血液同型半胱氨酸的测定方法及临床意义

同型半胱氨酸是人体内含硫氨基酸的一个重要的代谢中间产物,可能是动脉粥样硬化等心血管疾病发病的一个独立危险因子。血浆中同型半胱氨酸含量与遗传因素,营养因素,雌激素水平,年龄因素等有关,与同型半胱氨酸代谢有关的Ｎ５Ｎ１０－亚甲基四氢叶酸还原酶和胱硫醚－β－合成酶的基因突变,阔 性下降,也可引起高同型半胱氨酸血症。     

荧光多聚酶链反应测定细胞色素P450 3A5 1*3多态性

目的：建立荧光多聚酶链反应测定细胞色素P450 3A5 1＊3的多态性。方法：以TaqMan技术为基础,采用等位基因特异性引物,在引物的3′端第二位人为引入一个非配对碱基提高引物的分辨力。对PCR反应的Mg^2＋和探针浓度进行优化,同时对本方法的灵敏度和精密度进行了研究,应用直接DNA测序法对准确度进行评价。结果：优化后的Mg^2＋和探针浓度分别为3．5mmol／L和0．7μmol／L,批内（n=20）CV为1．41％,批间（n=20）CV为1．72％,在25μl反应体系中,样本DNA浓度5．0×10^2～5．0×10^6Pg范围内可获满意结果。本法确定的50份标本基因型与直接DNA测序法结果完全一致。结论：本法快速、灵敏、可靠,适用于细胞色素P450 3A5 1＊3多态性测定。     

丙酮酸氧化酶法测定血浆中丙酮酸及临床初步应用

 目的 建立一种新的丙酮酸氧化酶偶联比色法测定血浆丙酮酸。方法 利用丙酮酸氧化酶氧化丙酮酸生成过氧化氢,过氧化氢与2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸和氨基安替比林在过氧化物酶的作用下生成红色化合物。结果 该法线性范围达1000μmol／L,批内和批间平均变异系数分别为1.77％和2.23％,平均回收率99.9％,与紫外酶偶联法比较,相关系数r=0.9986,y=1.003x+0.854,40例健康人血浆丙酮酸32～104μmol／L(x±2S),15例糖尿病患者的血浆丙酮酸为88.45±31.98μmol／L 结论 该方法具有灵敏、准确、简便、快速等优点。糖尿病患者血浆丙酮酸水平显著高于正常对照组(P＜0.01)。     

肝移植后移植物抗宿主病的研究进展

自1988年Burdick等[1]报告首例肝移植后移植物抗宿主病(graft-versus-host disease, GVHD)以来,随着肝移植广泛开展,GVHD已成为肝移植领域一个重要的研究课题.……     

柠檬无色藻菌的鉴定方法及体外药敏特点

目的总结临床少见菌柠檬无色藻菌的鉴定过程,认识柠檬无色藻菌的耐药特点,并对该菌感染的临床特征进行分析。方法菌株分离培养后,采用传统的形态、生理生化表型和VITEK-2全自动细菌鉴定仪与16S rRNA序列分析相结合的方法来鉴定菌株。结果多次传代后,综合菌株形态、生理生化表型、VITEK-2全自动细菌鉴定仪以及16S rRNA序列分析的结果,确定该分离株为柠檬无色藻菌;药物敏感定量试验显示红霉素、四环素、复方新诺明、三代头孢菌素及喹诺酮类药物均敏感,唯有万古霉素和替考拉宁耐药。结论柠檬无色藻菌引起的血流感染比较罕见;16S rRNA基因序列分析方法可以较好地鉴定常规方法难以鉴定的不典型及罕见菌株。对万古霉素及替考拉宁耐药可以作为无色藻菌与其他阳性球菌鉴别的重要依据。     

氧化应激对视网膜神经纤维厚度的影响

目的探讨高温、高强度和在阳光中紫外线辐射下视网膜神经纤维层厚度的变化。方法选择训练组和对照组士兵共60人,于训练结束后,抽取外周血。采用光学相干断层成像术fOCT）对受试者视乳头周围视网膜神经纤维平均厚度进行测量。采用酶联免疫吸附测定法检测对照组和训练组血清中活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）、丙二醇（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的表达水平。结果对照组和训练组的视网膜神经纤维厚度比较差异无统计学意义（P〉0．05）。对照组和训练组血清中ROS、NO、SOD表达水平比较,差异有统计学意义（均P〈0．01）;对照组和训练组血清中MDA表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论高温、高强度和阳光中紫外线辐射下训练,机体产生自由基增多,但视网膜神经纤维层厚度无明显变化。     

