外科患者输血应注意的几个问题

输血是外科常用的治疗手段。近年来,随着输血对人体的不利影响日益受到重视以及输血技术的不断提高,输血观念已发生根本转变,但在外科临床工作中不合理输血仍屡有发生,外科医生在树立科学的输血观、规范临床合理用血方面仍需不断努力。目前,由于血源紧张,医疗用血供需矛盾日趋突出,外科医生在对待输血问题上,应具备高度的责任感,从严掌握输血适应征,充分衡量输血的得与失,做到科学、合理用血,努力减少异体输血。     

家族性脂肪瘤一家系七例

先证者(I 2) 女,74岁.自幼发育正常.从16岁左右起,体表开始出现较小的瘤体;瘤体组织柔软,无压痛,隆起于皮面.自述因家族中有同样病史者.随着年龄增长,部分瘤体逐渐增大,最大的瘤体直径约为6 cm.无其他不适症状.因自觉影响形象而来医院就诊.病理诊断:脂肪瘤.但因瘤体组织数目逐年增加,无法根除,患者被迫放弃治疗.患者已于3年前病逝,死因与该疾病无关.患者父母非近亲结婚.     

首次应用反转录病毒仅感染分裂细胞特性构建hTERT驱动野生型p53基因反转录病毒载体质粒

目的:选择只感染分裂细胞的鼠源性反转录病毒载体pLHCX作为载体,构建由hTERT启动子驱动目的基因表达的载体,实现靶向性表达.方法:实验于2005-09/2006-05在江西省分子医学重点实验室完成.①实验材料:含319 bp hTERT核心启动子的phTERT-luc质粒由军事科学院郑晓飞博士惠赠,反转录病毒载体质粒pLHCX由浙江大学朱永良教授惠赠,含1.8 kb wtp53基因的质粒pCMV-Neo-BamH-wtp53由第二军医大学朱明华教授惠赠,增强型绿色荧光蛋白报告质粒pEGFP-N2和pEGFP-C1由本室保存,对照反转录病毒质粒pLHCX-CMV-EGFP前期构建完成;端粒酶阳性人大肠癌细胞SW620、HT-29,人宫颈癌细胞Hela,人肺癌细胞A549和端粒酶阴性人胚肺成纤维细胞MRC-5由本室保存.②实验方法:利用定向克隆的方法分别构建由hTERT启动子驱动EGFP的质粒pLHCX-hTERT-EGFP和驱动wtp53表达的质粒pLHCX-hTERT-wtp53.以质粒pLHCX-hTERT-EGFP和课题组前期构建的质粒pLHCX-CMV-EGFP转染端粒酶阳性的人大肠癌细胞株SW620和HT-29、人宫颈癌细胞株Hela和人肺癌细胞株A549以及端粒酶阴性的正常人肺胚成纤维细胞MRC-5.③实验评估:通过流式细胞仪测定分析转染效率,证实pLHCX-hTERT-EGFP在不同细胞中的表达特异性.运用RT-PCR和Western Blot分别检测p53 mRNA和p53蛋白在p53突变的大肠癌细胞株SW620中表达.利用MTT检测质粒pLHCX-hTERT-wtp53对不同细胞的增殖抑制情况和流式细胞术检测不同细胞的凋亡情况.结果:①通过酶切证实重组质粒pLHCX-hTERT-EGFP和pLHCX-hTERT-wtp53构建成功,并通过将pLHCX-hTERT-EGFP转染SW620细胞观察到绿色荧光蛋白的表达,测序证实构建质粒中包含完整的wtp53片段.②流式细胞术检测结果证实质粒pLHCX-hTERT-EGFP处理后端粒酶阳性的SW620、Hela和A549内增强型绿色荧光蛋白表达强度明显强于端粒酶阴性的MRC-5(P < 0.05),而pLHCX-CMV-EGFP在端粒阳性和阴性的上述细胞中表达无明显差异(P > 0.05).③RT-PCR和Western Blot分别证实了p53mRNA和p53蛋白表达.④MTT检测到重组质粒对端粒酶阳性的大肠癌细胞有明显的增殖抑制作用,而对端粒酶阴性的MRC-5细胞生长无明显影响(P < 0.05).⑤流式细胞检测观察到重组质粒引起端粒酶阳性的大肠癌细胞凋亡要明显强于端粒酶阴性的MRC-5细胞(P < 0.05).结论:构建的反转录病毒载体质粒pLHCX-hTERT-EGFP在端粒酶阳性的肿瘤细胞中特异性表达;重组反转录病毒载体质粒pLHCX-hTERT-wtp53转染后对端粒酶阳性的大肠癌细胞有特异性的影响作用.     

