CYP1B1基因L432V多态性与散发子宫内膜癌风险关系的研究

目的探讨CYP1B1基因L432V多态性与子宫内膜癌发生危险性的关系。方法用等位基因特异性PCR（AS-PCR）法,对72例子宫内膜癌患者和80例正常女性的CYP1B1 L432V多态位点进行检测,确定出多态性的3种基因型,即野生型C/C、杂合型C/G、突变型G/G;免疫组化S-P法进一步研究雌激素受体α（ERα）的表达是否受CYP1B1基因多态性的影响。结果CYP1B1基因L432V多态性C/C、C/G、G/G三种基因型分布频率,子宫内膜患者组分别为47.2%、36.1%和16.7%,对照组分别为68.8%、23.8%和7.5%;子宫内膜癌患者组C、G等位基因频率为65.3%,34.7%,对照组为80.6%,19.4%。CYP1B1 L432V多态性基因型及等位基因型在两组间分布频率的差异有统计学意义（P〈0.05）。基因型C/G与C/C比较,G/G与C/C比较OR值分别为2.214（95%CI 1.067-4.593）倍和3.235（95%CI 1.111-9.425）倍;子宫内膜癌ERα表达检测发现,突变基因型G/G、C/G基因型者ERα阳性表达率高于C/C野生基因型（P〈0.05）。结论CYP1B1 L432V多态位点3种基因型的分布与子宫内膜癌发病风险有一定关联,突变基因型增加了子宫内膜癌的发病风险,且与ER的表达相关。     

宫颈脱落细胞中cyclin E和Ki67的表达及意义

目的:探讨宫颈脱落细胞中cyclinE、Ki67的表达对宫颈癌高危人群筛查的意义。方法:采用免疫组化法对78例(不明意义的鳞状上皮非典型增生12例,宫颈上皮内瘤样病变CINⅠ17例、CINⅡ~Ⅲ38例、浸润癌11例)宫颈脱落细胞标本进行cyclin E、Ki67检测。结果:cyclin E、Ki67在CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ以及浸润癌标本中的阳性率均较ASCUS组高,差异有统计学意义,P<0·005;CINⅠ组cyclin E的表达高于其他各组;Ki67的表达随着宫颈上皮细胞损伤程度加重而上升,浸润癌标本中阳性率最高;在CINⅠ组cyclin E和Ki672项指标特异度均为91·7%,灵敏度cyclin E(94·1%)高于Ki67(47·1%)。结论:采用宫颈脱落细胞检测cyclin E、Ki67作为辅助诊断指标应用于宫颈癌高危人群筛查,具有重要意义。     

宫颈癌组织中CDC6、TFF2的表达及其与HPV16/18感染的相关性研究

背景与目的： 研究细胞分裂周期蛋白6(CDC6)、三叶因子2(TFF2)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒(HPV)16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制。 材料与方法： 选择50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ20例、CIN Ⅱ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例,采用免疫组织化学方法检测CDC6、TFF2的表达,同时采用PCR技术检测HPV16/18 DNA,并对 HPV16/18感染情况与CDC6和TFF2表达的相关性进行分析。 结果： 在宫颈癌组织中CDC6的阳性率高于CIN和正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05),且CDC6阳性表达率与病理分级、淋巴结转移相关,差异具有统计学意义(P均<0.05)。在宫颈癌组织中TFF2的阳性率低于CIN和正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05),TFF2阳性表达率与年龄分组相关,差异具有统计学意义(P<0.05),其阳性表达率均与临床分期、病理分级、淋巴转移无相关关系(P均>0.05);以正常宫颈组织、CIN和宫颈癌为序 HPV16/18 DNA的阳性检出率逐渐升高,各组间的差异具有统计学意义(P<0.05),但与年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无相关关系(P均>0.05)。在宫颈癌组织中,CDC6与HPV16/18感染呈正相关(rs=0.386, P<0.05),TFF2与CDC6、HPV16/18感染呈负相关(rs=-0.356,P<0.05;rs=-0.500,P<0.05)。 结论： 宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中CDC6、TFF2表达的改变可能与 HPV16/18感染有关。CDC6的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关。     

