黄芩苷体外抗流感病毒作用的研究

[目的]通过观察黄芩苷对甲型流感病毒(H1N1)感染人肺癌细胞株(A549细胞株)的作用,探讨其在体外抗甲型流感病毒的作用。[方法]通过细胞病变效应(CPE)观察黄芩苷对病毒致细胞病变作用的影响,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测药物对人肺癌细胞株A549的最大无毒浓度(TC0)和半数中毒浓度(TC50)。检测药物不同给药方式和作用时间的吸光度,比较各组抗病毒有效率,找出黄芩苷最佳抗病毒作用方式。采用Probit回归计算最佳作用方式时其对病毒感染的半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI)。[结果]在7.920~0.495 mg/L范围内的黄芩苷作用24~48 h,对流感病毒所致的细胞病变作用有明显的抑制作用,细胞存活率明显高于病毒感染组。其中,抗病毒生物合成组(Ⅲ)在给药后48 h,其抗病毒有效率最高,浓度为3.960 mg/L组的细胞存活率最高,抗病毒有效率达89.107%。计算该条件下黄芩苷IC50为1.399 mg/L,TI为22.608。[结论]黄芩苷在一定浓度下有抗病毒作用,主要是通过抑制病毒在感染的A459细胞内生物合成而发挥抗病毒作用。     

清热化痰法对AECOPD痰热证大鼠模型病理肺组织的影响

[目的]基于前期研究清热化痰方可以提高青霉素在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)痰热证大鼠模型肺组织中药物浓度基础上,研究清热化痰方是否通过改善AECOPD受损肺组织的形态结构来利于抗生素在肺组织内的转运。[方法]50只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、氨溴索组、二陈汤组、蒌芩止嗽煎组各10只。用熏吸香烟加气管内注射内毒素及鼻腔滴入金黄色葡萄球菌,鼓风干燥箱中进行风热刺激的方法建立大鼠AECOPD痰热证模型,病理组织使用苏木精-伊红(HE)染色,应用图文分析软件(IPP6.0)测量肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)、肺泡腔面积与总面积比(PAA);同时对Weigert染色标本测量弹力纤维的相对面积。[结果]病理结果显示,AECOPD模型组与正常组比较肺组织结构严重受损,炎症细胞增多,说明模型复制成功,蒌芩止嗽煎组与氨溴索组受到破坏相对较轻,二陈汤组次之。MAN及PAA:蒌芩止嗽煎组、氨溴索组、二陈汤组与模型组相比较差异有统计学意义。Weigert染色显示,肺泡壁弹力纤维,其中以蒌芩止嗽煎组弹力纤维含量最高,以模型组受破坏最严重,其顺序从高到低依次为蒌芩止嗽煎组、氨溴索组、正常组、二陈汤组和模型组。[结论]中西医化痰法对AECOPD痰热证大鼠模型受损肺组织结构均有较好的保护作用,以清热化痰法最为明显;清热化痰法提高抗生素的肺内转运作用的机制可能是通过不同程度改善肺组织受损的形态结构,降低受损肺泡结构对抗生素的渗透限制来协助抗生素在肺组织中的正相扩散,协同抗生素发挥作用。     

贯黄感冒颗粒抗甲型流感病毒的作用

目的:观察贯黄感冒颗粒体内、外抗甲型流感病毒的作用。方法:体外观察贯黄感冒颗粒对甲型流感病毒H1N1和H3N2致细胞病变作用的影响,体内观察其对甲型流感病毒FM1感染小鼠的保护作用。结果:贯黄感冒颗粒体外对所试两株病毒所致的细胞病变均显示抑制作用,对H1N1的IC50为1.38mg/mL,TI为5.66;对H3N2的IC50为0.69mg/mL,TI为11.31。体内实验结果显示贯黄感冒颗粒中剂量组可降低甲型流感病毒FM1感染所致小鼠的死亡率,延长平均生存时间。结论:贯黄感冒颗粒体内外均有抗甲型流感病毒的作用。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠模型的建立

目的：建立大鼠COPD急性加重期模型的方法,确定滴注感染细菌的浓度。方法：雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组（每组再分为高、中、低细菌浓度组,空白组）。进行一般体征的观察,基础体温的测定,感染前后血清中白细胞总数测定,肺组织病理形态的观察。结果：从对照组及COPD模型组的基础体温测定看,高浓度细菌组的基础体温高于中、低浓度组及空白组。对照组：高浓度细菌组的白细胞计数均高于对照组中、低浓度组及空白组（t=-4.012,P〈0.05;t=-3.939,P〈0.05;t=-6.52,P〈0.01）;模型组：低、中、高浓度组WBC计数高于空白组（t=-4.517,P〈0.05;t=-10.32,P〈0.01;t=-7.094,P〈0.01）;高、中浓度组WBC计数高于低浓度组（t=-4.32,P〈0.05;t=-3.86,P〈0.05）。并且无论是对照组还是模型组,高浓度细菌组感染后白细胞计数明显高于感染前白细胞计数（t=-14.319,t=-7.06,P〈0.01）。从病理学角度看,对照组的高浓度细菌组的肺组织病理学改变符合人类肺炎的病理表现,COPD模型组的高浓度细菌组的肺组织病理学改变符合人类COPD合并肺炎的病理表现。结论：用熏吸香烟加气管内注射内毒素及鼻腔反复高浓度滴入金黄色葡萄菌（细菌浓度为2.4×109cfu/mL）的方法可建立大鼠AECOPD模型,可用于实验研究。     