荧光多聚酶链反应测定线粒体乙醛脱氢酶-2 Glu504Lys多态性

目的 建立一种荧光多聚酶链反应测定线粒体乙醛脱氢酶-2 Glu504Lys多态性的方法.方法 以水解探针技术(TaqMan)为基础,设计相应的引物和荧光探针,PCR反应的Mg2+浓度和探针浓度进行优化,同时对本方法的灵敏度和精密度进行了研究,通过PCR产物直接测序对准确度进行评价.结果 优化后的Mg2+和探针浓度分别为2.5 mmol/L和1.0 μmol/L,批内循环阈值(Ct)值的变异系数为1.38%(n=20),批间Ct值的变异系数为1.48%(n=20);在25 μl反应体系中,人基因组DNA在5.0×102～5.0×106 pg浓度范围内可以得到满意的结果.本法确定150份标本的基因型与PCR产物直接测序法比较,结果完全一致.结论 本方法快速、灵敏、可靠,适合于临床实验室和大规模测定线粒体乙醛脱氢酶-2Glu504Lys多态性.     

肝移植术后患者脂蛋白(a)水平变化及与肝功能指标的关系

[目的]探讨肝移植术后患者血清脂蛋白(a)[LP(a)]水平及肝功能指标变化及与预后的关系。[方法]选取2011-01—2014-05期间在我院收治的97例肝移植术后患者为研究对象(肝移植组),随机抽取同期健康体检患者40例为对照组,应用胶乳凝集比浊法测定观察血清LP(a)变化,同时检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶、转肽酶、总胆红素、结合胆红素、胆碱酯酶血清水平。[结果](1)与对照组相比,肝移植组LP(a)水平明显降低,经分析差异有统计学意义(P0.05);与此同时,肝移植组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、转肽酶、总胆红素水平升高,胆碱酯酶水平降低,差异具有统计学意义(P0.05);肝移植组结合胆红素水平与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)相关分析显示,肝移植术后患者LP(a)与谷丙转氨酶、谷草转氨酶、转肽酶、总胆红素呈负相关,与胆碱酯酶呈正相关(r分别为-0.258、-0.233、-0.193,-0.225,0.195,均P0.05)。[结论]肝移植术后患者血清LP(a)水平明显降低,可作为肝移植术后的病情监测的新的生物学标记物。     

高尔基蛋白73参与炎症反应的分子机制研究

目的：通过研究高尔基蛋白73（GP73）对炎症反应的影响,揭示其参与肿瘤发生发展可能的机制。方法基于TCGA数据库中肝癌患者的GP73与炎症因子NF－κB、IL－1β、IL－6、TNF－α等基因表达相关性的分析,推测GP73可能参与炎症反应。依据数据分析结果设计细胞实验,构建过表达GP73的质粒和敲低GP73的小干扰RNA （ siRNA）,通过检测野生型、过表达和敲低表达GP73细胞系中NF－κB的转录活性以及炎症因子IL－1β、IL－6、TNF－α等基因的表达,来验证GP73在炎症反应中发挥的作用。结果 TCGA数据库分析结果提示,临床肝癌患者的GP73基因表达与NF－κB、IL－1β、IL－16及TNF－α的表达均呈正相关;细胞实验结果显示,过表达GP73细胞系与野生型相比,细胞内NF－κB转录活性升高,而敲低GP73细胞系内NF－κB转录活性降低;过表达GP73细胞系与野生型相比细胞内IL－1β、IL－6及TNF－α的表达均升高;二硫代氨基甲酸吡咯烷（ PDTC）能抑制GP73激活炎症反应,NF－κB为GP73激活炎症反应的关键分子。结论 GP73可能参与炎症反应,并因此促进肿瘤的发生发展。     

鼻内镜下行儿童腺样体吸切术36例治疗体会

1引言腺样体肥大是儿童常见病,是引起儿童分泌性中耳炎、儿童鼾症、鼻窦炎的主要病因,如不及时诊治可引起“腺样体面容”,影响儿童的生长发育及损害听力犤1犦,腺样体吸切术已成为治疗分泌性中耳炎及儿童鼾症的常规手术。我科自2001年以来在鼻内镜下行儿童腺样体吸切术36例,现总结如下。2临床资料2.1一般资料本组36例,男25例,女11例;年龄5～11岁(平均8岁),病程3～6年。其中分泌性中耳炎15例,儿童鼾症11例,慢性鼻窦炎5例,分泌性中耳炎并儿童鼾症5例。全部病例均有保守治疗史。术前经鼻咽侧位X线片、鼻窦冠状位CT、鼻内镜等检查确诊,已行扁桃…