HER2 RNA干扰与TGF-β1中和联合应用提高荷瘤小鼠生存率

目的探讨提高癌基因HER2 RNA干扰抑瘤效果的新方法。方法采用RNA干扰抑制B16细胞中癌基因HER2的表达后,体外分析HER2 RNA干扰对B16细胞的增殖、老化、凋亡和细胞周期的影响。用TGF-β1中和抗体腹腔注射C57BL/6小鼠,皮下接种HER2 RNA干扰后肿瘤细胞或对照细胞,检测血清中游离TGF-β1的含量、观察荷瘤小鼠生存情况。结果与对照相比,HER2 RNA干扰后B16细胞的增殖速度显著下降,细胞凋亡率和G2/M期细胞明显增加,而细胞的老化则无显著变化。体内实验发现,TGF-β1中和抗体对接种了对照肿瘤细胞的小鼠的生存率无明显影响;与接种了对照肿瘤细胞的小鼠相比,接种了HER2RNA干扰肿瘤细胞的小鼠生存率有一定程度的提高,TGF-β1中和抗体则进一步提高了接种HER2 RNA干扰肿瘤细胞的小鼠生存率。结论癌基因HER2的RNA干扰可通过抑制细胞分裂、促进细胞凋亡等抑制B16细胞的增殖,TGF-β1中和与HER2 RNA干扰联合应用可显著提高荷瘤小鼠的生存率。     

一种新Pre-S(2)合成肽CTL表位糖基化方法

目的 为研究ＨＢＶ Ｐｒｅ－Ｓ（２）上糖基化（Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ）结构差异（包括位置、种类、数量和糖链长度差异）与其生物学活性关系,建立一种Ｎ－或Ｏ－连接糖基化以外的合成肽α－和ε氨基糖基化方法。方法 用化学方法将单、双和聚糖共价连接在Ｐｒｅ－Ｓ（２）合成肽上的含α－和ε－氨基的氨基酸残基上,即具体连接在肽Ｎ端Ｍ１的α－氨基和Ｋ１６的ε－氨基上。此二氨基酸残基位于或接受Ｐｒｅ－Ｓ（２）上公     

FLK1265-2493与C3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达

目的 构建FLK1265-2493与C3d3融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增FLK1265—2493片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG．SS．C3d3．YL,构建FLD1265-2493与C3d3融合基因表达质粒。经限制性酶切鉴定和DNA序列测定结果证实后,将重组质粒pSG．SS．FLK1265—2493．C3d3．YL转染Hela细胞,检测其体外表达。结果免疫印迹和免疫细胞化学分析结果分别表明转染细胞上清液和胞浆内均有目的分子的存在。结论构建的DNA疫苗可在真核细胞内正确表达,这为进一步的动物实验打下了基础。     

小剂量肝素钙佐治新生儿硬肿症63例观察

目的探讨小剂量肝素钙对新生儿硬肿症的治疗作用及安全性。方法治疗组与对照组各 6 3例。两组均常规复温、纠酸扩容、抗感染、补充热量及血管活性药物等综合治疗。治疗组在上述基础上加用肝素钙 ,剂量10～ 12 .5u/ (kg·次 ) ,每 12h 1次 ,皮下注射。结果小剂量肝素钙治疗组较对照组硬肿消退时间明显缩短 ,两组疗效差异有显著性 ,治疗过程中无毒副作用。结论小剂量肝素钙皮下注射治疗新生儿硬肿症是安全有效的方法。     

中西医结合治疗活动性狼疮性肾炎28例疗效观察

系统性红斑狼疮(SLE)是一种较常见的结缔组织炎症,SLE肾活检电镜检查几乎全部都有肾小球损害。狼疮性肾炎(LN)治疗较困难,本文28例采用中西医结合治疗,即激素加上环磷酰胺,配合中医辨证论治,取得显著疗效,与对照组26例比较有显著差异,现报道如下。1 临床资料 本文54例(本资料部分来源于广州南方医院)均符合1982年美国风湿病会关于SLE的诊断标准(11条),且具备以下1项以上者:持续尿蛋白在(+)以上或镜下血尿,红细胞>10个/HP,或管型尿或肾功能损害,均为活动性狼疮性肾炎。治疗组28例中,男5例,年龄12～40岁,平均26.4岁,病史3个月～3a;女23例,年龄11～38岁,平均25.6岁,病史     

