骨髓间充质干细胞体外诱导分化为平滑肌细胞的实验

目的：探讨新西兰兔骨髓间充质干细胞在体外不同条件下定向分化为阴茎海绵体平滑肌细胞的可行性。方法：实验于2004-10／2005-05在中山大学第二附属医院实验中心完成。采用全骨髓贴壁法分离骨髓间充质干细胞；分别通过添加血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子进行体外直接诱导以及与阴茎海绵体平滑肌细胞不同比例（根据骨髓间充质干细胞与阴茎海绵体平滑肌细胞数量比，共培养诱导分为4：1组、2：1组以及1：1组。每6孔作为1个诱导组，每孔兔骨髓间充质干细胞终浓度为1&;#215;10^8L^-1，阴茎海绵体平滑肌细胞相应终浓度分别为0.25&;#215;10^8L^-1、0．5&;#215;10^8L^-1及1&;#215;10^8L^-1）进行共培养两种方法诱导干细胞分化为阴茎海绵体平滑肌细胞。培养2d后的细胞爬片进行荧光免疫细胞化学染色测定抗α平滑肌肌动蛋白抗体表达，全程避光进行。完成染色后，立即进行激光共聚焦显微镜镜检。每孔爬片随机取5个视野，计算出每孔中Hoechst33342与FITC（或Cy3）双阳性细胞数及Hoechst33342单阳性的细胞数的比值以计算每孔的诱导率，应用SPSS软件进行完全随机设计的方差分析。结果：①阴茎海绵体平滑肌细胞的生长特性、形态及鉴定：组织块贴壁后细胞渐游出，呈梭形或长条形，原代细胞汇合90％约需16～19d，传代后生长加快，90％汇合时1：2传代后约3d可再次传代。细胞融合时呈现典型的“峰-谷”样形态。传至10代之后细胞生长放缓，胞体渐变宽大，胞内颗粒增多。荧光免疫细胞化学检测特异性抗α平滑肌肌动蛋白抗体见绝大部分细胞呈阳性。②直接诱导以及共培养诱导的初步分析结果：骨髓间充质干细胞之细胞核标记良好，诱导后见胞浆表达多量抗α平滑肌肌动蛋白抗体，与阳性对照组相似；高倍镜下可清晰见平滑肌肌动蛋白肌丝，而阴性对照组只有核显色，无抗α平滑肌肌动蛋白抗体表达。③不同组别诱导率方差分析S-N-K检验得各组总体均数差异性检验的（F=44．83l，P〈0．05），表明统计学上有显著性差异；共培养1：1组效率最高，依次是共培养2：1组、共培养4：1组，血管内皮生长因子组、血管内皮生长因子＋碱性成纤维细胞生长因子组最低，后两者间诱导效果在统计学上无差别。结论：骨髓间充质干细胞可通过添加生长因子和共培养的方法诱导分化为阴茎海绵体平滑肌细胞，其中以共培养的方法效率较高。     

中药对类风湿性关节炎相关细胞因子影响的研究概况

随着对类风湿关节炎(RA)的病因及发病机制的深入研究,发现细胞因子在RA发病过程中起重要作用;本文概述了中药单味药和复方药对RA相关细胞因子影响的研究进展.     

冠脉内注射比伐芦定对急性ST段抬高型心肌梗死直接PCI术中冠脉血流及临床事件影响

目的探讨在直接经皮冠状动脉介入(PPCI)术中,冠脉内注射比伐芦定对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者罪犯冠脉血流恢复情况,以及术后30 d内临床事件的影响。方法本研究为前瞻性、随机对照探索性临床研究,选择2015年7月至2015年12月收治的拟行PPCI的急性STEMI患者84例,将患者随机分为对照组(n=40)和比伐芦定组(n=44)。经冠状动脉插入指引导丝或小直径球囊导管预扩张,使冠状动脉恢复前向血流≥TIMI 1级后,对照组不予冠脉内注射比伐芦定,正常进行PPCI常规操作;比伐芦定组经指引导管或微导管一次性冠脉内推注50%静脉负荷剂量的比伐芦定,此后按照PPCI常规正常操作。主要观察终点为PPCI术终靶血管校正的TIMI血流帧数(CTFC);次要观察终点为患者30 d内不良心脑血管事件(MACCE)发生率(包括死亡、再次心肌梗死、靶血管血运重建、脑卒中)、支架内血栓及出血学术研究会(BARC)定义的出血事件。结果两组患者靶血管PPCI术后,最终CTFC比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组术后30 d内,MACCE事件发生率、支架内血栓及出血事件发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论比伐芦定组与对照组比较,在改善冠脉血流方面无显著作用;冠脉内应用比伐芦定对术后30 d的临床缺血及出血事件均无明显影响。     

肌源性干细胞分离培养及诱导分化为平滑肌细胞的研究

目的探讨兔肌源性干细胞分离、鉴定及诱导分化为平滑肌细胞的方法。方法取1．5个月龄新西兰兔大腿肌肉，采用Preplate技术分离培养肌源性细胞，并进行流式细胞仪（FCM）、免疫细胞化学、Western blot等确定细胞表型。采用添加血管内皮生长因子（VEGF）和与兔阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSMC）共培养的方法诱导分离而得的细胞分化为平滑肌细胞并运用免疫细胞化学和Western blot检测特异性α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达。结果经过连续6d的差速贴壁分离得小圆形或短梭形的小体积细胞，FCM结果显示这些细胞〉80％为desmin＋，〉70％为bcl-2^＋，〉95％为CD45^-。免疫细胞化学定性结果显示desmin＋。高汇合度（〉50％）或低血清培养时容易融合形成肌管或肌细胞核链。诱导处理后分离的细胞表达α—SMA。结论采用Preplate技术能很好地分离出肌源性干细胞，并能在体外诱导分化为平滑肌细胞，为组织工程提供种子细胞。     

