氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞因子表达的影响及意义

目的探讨氯沙坦治疗糖尿病肾病的作用及其机制。方法采用单侧肾切除的STZ诱导的糖尿病大鼠，观测其肾脏形态、功能的变化。同时，采用荧光实时定量RT-PCR方法检测TGF—β1、CTGF、PAI-1等细胞因子在糖尿病大鼠肾脏中的表达情况。结果与正常组（NC组）相比，8周时糖尿病肾病组（DN组）大鼠的肾脏肥大指数（KW／BW）、平均肾小球体积（VG）、尿白蛋白排泄率（UAER）、肌酐清除率（Ccr）均升高。DN组肾皮质CTGF、PAI—1、FN表达水平也显着增高（p〈0．05）；与DN组相比较，氯沙坦治疗组的上述指标则均明显下降（p〈0．05）。结论氯沙坦可通遏抑制TGF—β1、CTGF、PAI-1等细胞因子的表达，对糖尿病人鼠肾脏起到保护作用。     

冠状动脉粥样硬化性心脏病患者凝血酶激活的纤溶抑制物及其编码区基因多态性的研究

目的 探讨凝血酶激活的纤溶抑制物(thrombin aetiralable fibrinolysis inhibitor,TAFI)及其编码基因CPB2单核苷酸多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)之间的联系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测210例冠心病患者和190名正常对照者的TAFI基因编码区Thr325Ile、Tnr147Ala多态性分布特点,同时应用发色底物法和ELISA法分别测定TAFI的活性及抗原,并进一步分析基因多态性与TAFI的活性及抗原之间的关系.结果 冠心病组(心肌梗死组及心绞痛组)血浆中TAFI的活性及抗原水平均较对照组显著增高,差异有统计学意义.CPB2基因C1040T(Thr325Ile)及G505A(Thr147Ala)2个位点的3种基因型在冠心病组和对照组的频率分布分别为C1040C(Thr325Thr)67(31.9%)、64(33.6%);C1040T(Thr325Ile)109(51.9%)、92(48.4%);T1040T(Ile325Ile)34(16.2%)、34(17.8%);G505G(Ala147 Ala)75(35.7%)、72(37.8%);G505A(Thr147Ala)112(53.3%)、96(50.5%);A505A(Thr147Thr)23(10.9%)、22(11.7%),经x2检验,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,并且两组之间各种基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05).在冠心病组和对照组Thr325Ile不同的基因型对TAFI活性没有影响;对TAFI抗原含量的影响则以Thr325Thr纯合基因型者血浆TAFI抗原浓度最高,较其他两型差异有统计学意义(P<0.05),Thr325Ile与TIle325Ile型之间则差异无统计学意义(P>0.05).而Tnr147Ala基因多态性与血浆中TAFI活性及抗原水平之间的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 TAFI具有抑制纤溶的作用,可能是冠心病发病的危险因子.TAFI编码区基因Thr325Ile的多态性对血浆中TAFI抗原水平有明显影响,但Thr325Ile、Thr147Ala的多态性与冠心病的发生没有明显的相关性.     

几种生存分析参数模型拟合方法及其应用

目的以神经胶质瘤为例阐述3种生存分析参数模型拟合方法的应用.方法用危险率图、生存率图及数值法三种方法对患者术后生存时间的分布进行拟合,并用C*检验进一步作假设检验.结果神经胶质瘤患者术后生存时间用三种方法拟合后,皆显示患者术后生存时间服从威布尔分布;经检验P＞0.2,亦说明威布尔参数模型可用于患者预后因素的研究.结论临床资料在拟合分析后,应用其特定的参数模型进行生存分析.     

