病率为9.3%,较基线时(干预前)12.0%相比有明显下降(P＜0.05).干预后MS相关因素≥1,≥2,≥3个的人群发生率与基线时比较.发生率有明显下降(P＜0.01).干预后人群高血压患病率与基线时比较有明显的下降(干预后:18.1%比干预前:23.4%,P＜0.01).人群高血压知晓率、治疗率和控制率分别从基线时的17.1%、13.0%、4.6%提高到45.7%、41.4%、14.1%(P均＜0.01).人群中代谢综合征的相关指标与基线时相比,差异有显著性,其中以腰围、血糖、胆固醇、体质量指数下降明显(P＜0.01).干预后人群心脑血管病总事件发生率明显下降(干预后:2.4%比基线时:4.1%,P＜0.01).结论 通过对社区人群心脑血管病的多重危险因素的综合干预,能明显降低人群MS的患病率及其各项主要指标,人群心脑血管病总事件发生率明显下降.     

小内径球囊保护分支开口的临床效果观察

目的比较小外径球囊与经典保护导丝,在冠脉分叉病变介入治疗中对分支开口保护效果。方法比较30例冠脉分叉病变,随机分为两组,A组（15例）放置保护导丝于分支内,完成主支内球囊预扩张、支架植入,观察分支血流情况;B组（15例）完成主支内球囊扩张后,放置小外径球囊于分支开口附近,于主支支架扩张同时低压力扩张分支球囊,支架植入后观察分支开口血流情况。通过两组间分支血流相应评分,比较分支开口保护情况。结果A组有3例分支闭塞,7例血流减少,5例血流同于术前,0例血流改善,总计分17分。B组有0例分支闭塞,1例血流减少,5例血流同于术前,9例血流改善,总计分38分。两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用小球囊保护分支血管,较经典导丝保护后的分支血流情况进一步得到改善,提高手术效果,减少后续处理的难度。     

东北地区城市脂肪肝的患病率及其危险因素的流行病学调查

目的探讨东北地区成人脂肪肝的流行病学特征及其危险因素。方法选取2009年1月~2009年12月具有完整资料的某体检中心的健康体检者15 635例,其中男9 037例,女6 598例,男女之比为1.37：1,年龄16~95岁,平均年龄（47.85±13.21）岁。通过性别、年龄分层后比较脂肪肝的患病率,并将脂肪肝患者的体质量指数、血压、血脂、血糖、尿酸、血常规、肝功能等检测结果与非脂肪肝组进行对比分析。结果 B超共检出脂肪肝患者5 955例,总患病率为38.1%,男性患病率显著高于女性（48.8%vs23.4%,χ2=1039.853,P〈0.001）;30~69岁的男性脂肪肝的患病率超过50%,尤以40~49岁最高（55.2%）,女性在39岁之前脂肪肝的发生率不足10%,50岁后骤然上升至35%以上,60~69岁达到高峰并超过男性（43.4%vs40.5%）,70岁以后女性脂肪肝患病率仍显著高于同龄男性（35.5%vs28.3%,χ2=7.670,P〈0.006）。非脂肪肝人群超重者占35.6%,肥胖占7.5%,而脂肪肝人群两者分别为51.0%,36.8%。脂肪肝组的血压、血糖、甘油三酯（TG）等增高的检出率明显高于非脂肪肝组,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）降低的检出率明显低于非脂肪肝组（P均〈0.001）。单因素分析显示,体质量指数（BMI）、收缩压、TG、空腹血糖（FBG）和血尿酸（UA）,以及γ谷氨酰基转移酶和丙氨酸氨基转移酶在脂肪肝组明显高于非脂肪肝组（P均〈0.001）;相反,HDL-C则显著低于非脂肪肝组（t=47.174,P〈0.001）。多因素Logistic回归分析提示,脂肪肝危险因素包括BMI、TG、UA、FBG、舒张压、胆固醇等,OR值分别为3.590、1.936、1.567、1.508、1.346和1.177。结论东北地区城市男女脂肪肝的发生率在各年龄段有明显差异,脂肪肝的发生与代谢综合征的组分明显相关,尿酸的增高也与脂肪肝的发生明显相关。     

肿块型慢性胰腺炎39例临床分析

目的 探讨肿块型慢性胰腺炎的临床特征.方法 回顾分析2005年1月至2007年12月间39例经手术病理证实的肿块型慢性胰腺炎患者临床表现、影像学及病理学资料,并与经手术病理检查证实的17例胰腺癌患者进行比较.结果 39例肿块型慢性胰腺炎和17例胰腺癌患者中黄疸分别有14例和1例.差异有统计学意义(χ2=0.111,P=0.045),血清癌胚抗原升高分别为0例和3例,糖链抗原(CA)19-9升高分别为12例和11例,差异均有统计学意义(P值均＜0.05);CT显示胰腺萎缩、胰腺周围及血管侵犯分别有0、5例和3、8例,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).31例肿块型慢性胰腺炎和14例胰腺癌患者行磁共振胰胆管造影检查,胰管扩张、胰管中断、胆管扩张分别有14、2、15例和11、6、2例.差异均有统计学意义(P值均＜0.05).18例肿块型慢性胰腺炎和14例胰腺癌患者行超声内镜引导下细针穿刺检查,前者未找到肿瘤细胞,后者中10例发现恶性肿瘤细胞.结论 肿块型慢性胰腺炎诊断困难,结合临床特点、肿瘤血清标志物检查、影像学检查对诊断有一定帮助,尤其活组织病理检查有较高的诊断价值.     

