外周血NF-κB基因表达水平对肝癌诊断的临床价值研究

目的：定量分析外周血单核细胞中核转录因子（NF-κB）的表达水平,以探讨对肝癌（HCC）诊断和预后价值。方法：从不同肝病患者及正常对照组外周血单个核细胞中制备总RNA,以实时定量PCR分析NF-κB/p65 mRNA拷贝数,并经DNA序列分析证实,比较不同肝病组间NF-κB基因的表达水平,分析其临床价值。结果：以实时定量PCR法成功分析了外周血中NF-κB/p65 mRNA的表达水平,所扩增的基因片段,经DNA序列分析证实,与已知人NF-κB基因的源序列完全一致;外周血NF-κB/p65 mRNA拷贝数,肝癌组明显高于肝硬化、慢性肝炎及正常对照组;肝癌术后血中NF-κB/p65 mRNA表达明显下降,肝癌复发者NF-κB表达又明显升高。结论：肝癌患者外周血中NF-κB基因过表达,分析血NF-κB mRNA拷贝数有助于肝癌诊断及预后判断。     

人肝癌组织及外周血VEGF表达水平定量分析的临床价值

目的:定量分析肝癌(HCC)组织及血中血管内皮生长因子(VEGF)表达,并探讨其临床意义.方法:按自身配对法收集人肝癌的癌灶、癌旁及远癌组织各36份;并收集肝癌、慢性肝炎、肝硬化患者和正常对照的外周血标本181份.以免疫组化法分析肝癌组织中VEGF表达、胞内分布和临床病理学特征,并以酶联免疫吸附法对肝癌组织和血VEGF浓度进行定量分析.结果:VEGF阳性表达呈棕黄色或棕褐色,分布于肝癌细胞胞浆中;肝癌组织、HCC无包膜者和HCC伴远处转移者VEGF阳性率分别为63.9%、78.3%和90.9%,不同直径HCC间及不同分化程度HCC间VEGF阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);肝癌组织VEGF比浓度(ng/g肝)明显高于癌旁和远癌组织(P<0.01).血VEGF如以>280 ng/L为界,肝癌、慢性肝炎、肝硬化患者及正常对照组的阳性率分别为88.4%、14.3%、10.0%和0;血VEGF与AFP联检对肝癌的诊断阳性率为94.2%.结论:VEGF是反映肝癌侵袭生长及转移的有效指标.     

肝癌及癌旁组织IGF-Ⅰ受体表达及临床病理学特征

目的:观察肝癌及其癌旁组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)的表达及其临床病理学特征。方法:采用免疫组织化学方法,分别检测30例肝癌癌灶组及其自身对照的癌周组织中IGF-ⅠR的表达,并分析与其临床病理学特征及IGF-Ⅱ表达的关系。结果:肝癌IGF-ⅠR均呈较高表达,在肝癌癌灶为80.0%(24/30)及癌周组织表达43.3%(13/30),差异有统计学意义(2χ=8.53,P<0.01)。肝癌癌灶组中IGF-ⅠR阳性表达与肿瘤分化程度显著相关(P<0.05),而与肿瘤数目、大小、HBsAg阳性等无明显相关(P>0.05)。中、低分化程度肝癌组织中IGF-ⅠR表达率显著高于高分化组肝癌(P<0.05),且与IGF-Ⅱ表达具有正相关关系。结论:IGF-ⅠR在肝癌中过度表达,且与肝癌的形成和发展有关。     

大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶的表达及动态改变

目的:探讨大鼠急性脊髓损伤后不同时段髓内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态表达。方法:36只SD大鼠抽签法随机分组,任选一组作为对照。采用Allen法制作急性脊髓损伤模型,在损伤后2,6,12,24,48h等时段,以反转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)分析iNOSmRNA表达。在脊髓损伤后24h,用免疫组化方法分析iNOS在脊髓不同类型神经细胞中的表达与分布,并以比色法测定脊髓损伤后血清NOS及一氧化氮的含量。结果:脊髓损伤后,神经元、星形细胞和小胶质中均可见iNOS表达,以神经元表达为主。脊髓损伤后2h可见iNOS表达0.56±0.02,24h达高峰1.20±0.05,48h开始降低0.70±0.06。血清中NOS及一氧化氮的动态改变与损伤组织iNOSmRNA变化趋势相一致。结论:研究资料提示脊髓损伤后脊髓内iNOS表达增高,过量产生的一氧化氮加重了继发性脊髓损伤。     

外周血cTnI-mRNA监测病毒性心肌损伤价值的实验研究

目的　研究外周血心肌型肌钙蛋白 (cTnI) mRNA分析在监测病毒性心肌损伤发生发展和预后中的价值。方法　于BALB/c小鼠腹腔接种 1× 10 9TCID5 0柯萨奇病毒B3(CVB3)液诱发心肌损伤发生 ,分别在CVB3感染后第 3、6、9、12、15、18和 2 1天采集外周血后处死小鼠 ,留取鼠心脏作病理组织学检查 ,并以逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)分析心肌及外周血中cTnI基因的表达状态。结果　CBV3感染后 ,鼠心肌及循环血cTnI mRNA表达上调 ,与心肌细胞发生肿胀、炎性细胞浸润、核固缩及碎裂、变性、坏死、钙化等组织学改变相关。cTnI mRNA基因扩增 ,心肌组织全数阳性 ;外周血阳性率在对照组及感染后的第 3、6、9、12、15、18和 2 1天分别为 0 %、0 %、0 %、16 7%、4 0 %、71 4 %、83 3%和87 5 %。结论　病毒性心肌损伤时cTnI mRNA上调表达 ,循环血cTnI mRNA为监测心肌损伤发生发展及预后的灵敏基因标志物     

