CCK-8法与LDH法检测CIK细胞毒活性的比较

目的:探讨CCK-8法和LDH法检测CIK细胞活性的最佳条件.方法:经密度梯度法分离得到人外周血中单个核细胞,经细胞因子刺激培养14 天收获CIK细胞,采用CCK-8法与LDH法检测CIK细胞对前列腺癌细胞毒活性.结果:CCK-8法的最佳检测时间为加入CCK-8试剂后3~4 h,适宜细胞数量范围为0.32×103~2.0×104个/孔.结论:CCK-8法较LDH法稳定性好,准确性好,操作简便,是一种优于LDH法的检测免疫细胞毒活性的方法.     

肿瘤特异性γ δ T细胞扩增体系的建立及其抗肿瘤活性研究

目的:建立一种体外诱导肿瘤细胞特异性γ δ T细胞的培养体系.方法:从人外周血中分离单个核细胞(PBMCs),用不同浓度的磷酸抗原(IPP)与rhIL-2联合刺激γ δ T细胞增殖,观察并收集细胞,采用流式细胞仪检测刺激后 CD3+Vγ9+的 γ δ T 细胞数量以及比例,并计算其扩增效率.结果:经15天扩增培养后,高浓度组10μg/ml 的IPP联合500IU/ml rhIL-2刺激得到的γ δ T细胞的扩增效率最高,且扩增培养至第9天的γ δ T细胞对肿瘤细胞有一定的杀伤活性.结论:适宜浓度磷酸抗原(IPP)联合rhIL-2能有效体外诱导具有较强抗肿瘤活性γ δ T细胞的扩增.     

循环肿瘤细胞在肿瘤精准医学中的应用浅析

肿瘤精准医学是一种基于肿瘤病人"定制"的医疗模式,是应用现代遗传技术,分子影像技术,生物信息技术结合患者生活环境和临床数据实现精准的治疗与诊断,制定具有个性化的疾病预防和治疗方案。循环肿瘤细胞(CTC)作为近年兴起的液态活检技术,具有实时、方便、微创的特点,对肿瘤的早期诊断、临床分期、方案制定、疗效及预后评价均具有重要意义。笔者主要对CTC在肿瘤精准医学中的应用及面临的挑战进行分析。     

重庆市652株葡萄球菌分析

目的：分析重庆地区葡萄球菌引起的感染及耐药状况，为葡萄球菌感染的诊疗提供实验依据。方法：收集重庆市8所医院的652株葡萄球菌，采用API－Staph进行分析鉴定。结果：共鉴定出12种葡萄球菌；广泛分布于16类临床标本中，其中泌尿生殖道及呼吸道标本中葡萄球菌的分布为最多;各类标本中分离到的葡萄球菌以金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌和木糖葡萄球菌较为多见；各型葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁和氨苄西林＋舒巴坦相对敏感，耐药率＜20％，对青霉素、红霉素和四环素耐药率＞80％。结论：葡萄球菌广泛存在于各类临床标本中，可引起全身不同部位的各类感染，以前少见的一些葡萄球菌类型成为有意义的感染菌；多肽类抗生素应是葡萄球菌感染的首选药物。     

METTL7B促进非小细胞肺癌细胞侵袭的机制研究

目的：探讨METTL7B对非小细胞肺癌细胞侵袭的机制。方法：通过western blot和qPCR检测METTL7B在A549细胞和正常人上皮细胞（BEAS-2B）分别在蛋白和mRNA水平上表达情况;利用慢病毒在A549细胞中过表达METTL7B,通过western blot 检测过表达效果,细胞transwell侵袭实验检测过表达METTL7B对A549细胞的侵袭能力;再利用双向电泳技术对过表达METTL7B的A549细胞中的蛋白质组学进行分析,寻找METTL7B促进非小细胞肺癌细胞侵袭的机制。结果：qPCR 和western blot 结果均显示METTL7B在A549中的表达明显高于正常的人肺上皮细胞。使用的慢病毒能有效地使METTL7B在A549中过表达,侵袭实验结果显示过表达METTL7B可增强A549细胞的侵袭能力。通过双向电泳技术分析过表达METTL7B细胞中差异蛋白,发现共有12个差异表达蛋白,其中6个上调,6个下调,且通过western blot 实验显示,过表达METTL7B细胞中的SOD1和SAE1表达上调。结论：METTL7B可能通过上调SOD1和SAE1的表达,从而增强非小细胞肺癌细胞的侵袭能力。