百日咳毒素B-亚单位在诱导小鼠自身免疫性疾病中的作用

目的:探讨百日咳毒素(PT)B-亚单位(PT-B)对小鼠自身免疫性疾病模型视网膜-脉络膜炎(EAU)的发病诱导作用。方法:①应用C57BL/6品系小鼠,以牛视网膜结合蛋白(IRBP)为抗原诱发小鼠视网膜-脉络膜炎;②将以上小鼠分为6组,分别以PT、PT-B(4个剂量)及空白作为免疫佐剂,与IRBP同时注射;③21d后对眼球行病理切片以判断发病情况,同时诱导耳部迟发型变态反应(DTH),并测量耳叶厚度;④取腹股沟及髂窝引流淋巴结,制备T细胞悬液,行T-细胞增殖实验,并取培养液上清,测IFN-γ、IL-12p70蛋白的表达水平;⑤取脾细胞提取mRNA,行RT-PCR测定IL-12p40基因表达水平。结果:PT-B亚单位与全毒素PT一样,可诱导小鼠自身免疫性疾病视网膜-脉络膜炎,并引起相应的免疫应答反应(与空白对照组相比P<0.01)。所用的PT-B不含有内毒素LPS成分的污染。结论:PT-B亚单位是PT作为自身免疫性疾病诱导增强佐剂的主要有效成分。     

变应性鼻炎患者外周血嗜酸粒细胞-骨髓干细胞通路指标检测在激素治疗评价中的意义

目的 检测健康人及变应性鼻炎(AR)患者治疗前后外周血嗜酸粒细胞(eosinophils,EOS)-骨髓干细胞通路相关指标CD34+、白细胞介素5(IL-5)、EOS,探讨外周血-骨髓通路在变应性鼻炎发病机制中的作用以及糖皮质激素对此通路的影响.方法 实验分2组:①试验组:常年性持续性变应性鼻炎患者44例,男24例,女20例,年龄7～68岁;给予糖皮质激素治疗4周;②健康对照组:健康体检者30例.分别检测试验组治疗前后和对照组外周血EOS计数,血清IL-5水平及CD34+细胞数,并分析各指标间的相关性.结果 试验组治疗前血清IL-5含量、CD34+数分别为(88.25±33.47)ng/L、(9.24±2.15)个/105,显著高于治疗后[(44.34±16.32)ng/L、(6.31±1.83)个/103]及健康对照组[(31.24±8.43)ng/L、(3.47±1.32)个/105].试验组治疗前后血清IL-5水平与其CD34+数呈显著正相关(r值分别为0.64、0.61,P值均＜0.01).患者血清IL-5水平与其EOS数呈显著正相关(r=0.64,P＜0.01).结论 外周血EOS、IL-5及CD34+细胞参与AR发病过程,提示AR患者病变局部组织和骨髓造血之间有相关通路存在.通过检测外周血IL-5及CD34+可评价治疗效果.     

扩张性心脏病与HLA-DR基因多态性相关性的研究

目的探讨扩张型心肌病(IDC)与人类白细胞抗原(HLA)DR基因多态性的关系。方法运用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法分别测定102例IDC患者与145例正常人的HLA-DR11、DR12、DR14的基因频率。结果3种基因的阳性率在IDC组明显高于对照组,差异有显著性(30.12%vsl0.35%,45.62%vs11.34%,20.82%vs5.49%,P<0.05,RR分别为2.91,4.02,3.78);同时携带HLA-DR12和DR14的阳性率在IDC组更加显著高于对照组,差异具有显著性(18.49%vs2.96%,P<0.005,RR为6.24=。结论HLA-DR11、DR12、DR14与IDC有明显关联。     

Nrf2在肝纤维化小鼠肝细胞中的核转移

目的:研究肝纤维化小鼠肝细胞中核因子相关因子-2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)核转移情况.方法:实验小鼠随机分为正常对照组(normal control,NC组)、模型组,每组8只.模型组腹腔注射四氯化碳(CCl4)石蜡油溶液建造肝纤维化模型,NC组给予同体积矿物油腹腔注射,共10wk.收集肝脏标本HE染色及Masson染色观察肝脏炎症和纤维化程度;Western blot检测细胞内Nrf2、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase,Nqo1)总蛋白及Nrf2核蛋白表达情况.结果:随CCl4肝损伤时间延长,组织病理学结果显示模型组明显炎症反应及纤维间隔形成;Western blot结果显示,与NC组Nrf2、Nqo1总蛋白及Nrf2核蛋白表达量分别为0.490±0.088、0.430±0.057、0.370±0.022比较,模型组为0.790±0.045、0.720±0.040、0.670±0.044显著增高,差异具有统计学意义(F=2.027、0.772、1.552,P<0.05).结论:肝纤维化小鼠肝细胞中Nrf2核转移增多并上调细胞保护性蛋白Nqo1表达.