小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。     

招生通知

自我概念是指个人心目中对自己的印象。国外很多研究指出自我概念直接或间接地影响心理健康。本文在北京整群抽取12个班(初高中各半)，共有有效被试637人。其中高中生316人，初中生321人。     

山莨菪碱对中性粒细胞糖皮质激素受体的影响

以~3H地塞米松(Dex)为特异性配基,以一点分析法测得大白鼠腹腔中性粒细胞(PMNs)的糖皮质激素受体(GCR)位点数为5270±216/个PMN(n=18,X±SE下同);体外实验,PMNs直接与山莨菪碱(654-23×10~(-5)M)温育,对GCR无明显影响,测得位点数为4896±360/个PMNs(n=20,P>0.4);体内实验表明,给大鼠肌肉注射654-2(10mg/kg)每日两次共二天,则GCR位点数降至2740±101/个PMNs(n=18,P<0.001)。此时还测得血浆皮质酮含量明显增高(P<0.01)。提示654-2对GCR的影响可能与增加皮质激素所致的“降调节”有关。     

小儿肝的年龄解剖学研究

分六个年龄组观察了180个(男98,女82)小儿肝的形态、度量、位置及体表投影.小儿肝相对较大,右叶大于左叶,下界位置较低并逐渐上移.在右锁骨中线的肋弓下一般均可触到.小儿肝重随其年龄(身高)的增长而增长,其增长速度相对较慢,尤以Ⅶ组小儿更明显.     

生物素─链霉亲和素系统在检测巨细胞病毒抗体中的应用

本文用自制ＣＭＶ抗原和生物素－链霉亲和素系统试剂，通过最适条件的对比，建立了检测人血清中抗巨细胞病毒ＩｇＭ、ＩｇＡ类抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ，并与普通ＥＬＩＳＡ作比较，结果表明，ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ的非特异性吸附明显低于普通ＥＬＩＳＡ，与普通ＥＬＩＳＡ相比，抗体效价分别提高５和７倍，阳性率分别提高６８％和１５３．５％。在实际工作中曾用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测临床样品１６５份，就所得结果进行分析。表明ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶＩｇＭ和ＩｇＡ可提高特异性和灵敏度，值得推广应用。     

细胞自噬调控颅内动脉瘤血管平滑肌细胞表型转化的体外研究

目的:探讨流体切应力(SS)对体外大鼠脑血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响及相关自噬调控机制。方法:运用倒置相差显微镜和免疫细胞化学方法对大鼠VSMCs进行鉴定后,并给予15. 28 dyne/cm2流体切应力冲击VSMCs6、12、24 h。为探讨自噬在VSMCs表型转化中作用,于冲击前6 h给予自噬激动剂(Rapa)和抑制剂(3-MA)干预。实验分为control组、SS组、SS+3-MA组和SS+Rapa组。于冲击后6、12、24 h采用Real-time PCR法检测VSMCs收缩表型及合成表型的标志基因的表达水平;免疫细胞化学和免疫印迹法检测自噬标志蛋白LC-3和Beclin-1的定性定量表达。结果:与control组相比,SS组中VSMCs收缩表型标志基因α-SMA及SM-22a的表达显著下调(P0. 05);合成表型标志基因MMP-2和TNF-α的水平显著上调(P0. 05);自噬蛋白LC-3和Beclin-1的表达显著增强(P0. 05);与SS组相比,自噬抑制剂3-MA可显著逆转流体切应力诱导的VSMCs表型转化(P0. 05),与之相反,自噬激动剂Rapa可促进VSMCs的表型转化(P0. 05)。结论:流体切应力可能通过激活细胞自噬诱导体外VSMCs的表型转化,进而参与颅内动脉瘤的发生发展。     

诱变剂敏感性和肿瘤

肿瘤的发生与染色体不稳定性之间的关系是当今肿瘤基础研究的重要课题之一，众多研究显示：两之间存在着密切的关系。ＤＮＡ损伤和／或误配修复能力的缺陷引起基因组的不稳定性，而基因组不稳定性可诱发靶组织染以体上的突为事件。诱变剂敏感性间接反映ＤＮＡ损伤的修复能力，作为肿瘤易感性的独立的生物学指标，近年来已日益受研究工作的重视。本综述诱变剂敏感性与的关系。     

大鼠DCs单抗和雷公藤多甙对大鼠同种异体心肺联合移植排斥反应的影响

采用改良的大鼠同种异体心肺联合移植手术，研究了大鼠树突状细胞（ＤＣｓ）单克隆抗体单独和联合雷公藤多甙片对移植排斥反应的影响，并与生理盐水对照组、雷公藤多甙片（ＴⅡ）组进行比较。结果表明：大鼠ＤＣｓ单抗单独和联合ＴⅡ两治疗组间无明显区别，但两组大鼠移植心脏存活时间明显长于生理盐水组和ＴⅡ组（Ｐ＜００１）；而且病理切片显示以慢性排斥反应改变为主。而生理盐水对照组和ＴⅡ组皆表现为急性排斥反应。提示ＤＣ单抗在治疗移植排斥反应中有实用价值。     

乳酸菌介导巨噬细胞极化作用的研究进展

乳酸菌可以在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗菌物质抑制肠道内有害菌的生长。大量研究表明乳酸菌发挥益生作用的主要机制可能与它的活化和维持机体免疫屏障机制及调节肠道生理屏障功能密切相关。乳酸菌作为益生菌与免疫细胞之间有着不可分割的关系,尤其是巨噬细胞。它通过各种途径与巨噬细胞作用,使巨噬细胞产生细胞因子,并向不同的表型极化,参与模式识别受体包括Toll样受体(TLRs)、Notch、核因子κB(NF-κB)信号通路等,从而降低机体的炎症反应。在这过程中,乳酸菌在机体调节中发挥重要作用。本文主要对乳酸菌介导巨噬细胞产生免疫调节的作用机制进行阐述。     

自血光量子疗法治疗外伤性截瘫的临床应用

本文对自血光量子疗法治疗外伤性截瘫的临床应用进行小结。介绍了仪器准备,病人准备和治疗时应注意的事项及特殊情况的处理对策。本组治疗截瘫63例,总有效率49.2％。经治疗后提高了患者的血氧分压和血氧饱和度,血液流变学,体感诱发电位有改善。对ALQ治疗外伤性截瘫的机理进行了探讨,提出早期治疗是提高疗效的关键。