蛋白质组技术鉴定肿瘤相关抗原的研究进展

随着人类基因组测序的完成和蛋白质组技术的发展,采用蛋白质组技术筛选肿瘤相关抗原是近来发展的一种有效、简单的筛选肿瘤抗原的方法。基于蛋白质组技术肿瘤相关抗原的鉴定主要包括两步:一是利用血清学蛋白质组技术筛选自身抗原,二是鉴定目的分子。在多种肿瘤中已经采用该方法鉴定了一些肿瘤抗原,并在肿瘤的诊断、治疗以及预后发挥重要作用。本文主要介绍了基于蛋白质组技术鉴定的肿瘤相关抗原和鉴定抗原的表达情况以及与疾病关系的分析。     

C3bα链N端42肽促进外源性抗原的交叉呈递

目的　观察补体C3bα链N端 4 2肽是否可促进外源性抗原的交叉呈递。方法　三种肽 :OVACTL表位 (2 5 7～ 2 6 4 )、C3bAN4 2 OVA2 57～ 2 6 4、OVA2 53～ 2 6 6 用化学法合成 ,然后HPLC纯化、质谱分析。三种肽分别在不同条件下与H 2 b 细胞系ANA 1、RMA S共孵育 ,单抗 2 5 D1.16检测细胞表面OVA2 57～ 2 6 4 Kb 复合物的变化。结果　C3bAN4 2 OVA2 57～ 2 6 4比OVA2 53～ 2 6 6 肽更容易被呈递 ,TAP分子不影响C3bAN4 2 肽的交叉呈递 ,但温度和NH4 Cl对交叉呈递有不同程度的影响。C3bAN4 2 介导的交叉呈递可以提高抗原肽 MHC复合物的稳定性。结论　补体C3bα链N端 4 2肽可促进外源性抗原的交叉呈递 ,并且能延长抗原肽的呈递时间。以上发现可以为肽、蛋白疫苗的设计提供新的启示。     

Prostein31-39特异的、HLA-A*2.1限制性NKT细胞表型及功能初步研究

目的诱导培养前列腺癌相关抗原Prostein特异性NKT细胞,并对其表型及功能作初步研究鉴定。方法以Prostein31-39肽、IL-2、IL-12反复刺激培养HLA-A*2.1 健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs),对得到的细胞系进行细胞毒功能试验,并以多色流式细胞检测技术进行表型分析。结果Prostein31-39肽、IL-2、IL-12可以诱导PBMCs产生肽特异性CD3 /CD56 NKT细胞,具有较强的肽特异性细胞毒活性及NK样细胞毒活性。结论Prostein31-39肽、IL-2及IL-12可以协同诱导培养肽特异性NKT细胞,这为研究抗原特异性NKT细胞在前列腺癌免疫治疗中的作用奠定了基础。     

KG1及其诱导的树突样细胞中DC-SIGN的表达

目的了解在KG1诱导来源的树突样细胞（Dendritic—like cells,DLCs）中DC特异性C型凝集样受体DC—SIGN的表达。方法采用佛波酯（PMA）和离子霉素（Ionomycin）诱导KG1细胞为DLCs,采用Western免疫印迹、RT-PCR和流式细胞仪检测KG1和KG1来源的DLCs不同诱导时期DC—SIGN的表达。结果形态学方法确定成功诱导了KG1来源的DLCs,KG1细胞和其来源的DLCs均有DC—SIGN的表达,且当KG1诱导为DLCs细胞后DC—SIGN表达增强,尤其在DLCs的早期成熟阶段（诱导12～24h）。结论KG1细胞和其来源的DLCs上均有DC—SIGN的表达,且在诱导为DLCs后DC—SIGN的表达增强,为进一步研究DC—SIGN介导的抗原呈递途径奠定了基础。     

构建重组肿瘤基因疫苗对肿瘤进展及生存率影响的实验结局(英)

目的:利用P815肿瘤动物模型观察IL-12对肿瘤动物模型抗肿瘤作用的效应。方法:将小鼠肥大细胞瘤P815特异抗原基因P1A克隆到真核表达质粒pCI-neo中;用P815细胞对DBA/2小鼠右腹侧皮下注射,构建P815小鼠肿瘤模型;以重组基因疫苗单独或与鼠IL-12真核表达质粒一起肌肉注射,观察肿瘤的消长、特异细胞毒T淋巴细胞激活和抗体的生成情况。结果:重组基因疫苗在体外有很好的表达,注射后细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤效率为40%,IL-12共注射的CTL杀伤效率达到60%。免疫后,30%小鼠的肿瘤出现消退;同IL-12共注射则有50%的小鼠的肿瘤出现消退。两种情况下都不能检测到任何特异抗体的产生。结论:长期存在的IL-12可以持续刺激机体细胞免疫,使肿瘤的生存环境持续恶化,从而达到治疗肿瘤的目的。