流产模型孕鼠脾脏调节性T细胞分离纯化方法的初步建立

目的探索流产模型孕鼠CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞快速高效的分选方法。方法采用免疫磁珠两步法分离流产模型孕鼠脾脏中T细胞,分离后的细胞经台盼蓝染色检测细胞存活率,经流式细胞仪检测分离的纯度。结果流产模型孕鼠脾脏细胞经过免疫磁珠细胞分选法2次分选得到CD4+/CD25+调节性T细胞纯度为(93.51.1)%,CD4+/CD25-T细胞纯度为(96.60.6)%。结论采用免疫磁珠细胞分选法能够快速高效的得到高纯度的CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞。     

黄芪活性成分对膜损伤的防护作用

目的　了解黄芪活性成分对人体细胞膜损伤的防护作用。方法　采用 2种活性氧产生体系诱发膜脂质过氧化为实验模型 ,观察了黄芪活性提取成分对膜脂质过氧化作用的防护效能。结果　黄芪活性提取成分对多种自由基均有良好的清除作用 ,其中黄芪总黄酮和黄芪总皂甙的作用最佳。结论　黄芪的活性成分对氧自由基造成的细胞膜损伤具有明显的防护作用。     

大同市成年女性HPV感染及基因型分析

目的调查山西省大同市成年女性人乳头瘤病毒(HPV)感染及亚型分布情况。方法采用PCR以及线形杂交法(LA)对931名女性宫颈脱落细胞标本进行HPV基因检测和基因分型。结果正常组、低度上皮内损伤(LSIL)组、高度上皮内损伤(HSIL)组及鳞状细胞癌(SCC)组HPV感染率分别为18.6%,60.2%,69.2%和84.6%;高危型HPV感染率明显高于低危型(P<0.001);感染高峰为18~25岁年龄组;总体人群中HPV-16、HPV-58、HPV-18、HPV-52以及HPV-33的感染率最高,依次为15.8%,4.7%,3.8%,3.0%和1.8%,而SCC组中,HPV-16、HPV-18、HPV-58、HPV-52以及HPV-33的感染率最高,分别为61.5%,11.5%,7.7%,3.8%,3.8%。结论大同市女性人群HPV感染状况及HPV基因型分布与国内其他地区存在明显差异。     

阻断协同刺激分子对大鼠母胎界面中Caspase-3、LamininB的表达及妊娠结局的影响

目的探讨阻断协同刺激分子CD86对自然流产模型孕鼠母胎界面Caspase-3和Laminin B的表达及妊娠结局的影响。方法实验组于妊娠第4.5天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单克隆抗体,对照组注射大鼠同型IgG2b,而正常妊娠组不作任何处理。于妊娠第13.5天计算胚胎吸收率,用免疫组化法测定Caspase-3和Laminin B的表达。结果实验组的胚胎吸收率显著低于对照组(x2=7.441,P<0.05);实验组中Caspase-3蛋白阳性表达率明显低于对照组(P<0.05),实验组中Laminin B蛋白阳性表达率明显高于对照组(P<0.05)。结论妊娠早期阻断协同刺激分子CD86可使母胎界面中的Caspase-3和Laminin B分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用,并使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平。     