缺血性脑卒中各病因学亚型发病时间的探讨

目的:探讨缺血性脑卒中各病因学亚型的发病时间规律。方法 :记录发病7天之内入院的缺血性脑卒中患者的发病时间和发病状态,并于患者出院时进行TOAST病因学分型。以3小时为一个时间段共分为8个时间段,统计各亚型各时间段在剔除睡眠中发病的患者前后的发病例数,对各亚型的发病时间分布进行频数分布拟合优度的卡方检验。结果 :剔除睡眠中发病的患者前,LAA、CE、SUD三型频数分布拟合优度的χ2分别为18.69、38.67、25.92,P均<0.01,发病频率最高时间段依次为:06:00~09:00和18:00~21:00、09:00~12:00和18:00~21:00、06:00~09:00和18:00~21:00;SAD型χ2为11.52,P>0.05,差异无统计学意义。剔除睡眠中发病的患者后,LAA和CE型χ2分别为33.01、31.60,P均<0.01,发病频率最高时间段依次为:06:00~09:00和15:00~18:00、09:00~12:00和18:00~21:00;SAD和SUD型χ2为31.60、78.64,P均<0.01,发病频率最高时间段依次为:09:00~12:00和06:00~09:00。结论 :缺血性脑卒中四种病因学亚型发病时间均存在昼夜节律;LAA和CE型发病时间分布呈现双峰,SAD和SUD型发病时间分布呈现单峰。     

不稳定型心绞痛患者介人术后对比剂肾病的危险因素

目的探讨不稳定型心绞痛患者冠状动脉(冠脉)介入诊断及治疗术后对比剂肾病(CIN)的发生率及危险因素。方法连续入选2007年1～8月因不稳定型心绞痛入院并接受择期冠脉介入手术的患者232例。排除标准:(1)血压<120/70 mm Hg;(2)心功能(NYHA)分级>Ⅲ级。术中使用低渗非离子型对比剂碘普罗胺。介入术后24～72 h血肌酐(Scr)较基础值增高25%或44.2 μmol/L定义为CIN。分析CIN发生率与各项危险因素的相关性。结果 CIN总发生率为14.7%。冠脉钙化、术前Scr水平≥132.6 μmol/L、内生肌酐清除率(Ccr)<60 ml/min、NYHA Ⅲ级、糖尿病及年龄≥70岁的患者CIN发生率均明显增高。多变量回归分析显示,基线Scr≥132.6μmol/L、Ccr<60 ml/min、NYHA Ⅲ级与CIN的相关性最强。结论不稳定型心绞痛患者接受冠脉介入术后CIN是常见的并发症;高龄、肾功能不全、心功能不全、糖尿病及造影发现冠脉钙化是CIN发生的危险因素。     

急性乙型肝炎HBcAg特异性CTL克隆建立及初步分析

目的建立急性乙型肝炎（乙肝）患者的HBcAg特异性CD8^＋T细胞克隆。方法一例急性乙肝患者经用序列特异引物聚合酶链反应分型技术,测得其人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）-A基因型为1101,其外周血单个核细胞采用重组HHBcAg和合成的HLA—A＊1101限制性表位肽（HBV croe88—96）刺激,并以有限稀释法对活化的T细胞进行克隆化,建立HBcAg特异性的CD8^＋T细胞克隆。用免疫荧光染色、流式细胞术以及乳酸脱氢酶释放实验鉴定所获克隆。结果获得13株HBcAg＋特异性CD8^＋咖胞克隆（6侏为Tc1,3株为Tc2,4株为Tc0）。其中12株具有明显的特异性细胞毒沂陛（37．5％-85．5％,效／靶比为2．5：1）,1株（A10株,Tc0）细胞毒活性仅为10．2％。结论应用HLA—A＊1101限制性表位肽（HBV croe88—96）刺激急性乙肝患者的外周血单个核细胞,建立了13株肽表位特异性的CD8^＋T细胞克隆,为进一步研究打下基础。     

Tom-1基因在糖尿病胰岛素抵抗患者网膜脂肪组织表达定量研究

目的探讨Tom-1基因在2型糖尿病胰岛素抵抗(T2DM-IR)患者网膜脂肪组织表达水平。方法取T2DM-IR患者与非糖尿病无IR者(对照组)网膜脂肪组织,用荧光定量RT-PCR技术测定Tom-1 mRNA的表达量。结果Tom-1 mRNA的表达量在T2DM-IR组为4440±617拷贝/百万看家基因,对照组为1360±82拷贝/百万看家基因,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在人腹腔网膜脂肪组织中Tom-1 mRNA有表达,在T2DM-IR组呈上调表达。因此,这条基因可能与T2DM的IR有关。     

慢性HBV感染者CD8^＋ T细胞免疫反应的研究

目的观察不同慢性HBV感染者外周血CD8^＋ T细胞的细胞内毒性颗粒和细胞因子的表达水平。方法用rHBcAg作为刺激剂,采用免疫荧光染色结合流式细胞术分析慢性乙型肝炎中度、重度患者以及无症状HBV携带者外周血CD8^＋ T细胞的IFN-γ/IL-4和穿孔素/颗粒酶B表达水平。结果慢性乙型肝炎重度患者CD8^＋T细胞的穿孔素及颗粒酶B百分率显著高于正常对照（P〈0.01）和HBV携带者（P〈0.05,P〈0.01）,中度患者显著高于正常对照（P〈0.05）。2组慢性乙型肝炎IFN-γ＋/CD8^＋ T细胞（Tc1）百分率均高于正常对照和HBV携带者（P〈0.05）。HBV携带者CD8^＋T细胞的穿孔素和颗粒酶B表达以及Tc1百分率与健康对照差异无统计学意义。IL-4^＋/CD8^＋ T细（Tc2）表达各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CD8^＋ T细胞中穿孔素/颗粒酶B表达率的增加以及Tc1细胞增加与慢性HBV感染的肝损伤有关。