姜良铎论治消渴病患者外感病的经验

姜良铎教授认为外感病的发生发展与内伤存在与否关系密切。无内伤时，外感病呈典型过程，与体质类型有关；有内伤时则呈非典型过程，个体差异显著。消渴病患者因其疾病特点所致，表现出对外感病的易患性，且临床经过不同于其他外感病的普遍规律而有一定的特殊性。     

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠IFN-γ及IL-4水平的影响

目的研究桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。方法采用牛Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型(Collagen-induced arthritis,CIA),灌胃给药21 d后观察大鼠体重变化、足肿胀度;采用ELISA法测定大鼠滑膜和血清中的白细胞介素4(IL-4)水平,小鼠巨噬细胞NO2-释放法测定大鼠滑膜和血清中干扰素γ(IFN-γ)活性。结果桂枝芍药知母汤能改善CIA大鼠体重变化,降低原发性和继发性足肿胀度,下调CIA大鼠滑膜和血清IFN-γ、IL-4水平。结论CIA大鼠滑膜中IFN-γ、IL-4水平均升高,血清中以IFN-γ升高为主。桂枝芍药知母汤抗风湿作用,可能通过下调CIA大鼠滑膜和血清IFN-γ、IL-4水平,从而调节Th1/Th2平衡。     

中药化痰法对青霉素在慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠肺组织中转运能力的影响

目的研究中药化痰法能否提高青霉素在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠模型肺组织中的转运能力。方法用熏吸香烟加气管内注射内毒素及鼻腔滴入金黄色葡萄球菌的方法建立大鼠AECOPD模型,80只Wistar雄性大鼠随机分为模型对照组、氨溴索组、清热化痰方组、肺康冲剂组,每组20只。用高效液相色谱-质谱法检测各组大鼠不同时段生物标本中青霉素的浓度。结果 15 min血及肺组织中青霉素浓度比较:分别与模型对照组、肺康冲剂组比较,氨溴索组和清热化痰方组浓度均增高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。30 min血中青霉素浓度比较:与肺康冲剂组比较,清热化痰方组浓度增高,差异有统计学意义(P<0.01)。30 min肺组织中青霉素浓度比较:与模型对照组比较,肺康冲剂组浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05),清热化痰方组浓度增高,差异有统计学意义(P<0.05);与肺康冲剂组比较,清热化痰方组浓度增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论氨溴索与清热化痰方均能提高青霉素在AECOPD大鼠模型肺组织中的药物浓度,即能增强其在肺组织中的转运能力,为临床选择中药作为AECOPD抗生素治疗的辅助用药提供了实验依据。     

痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用

目的研究痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠的保护作用。方法观察痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用,以及肺指数和肺组织病理形态学变化,同时检测肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度。结果痰热清注射液治疗组对流感病毒FM1感染小鼠具有明显的保护作用,死亡保护率与模型组小鼠比较,差异显著(P<0.05);肺组织病理形态学观察发现,痰热清注射液治疗组肺部炎症反应较模型组有显著改善。另外,痰热清注射液对肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度具有明显的抑制作用。结论痰热清注射液(4mL/kg)对流感病毒FM1感染小鼠具有明显的保护作用。这种保护作用与痰热清注射液在体内抑制流感病毒增殖、减轻肺部炎症反应有关。     

绝经期泌尿系感染动物模型初探

目的建立绝经期泌尿系感染动物模型。方法对小鼠进行去势和尿路感染处理,通过阴道细胞学涂片、阴道细胞角化指数、小鼠血清E2水平和去势小鼠膀胱细菌培养和膀胱病理分级对尿路感染结果进行评价。结果去势感染组和去势非感染组小鼠去势后5 d内阴道涂片全部出现并维持间情期表现,而假手术感染组和假手术非感染组小鼠术后5 d内阴道涂片则维持周期性变化;去势小鼠阴道脱落细胞角化指数表明,去势感染组和去势非感染组小鼠去势后比假手术感染组和假手术非感染组小鼠阴道脱落细胞角化指数明显减低;小鼠血清E2水平变化,去势感染组和去势非感染组小鼠去势后比假手术感染组和假手术非感染组明显减低(P<0.01);去势感染组和假手术感染组小鼠感染处理后膀胱尿培养及病理切片结果表明全部感染,而去势非感染组和假手术非感染组小鼠膀胱尿培养及病理切片结果则均为阴性。结论小鼠去势后进行膀胱感染,初步达到了绝经期泌尿系感染的动物模型程度。