改良琼脂糖电泳法分离碱性磷酸酶同工酶及其在肺病诊断中的应用

目的：探讨碱性磷酸酶（ALP）同工酶在肺病诊断中的应用,方法：用改良改良琼脂糖电泳法对正常体检者和145例肺病患者血清中的ALP同工酶进行分离和定量分析。结果：发现在肺癌肝转移患者血清中存在胆汁型ALP同工酶,它对肺癌肝转移的诊断灵敏度为89．5％,诊断特异性为94．1％,阳性结果的预示值为97．1％,阴性结果预示值为805,实验总有效率为90．9％,结论胆汁型ALP同工酶可作为肺病诊断的辅助指标。     

复方甘草酸苷对慢性乙型肝炎患者IL-17、IL-6、TGF-β、MMP-2表达的影响

目的研究慢性乙型肝炎患者白细胞介素(IL)-17、IL-6、转化生长因子(TGF)-β、基质金属蛋白酶(MMP)-2表达水平,分析这些指标与疾病严重程度的关系,以及复方甘草酸苷对慢性乙型肝炎患者血清IL-17、IL-6、TGF-β、MMP-2表达的影响。方法测定慢性乙型肝炎患者(55例)及健康对照者(20例)IL-17、IL-6、TGF-β、MMP-2的表达水平,分析以上细胞因子与疾病严重程度的关系;测定加用复方甘草酸苷治疗的慢性乙型肝炎患者(治疗组)及采用常规治疗的慢性乙型肝炎患者(对照组)治疗前后肝功能指标的变化及IL-17、IL-6、TGF-β、MMP-2表达水平。结果慢性乙型肝炎患者血清IL-17、IL-6、MMP-2、TGF-β水平均高于健康对照者(P<0.05),且随着疾病严重程度的增加,IL-17、IL-6、MMP-2、TGF-β水平升高(P<0.05);IL-17、IL-6、TGF-β、MMP-2表达水平与疾病严重程度呈正相关(P<0.05)。治疗2周后,治疗组患者ALT、TBIL降低程度大于对照组(P<0.05),IL-17、IL-6、TGF-β水平降低程度也均大于对照组(P<0.05)。结论IL-17、IL-6、MMP-2、TGF-β参与了慢性乙型肝炎的发生、发展,复方甘草酸苷可能通过降低患者血清IL-17、IL-6、TGF-β水平参与免疫调节,发挥抗炎、保肝作用。     

高分辨熔解曲线法检测骨髓增殖性肿瘤患者 JAK2V617F 基因突变简

本研究探讨高分辨率熔解曲线（High resolution melting,HRM）法检测骨髓增殖性肿瘤（MPN）患者JAK2V617F基因突变的可行性.随机抽取29份2008年1月至2011年1月确诊为MPN患者的骨髓标本,应用HRM法检测JAK2V617F基因突变情况,并与等位基因特异性聚合酶链反应（AS-PCR）和测序法的检测结果比较分析.结果表明,经HRM法检测,在29份MPN患者骨髓标本中检出JAK2 V617F突变阳性11例,突变率为37.9％;与基因测序法比较,结果完全一致,符合率100％.而AS-PCR法与测序法比较,Kappa=0.179,P=0.316,一致性强度较差.结论：HRM方法具有简便、快速、特异性高等优点,可作为临床JAK2V617F基因突变的优选方法.     

CHB患者血清HBeAg水平与肝脏炎症活动度及纤维化分级的关系研究

目的 研究和分析慢性乙型肝炎（CHB）患者血清乙型肝炎e抗原（HBeAg）水平与肝脏炎症活动度及纤维化分级的关系。方法 选取300例CHB患者作为研究对象,对其肝组织炎症活动度和纤维化分级、外周血HBV DNA水平和HBeAg水平、肝功能指标进行检测和分析。结果 炎症活动度为G4的患者血清HBeAg水平显著低于炎症活动度为G3、G2或G0-G1的患者,炎症活动度为G3的患者血清HBeAg水平显著低于炎症活动度为G2或G0-G1的患者（P〈0.05）;随着纤维化分级的升高,患者的血清HBeAg水平逐级降低（P〈0.05）;随着血清HBeAg水平的下降,患者的年龄逐渐上升,HBV DNA表达量逐渐下降,高HBeAg组和中HBeAg组患者的ALT水平高于低HBeAg组或HBeAg阴性组,低HBeAg组患者的ALT水平高于HBeAg阴性组,HBeAg阴性组的AST水平显著低于其他3组（P〈0.05）;随着血清HBeAg水平的下降,肝脏炎症活动度呈上升趋势（P〈0.05）,肝脏纤维化分级呈上升趋势（P〈0.05）。结论 CHB患者体内血清HBeAg水平的下降可提示HBV复制水平的降低和肝功能指标的好转。     

