丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活蛋白5反式调节基因的筛选

目的:应用基因表达谱芯片技术研究丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活蛋白5的反式调节基因. 方法:以分子生物学技术构建NS5ATP5的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP5,以表达质粒pcDNA3.1(-)- NS5ATP5转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA.应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析. 结果:HepG2细胞经转染NS5ATP5后,有17条基因表达增强,12条基因表达降低. 结论:成功筛选了NS5ATP5的反式调节基因,为进一步阐明NS5ATP5的反式激活作用及免疫调节机制提供了新的依据.     

慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒准种特点的初步研究

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）准种在慢性乙型肝炎患者中的存在状态。方法 以已知中国株HBV基因序列为依据。设计特异性聚合酶链反应（PCR）引物,自3例慢性乙型肝炎患者体内扩增HBV全S基因片段,克隆人pGEMTeasy质粒,用限制性片段长度多态性（RFLP）法确定HBV的变异现象,DNA测序确定病毒的变异程度。结果 分别自3例患者血清中克隆出29、28和8个阳性克隆,以EcoRⅠ酶切患者1和2的RFLP结果提示各有5种不同的长度带型,PCR产物XhoI酶切RFLP结果表现为高度保守,测序结果发现HBV体内毒株DNA序列高度一致,同一患者两株全S区序列测序结果表明DNA序列的同源性大于97%。结论 慢性乙型肝炎患者体内有HBV准种共存,且呈现出一定的优势克隆现象。可能与患者预后有关。     

丙型肝炎病毒E2结合蛋白1结合蛋白的酵母双杂交筛选研究

目的 应用酵母技术筛选丙型肝炎病毒(HCV)7包膜蛋白E2结合蛋白1(E2BPl)的结合蛋白。方法 应用酵母双杂交系统3，构建E2BP1诱饵质粒，转化酵母AH109，与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合，于涂有x-α-gal营养缺陷型培养基(SD／-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长，对于阳性克隆的插入基因片段序列进行测定，并进行生物信息学分析。结果 53个阳性克隆测序，结果与GenBank数据库进行初步比较。其中6个克隆为未知功能基因，其余47个均与己知基因的序列高度同源(90％～100％)。这47个己知基因包括人类酶原颗粒蛋白16、人类染色体序列、人类乙酰辅酶A转乙酰酶1(ACATl)、人类4．羟基苯丙酮酸二加氧酶、人类硒蛋白P1(SEPP1)、人类组织蛋白酶F(CTSF)、人类prosaposin(PSAP)、人类金属硫蛋白2A等16种。结论 HCVE2BP结合蛋白的酵母双杂交技术筛选为进一步研究E2BP1蛋白相互作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定了基础。     

应用抑制性消减杂交技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白2反式调节基因

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2)反式调节基因cDNA消减文库,研究HCV NS2蛋白的反式调节基因.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术筛选转染pcDNA3.1(-)-NS2和空载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞差异性表达基因,并进行生物信息学分析.结果:获得12个差异表达的已知蛋白基因和3个未知功能基因序列,包括:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3, GPC3)、酸性核糖体磷蛋白PO、核糖体蛋白L13a、整合素β1、天冬酰胺合成酶、信号肽酶、α-2-HS-糖蛋白、小核糖体蛋白多肽G、蛋白酶样亚单位、黄体酮受体、SDR家族脱氢酶8、Ras家族RAB4A、具有BTB/POZ结构的新蛋白、具有coiled-coil-helix结构的新蛋白、未知功能基因.结论:成功构建HCV NS2反式调节的相关基因cDNA消减文库,为今后进一步分析、研究病毒蛋白的致病机制提供了线索.     

高频超声诊断腋下淋巴管囊肿伴感染1例

病例女,40岁。因＂右腋下包块发现1年余,自觉包块变大伴疼痛1周＂入院。体格检查：右腋下扪及10cm×10cm肿块,皮肤表面红肿,压痛明显,质地较韧,边界欠清,活动度欠佳。血常规WBC：18.99×109/L,穿刺抽出淡黄色液体,涂片未找到抗酸杆菌。超声检查：右腋下见11.0cm×7.5cm×5.5cm的无回声区,边界尚清,形态欠规则,内透声一般,     

乳腺癌组织中ADAM8 mRNA的表达及意义

目的:探讨解整合素-金属蛋白酶8(ADAM8)mRNA在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的表达量变化及其在乳腺癌发生、发展中的作用。方法:采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)检测39例乳腺癌及19例正常乳腺组织中ADAM8 mRNA的表达,分析ADAM8 mRNA表达量与乳腺癌临床病理因素的关系。结果:39例乳腺癌组织中的ADAM8 mRNA表达水平低于19例正常乳腺组织(P=0.015);淋巴结转移组表达水平低于无转移组,Ⅱb+Ⅲ期表达水平低于Ⅰ+Ⅱa期,但表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:ADAM8 mRNA在乳腺癌中表达下调,提示ADAM8基因表达抑制或缺失可能与乳腺癌的发生发展有关。     

微创手术后眼内炎

微创手术日益盛行,成为眼科主导术式。由于创口多为无缝线,术后的并发症也呈现不同的特征。眼内微创手术引起的眼内炎渐渐成为人们关注的焦点。本文就微创手术后眼内炎的流行病学,临床表现,诊断,治疗等方面的特征作一综述。     

参芪扶正汤辅助CEF方案治疗乳腺癌临床观察

目的观察参芪扶正汤辅助CEF方案治疗乳腺癌的临床疗效。方法将198例乳腺癌患者分为两组,对照组采用CEF方案治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用参芪扶正汤。结果治疗组总有效率显著高于对照组(P0.05);治疗组体重增加、生活质量显著优于对照组(P0.05);消化道反应、骨髓抑制、脱发、静脉炎不良反应显著少于对照组(P0.05)。结论参芪扶正汤能显著增加乳腺癌患者的化疗效果,降低其不良反应,提高患者生活质量,值得临床推广。     

机械通气患者镇静早期深镇静发生情况及危险因素分析

目的 分析ICU机械通气镇静患者早期深镇静的发生情况及危险因素,为降低深镇静的发生率提供参考依据.方法 采用回顾性研究方法选取ICU机械通气镇静患者77例,分析早期深镇静的发生情况及相关危险因素.结果 机械通气早期有57.14％ 的患者发生了深镇静;二元Logistic回归分析显示:使用苯二氮卓类药物(OR:6.685...