应用组织芯片技术研究人宫颈鳞状细胞癌及宫颈上皮内瘤样变组织中HPV16感染与端粒酶hTERT表达的关系

目的：探讨卸PV16感染与端粒酶hTERT表达在人宫颈鳞癌及其癌前病变中的关系。方法：利用组织芯片技术结合原位杂技术和免疫组织化学方法研究130例正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤样变组织和宫颈鳞癌组织中HPV16感染以及端粒酶hTERT表达的情况。结果：①在8／22CINⅠ,7／11CINⅡ,11／13CINⅢ,4／6原位癌,41／52宫颈鳞癌中为HPV16杂交信号阳性,CINⅢ、浸润癌与正常宫颈组织相比,HPV16杂交信号阳性率差异有显著统计学意义（P〈0．05）;②从CINⅡ到CINⅢ到浸润性鳞癌,hTERT表达与正常宫颈组织相比差异皆有统计学意义（P〈0．05）,且阳性程度逐渐增加;③端粒酶hTERT表达在各级CIN、原位癌及浸润癌组织中,与HPV16型的感染率之间呈现正相关性（P〈0．05,r=0．339）。结论：宫颈鳞癌的形成与HPV16的感染、端粒酶hTERT表达之间有重要关系。宫颈鳞癌及其癌前病变组织中HPV16感染与端粒酶hTERT表达之间具有正相关性,检测两者配合细胞学检查,有利于提高宫颈癌及其癌前病变的诊断率。组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台。     

宫颈鳞状细胞癌及宫颈上皮内瘤样变组织中HPV16感染与P21waf、Ki67表达的关系及意义

目的：探讨人类乳头瘤病毒（HPV）感染与P21^waf、Ki67表达在人类宫颈鳞癌及其癌前病变中的关系。方法：利用组织芯片技术结合原位杂技术和免疫组化方法，研究了130例正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤样变组织和宫颈鳞癌组织中旧V感染以及Ki67、P21^waf表达的情况。结果：①在8／22CINⅠ，7／11CINⅡ，11／13CINⅢ，4／6原位癌，41／52宫颈鳞癌中为HPV16杂交信号阳性，CINⅢ、浸润癌与正常宫颈组织相比，HPV16杂交信号阳性率差异有显著统计学意义（P〈0．05）；②P21^wag在癌组织中的阳性率及强度都低于正常宫颈组织（P〈0．05），且P21^waf的表达与旧V16感染之间为负相关）（P〈0．05，r=-0．337）；③CINⅡ和宫颈浸润性鳞癌与正常宫颈组织相比，Ki67的表达有显著差异，统计学意义（P〈0．05），但Ki67表达与HPV16的感染不具相关性（P〉0．05）；④P21^waf与Ki67的阳性表达在CIN演变到宫颈鳞癌的过程中呈现负相关性（P〈0．05。r=-0．406）。结论：宫颈鳞癌的形成与HPV16的感染、P21^waf的弱表达或阴性表达以及Ki67的高表达有很大关系。HPV16与P21表达为负相关，P21表达与Ki67表达也为负相关。进一步揭示了HPV16引起宫颈癌的作用机制，并且可配合细胞学检查，对宫颈鳞癌的早期诊断具有一定临床价值。     

HMGB1与原因不明复发性流产的关系

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平,及其对Th17/Treg平衡的影响。方法选取42例早孕期原因不明复发性流产患者为研究对象(URSA早孕组),并以32例正常早孕孕妇为正常早孕组(NP组)。采用流式细胞术(FCM)检测外周血中Th17和Treg细胞的比例;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测外周血中HMGB1、RAGE、IL-17、IL-6、TGF-β及IL-10表达水平。结果 URSA早孕组外周血中Treg细胞比例低于正常早孕组(P0.05),而Th17细胞比例和Th17/Treg比值均高于正常早孕组(P0.05);URSA早孕组外周血HMGB1和RAGE表达高于正常早孕组(P0.05);与正常早孕组相比,URSA早孕组外周血IL-17、IL-6表达水平均增高(P0.05),而TGF-β、IL-10的表达水平均下降(P0.05);在相关性分析比较中,URSA早孕组外周血HMGB1表达水平与RAGE、IL-17、IL-6均呈正相关,而HMGB1表达水平与TGF-β、IL-10均呈负相关。结论 URSA外周血中HMGB1表达水平增高,HMGB1可能通过直接或间接的方式调节Th17/Treg平衡模式参与URSA的发病机制。