Rock2对细胞周期检查点Cdc25A的调节作用

目的: 探讨肝癌细胞中Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)对细胞周期检查点细胞分裂周期蛋白25A(Cdc25A)的调节作用。方法: Western blotting 检测51对肝癌及癌旁组织中Rock2与Cdc25A的蛋白表达情况。构建并筛选shRock2干扰质粒,稳定转染到人肝细胞癌Huh-7和HepG2细胞中,Western blotting检测Cdc25A蛋白表达变化;针对Rock2干扰序列,利用PCR定点突变技术进行碱基突变,构建Rock2突变质粒从而"恢复"Rock2表达,分析Cdc25A蛋白表达变化并用MTT法检测肝癌细胞增殖的改变。Western blotting检测Rock2稳定低表达的肝癌细胞中检查点激酶1(Chk1)和检查点激酶2(Chk2)蛋白的变化,免疫共沉淀及免疫荧光分析Rock2与Cdc25A的相互作用。结果: Rock2与Cdc25A蛋白在肝癌组织中较癌旁组织呈现高表达,而且两者呈正相关。肝癌细胞中稳定低表达Rock2后,Cdc25A蛋白表达明显下降;"恢复"Rock2表达后,Cdc25A蛋白表达增加而且肝癌细胞也出现增殖加快现象。Rock2低表达对Chk1和Chk2蛋白变化无明显影响。免疫共沉淀表明Rock2与Cdc25A直接相互作用,免疫荧光检测表明Rock2与Cdc25A存在共定位。结论: Rock2对细胞周期检查点Cdc25A起直接的正向调控作用,而且不依赖于Chk1/Chk2,可能为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因。     

三维模拟技术在精准肝脏切除中的应用

目的 评价三维模拟技术在精准肝脏切除中的应用价值.方法 自2009年7月至2010年5月,本院对16例手术治疗的原发性肝癌患者,于术前进行了三维模拟成像及模拟手术操作,并对二者切除的肝脏组织在三维径线上的绝对长度进行统计学分析.结果 模拟手术切除的肝脏组织形状及大小与实际手术切除的非常相似,两者肝脏切除边缘长度明显相关,而且没有统计学差异(P＞0.05).模拟手术与实际手术两者切除肝脏在长度、宽度和高度上的差值分别为0.6118 cm、0.4490 cm和0.3199 cm.结论 三维模拟技术可以准确预测目标病灶的切除范围,为精准肝脏切除提供术前指导.     

重症急性胰腺炎合并细菌感染的快速诊断——附17例检测分析

目的:探讨以16S rRNA基因为基础的细菌PCR法诊断重症急性胰腺炎早期合并细菌感染的价值.方法:17例疑有细菌感染的重症急性胰腺炎病人,术前B超引导下行胰周渗液细针穿刺检查,分别行以16S rRNA基因为基础的细菌PCR法检测和细菌培养.比较细菌PCR法检测结果和细菌培养结果.结果:17例中,PCR检测9例阳性,细菌培养10例阳性,该10例病人行手术治疗,术中所取胰周渗液行细菌培养证实为阳性.PCR检测重症急性胰腺炎合并细菌感染的敏感度为90%,特异度为100%.PCR法和细菌培养法分别需时5 h和3 d.结论:以16S rRNA基因为基础的细菌PCR法能快速、准确地诊断重症急性胰腺炎早期合并细菌感染,为手术治疗提供可靠依据.     

原发性肝癌的外科治疗分析(附52例报告)

目的　探讨手术切除原发性肝癌的安全性和疗效。方法　本院近 3年施行手术切除的 5 2例原发性肝癌患者 ,肝功能ChildA 级 ,根据肿瘤大小 ,将其分为大肝癌组 (n =4 2 )及小肝癌组 (n =10 )进行分析。结果　大肝癌组与小肝癌组在手术中失血量、手术时间均有明显差异 (P <0 .0 5 ) ,两组间的手术并发症率、手术死亡率无显著差别 (P>0 .0 5 )。结论　原发性肝癌应积极地进行手术切除。术前仔细地选择病例 ,大肝癌手术切除是安全可行的     

临床原位肝移植九例报告

目的 总结临床肝移植的初期经验。方法 回顾性分析2000年8月至2003年11月我院实施9例原位肝移植的临床资料及随访情况。结果 围手术期发生心跳骤停1例，经抢救成功，并发胆管吻合口狭窄1例，经介入治疗临床症状消失；7例痊愈出院；死亡2例，1例受体为晚期肝癌，术后肺广泛转移，1例死于腹腔感染，MODS，出院的7例中6例已恢复正常工作及生活，1例出院后合并巨细胞病毒性肝炎，正在治疗。结论 肝移植是治疗终末期肝病的有效手段，移植时机过晚是影响预后的重要原因之一；背驮式供肝植入安全、简便；移植后受体的巨脾症，脾功能亢进可能恢复；拉米呋啶加小剂量HBIg、免疫抑制的个体化应用预防乙肝复发的近期疗效可靠。     

原发性胆管结石手术引流方式的分析及其再认识

目的: 探讨胆管结石手术引流方式随诊断技术和手术技巧的提高所发生的变迁.方法: 收集1986-2007年南昌大学第二附属医院3691例胆管结石患者的临床资料, 并利用中国生物医学文献数据库检索20世纪60-80年代初胆管结石手术引流方式资料. 分析胆管结石手术引流方式-T管引流和胆肠吻合引流的变化趋势, 并分析其产生变化的原因.结果: 20世纪60-80年代初、1986-1996年、1997-2007年这3个时间段胆管结石患者中T管引流和胆肠吻合引流在同期行手术治疗的患者中百分比分别是74.70%和16.90%、35.20%和38.42%、70.30%和10.16%.结论: 近50年我国胆管结石患者手术引流方式经历了胆道探查+T管引流、胆肠吻合与病灶根治+T管引流3个阶段.