基因工程鼠Muc1-MBP融合蛋白的制备及其免疫活性测定

目的:制备鼠Muc1-MBP融合蛋白,探讨其免疫活性.方法:将pMAL-Muc1转化大肠杆菌,通过IFTG诱导、SDS-PAGE和Western blot鉴定Mucl的表达,Amylose resin亲和层析纯化Muc1-MBP.将Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠,采用ELISA方法检测小鼠血清Muc1特异性抗体的水平;MTT法测定小鼠抗Muc1特异的CTL活性;ELISPOT法测定脾脏淋巴细胞IFN-γ的分泌.结果:获得稳定表达Muc1的菌株,制备了分子量67 kD较纯的Muc1-MBP融合蛋白.Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠产生高效价Muc1特异抗体,效价在8 000~16 000之间,Muc1-MBP融合蛋白可诱导CTL杀伤活性,对人乳腺癌MCF-7和小鼠Lewis肺癌LLC1靶细胞的杀伤率分别为(74.5±5.9)%和(60.5±10.4)%,与对照组比P<0.05,差异显著;Mucl.MBP融合蛋白免疫可诱导脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ,特异性活化Th1细胞.结论:成功制备莺组鼠Muc1-MBP融合蛋白,其不仅能诱导特异体液免疫应答,而且可诱导细胞免疫应答,尤其能诱导对人类MCF-7细胞较小鼠lewis肺癌LLC1细胞更加强烈的CTL杀伤活性,提示异种同源蛋白疫苗具有比同源蛋白疫苗更好的抗肿瘤作用.     

强力天麻杜仲胶囊活性成分的提取及其对巨噬细胞的抑制作用

目的: 提取强力天麻杜仲胶囊（QLTM）的活性成分,检测其药物活性及其对巨噬细胞的调节作用。方法: 随机将小鼠分为对照组（生理盐水组）、QLTM胶囊组（阳性药物组）及QLTM活性成分高、中、低剂量提取物组,连续灌胃14 d,通过热板致痛法观察小鼠首次舔后足时间和1 min内的舔后足次数,通过醋酸致痛法观察小鼠首次扭体时间和15 min内的扭体次数,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞活性。结果:在热板致痛实验中,高、中剂量提取物组小鼠首次舔后足时间延长,1 min内的舔后足次数减少（P<0.05或P<0.01）;在醋酸致痛实验中,高、中剂量提取物组小鼠首次扭体时间延长,15 min内的扭体次数减少（P<0.05）;高、中剂量提取物组及QLTM胶囊组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均降低,但中剂量组低于对照组（P<0.05）。结论: QLTM活性成分具有镇痛和抑制巨噬细胞活性作用。     

长春西汀注射液与天麻素注射液联用对急性眩晕的疗效

目的:探讨长春西汀注射液与天麻素注射液联用对急性眩晕患者的疗效.方法:选取在2018年1月至2020年6月本院收治的62例急性眩晕患者,依据随机分组法将所有患者平均分为两组,每组各31例.对照组患者静脉输注20mg的长春西汀注射液,每天1次;观察组患者在长春西汀注射液的基础上,联合静脉输注20mg的天麻素注射液,每天1...     

A型肉毒毒素治疗局灶性肌张力障碍和偏侧面肌痉挛80例临床分析

住院患者疾病构成的变化，反映了影响着人民健康状况的有关疾病变化，了解这一变化对提高全民防病意识，加强医疗系统对重要疾病的研究和防治有很大意义。现对我院2001--2005年的住院患者前十位疾病构成进行分析。     

大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBP）诱导小鼠Th1细胞的活化作用

目的:探讨MBP对小鼠T细胞的调节作用.方法:采用淋巴细胞分层液分离小鼠脾脏淋巴细胞,在体外用MBP刺激淋巴细胞,通过MTT法测定淋巴细胞增殖反应;ELISA检测脾细胞培养上清中细胞因子的分泌水平;MBP免疫小鼠后,ELSPOT检测MBP刺激脾淋巴细胞分泌IFN-γ的细胞频数;免疫组化检测MBP与T细胞的结合作用.结果:MBP以剂量依赖关系促进小鼠淋巴细胞的增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,轻微抑制IL-4的分泌;ELSPOT检测细胞分泌IFN-γ结果显示,MBP可诱导特异性Th1活化,也可刺激非特异性Th1活化;免疫组化结果显示,抗MBP抗体可与经MBP刺激的淋巴细胞发生反应,阳性细胞占总淋巴细胞的37.7%,当MBP采用 1∶2 000抗MBP抗体中和后,再与淋巴细胞反应,结果未见阳性细胞.结论:MBP可作用于淋巴细胞诱导非特异性Th1活化,也可通过免疫诱导大量特异性Th1活化;MBP可作为新的免疫增强剂开发利用.     

两种方法对蒙药金诃子低温提取物多糖成分和含量测定结果比较

目的：评价两种方法对蒙药金诃子低温提取物多糖成分和含量的检测效果。方法采用红外光谱技术和硫酸-蒽酮比色法测定蒙药金诃子5个不同部位提取物中多糖的成分和含量,红外光谱技术检测部分由清华大学分析中心完成。评价硫酸-蒽酮比色法的精密度、稳定性、重复性和加样回收率等性能指标。结果红外光谱技术测得蒙药金诃子5个部位提取物中均有多糖成分,但各部位的含量比较差异无统计学意义。硫酸-蒽酮比色法线性范围为40～200μg/mL;精密度良好（ RSD＝0．460％）,重复性良好（ RSD＝1．616％）,平均加标回收率为（110．130±0．010）％（ RSD＝0．946％）;试剂在室温自然光下2 h内稳定性良好;标准曲线线性回归方程为Y＝0．2051X-0．0034,R＝0．9991;蒙药金诃子5个部位提取物中多糖含量为14．15％～22．15％。结论蒙药金诃子不同部位提取物的成分分析优选红外光谱技术,而硫酸-蒽酮比色法用于检测多糖含量。     

金诃子低温提取物的免疫活性

目的探讨改进炮制工艺低温提取金诃子不同部位成分的免疫活性。方法采用低温提取金诃子,将上清液用不同的分离方法及透析膜分离等技术处理,最后将不同部位的提取液冷冻干燥（具体提取工艺正在专利申请中）。采用红外光谱检测提取物的成分和含量。随机将小鼠分为阴性对照组（生理盐水）、阳性对照组（灵芝多糖）、金诃子提取物高、中、低剂量组,连续灌胃14 d。通过小鼠尾部末梢血制片检测淋巴细胞转化率,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞的吞噬活性。结果金诃子不同部位提取物的物理性状不同、成分相似,与阴性对照组及阳性对照组比较,提取物高、中、低剂量组小鼠淋巴细胞转化率均提高（P均〈0.01）,且不同剂量组巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均提高（P均〈0.01）。结论金诃子不同部位的成分均有免疫活性。