建立人急性粒细胞白血病M_2裸鼠模型

背景:人实体瘤细胞容易在小鼠体内成瘤,但人荷瘤白血病模型很难构建.通过放射线或环磷酰胺抑制裸鼠免疫系统预处理,可构建低成本、高稳定性的裸鼠模型.目的:探讨融合基因AML/ETO阳性的人急性粒细胞白血病M2白血病细胞Kasumi-1在BALB/c裸鼠体内建立白血病模型的方法.方法:将BALB/c裸鼠以抽签法随机分3组:环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺连续2 d后,尾静脉注射Kasumi-1细胞8×10~5/只;照射组给予X射线全身照射,照射当天尾静脉注射Kasumi-1细胞;无预处理组未作任何处理,尾静脉注射Kasumi-1白血病细胞.另取3只正常BALB/c裸鼠作为正常对照.检测外周血涂片、骨髓涂片,流式细胞仪检测骨髓细胞免疫分型,RT- PCR 检测白血病细胞瘤负荷,FISH检测骨髓细胞AML/ETO融合基因阳性细胞百分比.结果与结论:未经任何预处理裸鼠建模14 d血涂片中白血病细胞达3.5%,骨髓中肿瘤细胞百分比可达40%以上,与FISH和流式细胞仪检测白血病细胞比例一致,且随着接种时间延长,瘤负荷不断增加.全身照射和环磷酰胺注射后的裸鼠瘤负荷高于无预处理组,但仍可带瘤生存60 d.正常裸鼠外周血单个核细胞RT-PCR未发现有融和基因AML/ETO,其他3组均可见融和基因AML/ETO的mRNA表达.提示给予环磷酰胺组和X线照射预处理或单纯尾静脉接种Kasimi-1细胞均可建立急性粒细胞白血病M2裸鼠模型.     

单倍体相合造血干细胞移植治疗髓母细胞瘤1例

背景:目前部分国外报道显示,自体及全相合造血干细胞移植联合化疗用于转移髓母细胞瘤有一定疗效,可延长患者生存期.但尚未见HLA单倍体相合移植治疗髓母细胞瘤的报道.目的:首次报道应用单倍体相合造血干细胞移植治疗髓母细胞瘤.方法:对晚期骨转移的髓母细胞瘤患儿进行连续6次无关供者淋巴细胞输注联合低剂量化疗, 3次单倍体相合骨髓移植治疗.结果与结论:造血干细胞移植后患儿出现皮疹, 伴发热, 腹泻, 为黄褐色水样便, 考虑为移植物抗宿主病, 以甲强龙冲击治疗并用丙种球蛋白增强免疫力, 吗替麦考酚酯、他克莫司抗排斥及口服激素、抗CD25单抗、抗肿瘤坏死因子, 并纠酸、维持水电平衡、支持营养等治疗好转出院, 后因颅内复发死亡.异基因淋巴细胞输注可杀伤肿瘤细胞, 改善患者生存质量, 但对于高肿瘤负荷的患者, 效果有限, 如考虑进行异基因干细胞移植, 应注意免疫抑制剂(如CD25单抗和肿瘤坏死因子a抑制剂)的及时应用.     

乙肝患者血清HBsAg与HBsAb双阳性的特殊模式分析

目的报告乙肝表面抗原（HBsAg）与表面抗体（HBsAb）双阳性患者血清中这2种标志物波动情况及S区编码碱基序列变异特点。方法收集本院2005年7月收治的2例患者血清标本（经酶联免疫吸附试验定量检测HBsAg与HBsAb均阳性）并随访2月;PCR法扩增血清中HBV的S基因并测序。结果1例患者初始血清HBsAg与HBsAb分别为0.11IU/ml、18.44mIU/ml,2月后HBsAg消失;另1例患者初始血清HBsAg与HBsAb分别为24.09IU/Ml、840.06mIU/Ml,2月后HBsAb不能检出。在二者初始血清中扩增出完整HBV的S基因片段,序列分析显示为基因型D和血清亚型ayw,共同抗原决定簇α的aa145位甘氨酸编码序列未发生缺失或突变。结论2例HBsAg与HBsAb双阳性患者血清中仍存在HBV,其抗原决定簇α区未发生因aa145位甘氨酸突变导致的免疫原性改变。     

HLA半相合造血干细胞移植术后免疫性血小板减少性紫癜一例

患者 ,女性 ,14岁 ,2 0 0 1年因月经血量多 ,淋漓不尽 ,查血常规 :Hb 5 3.8g/L ,WBC 2 .5× 10 9/L ,BPC 5 .6× 10 9/L ,经骨髓穿刺及活检确诊为急性再生障碍性贫血。经过大剂量糖皮质激素、环孢菌素A (CsA)、G CSF治疗无效。于2 0 0 1年 9月在我科行HLA半相合异基因外周血造血干细胞移植 (allo HSCT)术 (供者为其母亲 ,HLA B位点不合 ,供者血型为O型 ,受者血型为A型 )。预处理方案为FBC[1] 抗胸腺细胞球蛋白 (ATG) ,CsA 甲氨蝶呤 霉酚酸酯预防移植物抗宿主病 (GVHD) ,移植后 14天 ( 14天 )BPC为12 2× 10 9/L ,WBC…     

皮肤药动学研究进展

 目的 介绍皮肤药动学研究进展。 方法 检索国内外相关资料,总结皮肤药动学研究的主要技术及各自的优缺点,重点介绍胶条剥离技术在皮肤药动学研究中的应用。 结果 在众多皮肤药动学研究方法中,侵入性较小的胶条剥离技术和微量渗析技术备受人们关注,具有很好的前景,但目前仍旧有很多已被认识的问题难以克服。 结论 建立有效的局部皮肤取材方法是皮肤药动学研究得以顺利开展的关键。