心肌肌钙蛋白T对不稳定型心绞痛患者心脏事件的预测价值(摘要)

本文探讨血清心肌肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）对不稳定型心绞痛患者心脏事件的预测价值。１　资料与方法　　选择了１９９６年３月至１９９８年３月在我院住院治疗的不稳定型心绞痛（ＵＡＰ）患者２０６例,按Ｂｒａｕｎｗａｌｄ分级标准分为３级;入院后０～４小时及１２～２４小时静脉采血各１次,检测血清ｃＴｎＴ浓度;随访时间定为入院后６个月内。血清ｃＴｎＴ的测定方法为酶联免疫吸附一步夹心法。血清ｃＴｎＴ的正常值：≤０．２μｇ／Ｌ。　　统计学处理：数据以ｘ±ｓ表示;两组间均数的比较用ｔ检验;两组间率的比较用四格表χ２检…     

代谢综合征合并冠心病患者血浆P-选择素水平与胰岛素抵抗的关系

目的:探讨代谢综合征(MS)及合并冠心病(CHD)患者空腹血浆P-选择素水平和胰岛素抵抗及MS其他指标的相互关系。方法:用液相蛋白芯片结合流式细胞仪测定单纯MS组(17例)、MS CHD组(40例)和正常对照组(19例)空腹血浆P-选择素水平,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定空腹血浆真胰岛素水平,并收集MS的其他有关数据:腰围、体重指数、空腹血糖和血脂,计算胰岛素敏感指数。结果:①P-选择素在正常对照组(25．1±3．6)μg／L,MS组(33．1±5．1)μg／L,MS CHD组(41．3±8．4)μg/L,3组间差异有显著性意义(F=37．54,P<0．05);②空腹血浆P-选择素水平与胰岛素敏感指数呈负相关(r=-0．460,P< 0．05),与体重指数(r=0．402,P<0．05)、低密度脂蛋白胆固醇(r=0．406,P<0．05)、腰围(r=0．538,P<0．05)、空腹真胰岛素(r=0．478,P<0．05)呈正相关;③以空腹血浆P-选择素水平为应变量的多元逐步回归分析提示,胰岛素敏感指数(r2=0．212)、腰围(r2=0．290)、空腹真胰岛素(r2=0．228)、低密度脂蛋白胆固醇(r2=0．165)、体重指数(r2=0．162)与P-选择素具有相关性(P<0．05)。结论:MS患者的P-选择素水平增加,合并CHD的MS患者更为明显,并与胰岛素抵抗相关,可能在MS发展为CHD中起一定作用。     

IGF-1R、VEGF-C、D2-40的表达及其与子宫内膜腺癌淋巴结转移的关系

目的探讨胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）、血管内皮生长因子C（VEGF-C）、D2-40的表达及其与子宫内膜腺癌淋巴结转移的关系。方法选取40例子宫内膜腺癌作为实验组,14例正常子宫内膜作为对照组,应用免疫组化SP法检测IGF-1R、VEGF-C、D2-40的表达。结果实验组淋巴结转移与IGF-1R的阳性表达无相关性,而与过度表达相关（P〈0.05）;实验组VEGF-C的表达与淋巴结转移情况相关（P〈0.05）。D2-40标记的淋巴管密度在IGF-1R过度表达组织中高于非过度表达组织,VEGF-C阳性表达高于阴性表达,且IGF-1R过度表达和VEGF-C阳性表达在实验组呈正相关。结论 IGF-1R、VEGF-C的表达与子宫内膜腺癌的淋巴结转移有关,对于早期判断淋巴道转移有一定价值,联合检测二者有助于判断预后、指导临床治疗。     

基于超高效液相色谱-质谱联用技术分析尿毒症患者血清代谢物变化

目的通过超高效液相色谱-质谱联用技术(ultra-high performance liquid chromatography-mass spectrometry, UHPLC-MS)分析尿毒症患者血清代谢物变化, 为尿毒症患者的预防和治疗提供一定的理论依据。方法筛选西南医科大学附属医院肾病内科的尿毒症患者和健康体检中心的志愿者, 通过纳入、排除标准, 筛选出尿毒症患者(试验组)和志愿者(对照组)各20例。运用UHPLC-MS检测两组受试者血清中的代谢物, 并进行差异分析, 筛选尿毒症患者的差异代谢物并进行相关性分析和通路富集研究。结果 UHPLC-MS一共鉴定出412种代谢物, 主成分分析(principal components analysis, PCA)结果证明, 这些代谢物能够良好地区分对照组和试验组。按照变量权重值(variable importance for the projection, VIP)>1、变异倍数(fold changes, FC)>1.25或FC<0.8和P<0.05作为显著差异代谢物筛选标准, 最终筛选出28种显著差异代谢物,...     

心电图教学的探索与实践

心电图是医学生必须掌握的基本临床技能,是极其重要的基本课程、桥梁课程。由于心电生理知识的理论性过强,并且非常抽象,以及要求形象思维和逻辑性思维太强,以致学生往往难以理解,望而生畏。在诊断学教学中,心电诊断的讲授向来都是一个难点问题。现根据近年来心电图     

青霉素致呃逆3例

笔者在诊疗活动中,曾遇到3例静脉滴注青霉素后致呃逆的病例,此3例又恰好是祖孙三代,现介绍如下：患者分别为：男,65岁;男,36岁;女,10岁。既往身体健康,无药物过敏史。