肝细胞恶性转化过程中胰岛素样生长因子-I受体的动态表达与改变

目的观察肝细胞恶性转化过程中胰岛素样生长因子-I受体（IGF-IR）的动态表达与改变特征。方法以2-乙酰氨基芴（2-FAA）喂饲雄性SD大鼠诱发肝癌发生,分别观察肝细胞形态学、肝及血IGF-1R的动态变化。以免疫组化法观察肝组织IGF-1R表达,以RT-PCR扩增IGF-1R mRNA表达片段并经测序证实,从基因转录和蛋白水平上分析与肝细胞恶性转化的相互关系。结果诱癌过程中肝细胞出现颗粒样变性、癌前病变到肝癌形成的动态变化,伴肝核酸代谢旺盛,肝IGF-IR表达异常;肝IGF-IR阳性率（%）、肝IGF-IR mRNA阳性率（%）、肝IGF-IR比浓度（ng/mg肝组织）和血IGF-IR（ng/ml）分别为：对照组0、0、0.63±0.17和1.33±0.47;变性组50、61.1、0.65±0.2和1.51±0.46;癌前组88.9、100、0.66±0.14和1.92±0.29;癌变组100、100、0.96±0.09和2.43±0.57。IGF-IR在转录或蛋白水平上呈梯度表达,癌变组显著高于其他组（P〈0.01）,且肝和血IGF-IR呈显著正相关（r=0.91,t=14.222,P〈0.001）。结论 IGF-1R过表达参与肝细胞癌变,是肝细胞恶性转化的早期标志。     

人肝癌组织中总RNA浓度和GGT异常表达关系的研究

为探讨γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）在肝癌发生过程中表达及其变化。以病理组织学和生物化学方法,将自身配对的肝癌,癌旁组织和远癌组织中总ＲＮＡ纯化,对总ＧＧＴ比活性和不同分子形式ＧＧＴ的表达改变进行了研究,结果显示,在２４例肝癌,癌旁和远癌组织中;（１）癌灶→癌旁→远癌组织中,总ＲＮＡ浓度呈逐步升高趋势,组织间的差异显著;（２）总ＧＧＴ可溶性和膜结合性ＧＧＴ比活性,癌组织较癌周和远癌组织明显升高（Ｐ〈０     

慢性肝炎、肝硬变及原发性肝癌患者血清MMP-13及TNF-α的表达

目的 研究基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在慢性肝炎、肝硬变及原发性肝癌患者血清中的表达水平。同时检测患者血清中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）,以了解其与MMP-13之间的关系。方法 采用双抗体夹芯酶联免疫吸附法对13例慢性肝炎（慢性肝炎组）、28例肝硬变失代偿（肝硬变组）及22例肝功能失代偿的原发性肝癌（原发性肝痛组）进行MMP-13、TNF-α检测,并分别与20例健康对照组进行比较。结果 肝硬变及原发性肝癌组的血清MMP-13与TNF-α比对照组及慢性肝炎组均显著增高（P〈0．01）。血清中TNF-α水平与MMP-13水平在原发性肝癌患者中呈显著相关性（P〈0．01）,时慢性肝炎及肝硬变患者的TNF-α与MMP-13水平无明显相关性。结论MMP-13在肝纤维化形成过程及肝癌细胞的浸润和转移可能起着一定的作用。TNF-α对MMP-13表达在慢性肝炎与肝硬变患者中影响甚小,而在原发性肝癌,TNF-α可能对MMP-13的表达具有调节作用。     

肝细胞癌变过程中缺氧诱导因子-1α的动态表达与改变特征

背景与目的:观察肝细胞癌变过程中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的动态改变及其与病理学特征的关系.材料与方法:以含0.05% 2-乙酰氨基芴(2-FAA)颗粒饲料连续喂饲雄性SD大鼠12周诱发肝细胞癌变,同时设正常对照组普通颗粒饲料喂饲,采用HE染色观察肝细胞形态学改变,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝细胞及外周血中HIF-1α的动态变化,并以免疫组织化学法检测肝组织HIF-1α的表达及胞内定位.结果:SD大鼠在喂饲2-FAA后,肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生及肝细胞癌(HCC)的变化;HIF-1α随着上述病理组织学的改变依次呈梯度增高表达,表现为肝癌组明显高于对照组和变性组(P＜0.05);HIF-1α在肝细胞内呈强阳性表达;外周血与肝组织中的mF-1α动态改变呈正相关关系(r=0.474,P＜0.05).结论:HIF-1α参与肝细胞的癌变过程,其表达增加有助于肝癌早期诊断及预后判断.     

肝细胞癌变过程中维生素E水平改变及其作用机制研究

目的 探讨维生素Ｅ（Ｖｉｔ Ｅ）水平在肝细胞癌变过程中的改变与作用机制。方法 用２－ＦＡＡ制备大鼠肝癌动物模型,在肝细胞癌变过程中观察其肝组织学、肝总ＲＮＡ水平及血浃ＶｉｔＥ含量的动态改变,并对不同肝病患者血清中ＶｉｔＥ的浓度进行了分析。结果 在肝细胞癌变过程中,鼠血清中ＶｉｔＥ含量呈逐渐降低,而鼠肝总ＲＮＡ水平逐渐增加趋势;在急性肝炎、慢性肝炎、肝硬变和肝癌患者血清中ＶｉｔＥ含量均显著低于正常对