重组人胱抑素C在大肠杆菌中的表达及纯化

目的研究构建人胱抑素C(Cys C)的重组表达质粒及其在大肠杆菌中的表达和纯化。方法采用反转录-聚合酶链反应从人肝组织中获取Cys C cDNA,并将其插入到pET-28a(+)质粒中,重组质粒pET-28a-CysC转化入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达可溶性CysC。重组CysC采用Ni2+-NTA系统进行层析纯化。结果核酸序列测定与预期一致,CysC表达水平达到146mg/L,约占菌体总可溶性蛋白的13.5%,表达产物用SDS-PAGE鉴定,其相对分子质量为13.3×103,经纯化后蛋白纯度达90%。结论成功构建Cys C原核表达系统和蛋白纯化,为制备抗体以及研制Cys C免疫纳米微球测定试剂奠定了基础。     

BiPAP呼吸机治疗肺心病合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床观察与护理

目的:探讨双水平气道正压通气呼吸机(BiPAP)治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发Ⅱ型呼吸衰竭的护理措施。方法:2009年5月～2010年2月我科收治Ⅱ型呼吸衰竭患者30例,在常规抗感染、解痉、平喘、强心、利尿等治疗基础上,给予BiPAP呼吸机辅助通气,治疗前及治疗后48h复查血气分析。结果:治疗后48h患者血液pH值、动脉血氧饱和度(SaO2)及氧分压(PaO2)较治疗前明显升高,二氧化碳分压(PaCO2)较治疗前则明显下降,(P0.05)。结论:早期应用BiPAP呼吸机治疗COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭安全有效,细致周密的护理在其中起着重要作用。     

以头晕为首发症状的肺癌脑转移癌1例分析

对我院以头晕为首发症状的肺癌脑转移癌1例分析如下。 1病历摘要 男,59岁。2009-08—03由蹲位站立时突然出现头晕、头痛、大汗,当时测血压为120／80mmHg,血糖6mmol／L,     

心肌肌钙蛋白基因中连续AGG的同义替换与GST融合表达

目的获得高表达、易纯化的GST-cTnT融合蛋白,初步探讨其免疫反应性。方法(1)PCR扩增心肌肌钙蛋白T基因cDNA及其连续稀有密码子的同义替换;(2)PGEX-4T-3/TnT-1、2、3、4的构建与GST-cTnT融合蛋白的表达和纯化;(3)WesternBlot与电化学发光cTnT测定法研究GST-cTnT融合蛋白的免疫反应性。结果成功构建了PGEX-4T-3/TnT-1、2、3、4的表达载体。BL21-PGEX-4T-3/TnT-2、3、4表达的目的蛋白高于BL21-PGEX-4T-3/TnT-1,通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析得到高纯度的融合蛋白。WesternBlot与电化学发光cTnT测定法表明表达的融合蛋白和相应的抗体相互作用,且GST蛋白不与相应的抗体作用。结论cTnT基因上的连续稀有密码子的同义替换,可提高其在E.Coli中的表达量。GST-cTnT融合蛋白中的GST蛋白不影响cTnT的免疫反应性。     

谷胱甘肽S-转移酶-肌钙蛋白I(28～110aa)表达纯化及稳定性的初步研究

目的:评估重组融合蛋白谷胱甘肽S-转移酶(GST)-肌钙蛋白I(TnI)(28～110aa)的实用价值。方法:诱导表达菌株BL21-PGEX-4T-3/TnI(84～330bp)表达GST-TnI(28～110aa),谷胱甘肽Sepharose-4B亲合层析柱纯化融合蛋白,经自动免疫分析仪检测其免疫反应性。采用双抗体夹心ELISA法检测稳定性,并与天然提纯心肌肌钙蛋白I(cTnI)抗原进行比较。结果:GST-TnI(28～110aa)融合蛋白表达水平高,具较高免疫反应性。在37℃条件下,GST-TnI(28～110aa)融合蛋白第3天免疫反应性仍保留60%,而人心肌提纯的cTnI在第3天免疫反应性几近丧失。结论:GST-TnI(28～110aa)融合蛋白具较高的免疫反应性,与天然cTnI相比较,重组GST-TnI融合蛋白稳定性好,有望作为cTnI测定的候选参考标准品。     

血清肌红蛋白光激化学发光免疫测定法的建立

目的采用光激化学发光免疫测定技术(LIC I)建立定量检测肌红蛋白(Mb)的方法。方法使用针对Mb不同表位的2株单克隆抗体,一株包被发光微粒,另一株进行生物素化,与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果该方法的灵敏度为1.36 ng/m l,在33.8~1 521.0ng/m l的范围内线性良好。批内和日间变异系数分别为3.05%~4.41%和5.80%~6.56%。在血红蛋白浓度<2.6 g/L,总胆红素浓度<342μmol/L、三酰甘油浓度<11.3 mmol/L时的干扰率无临床意义。与Roche E lecsys电化学发光法有较好的相关性(r=0.997 1)。结论血清Mb LIC I的建立有助于进一步对检测试剂盒的研制。     

中药内服外洗治疗膝关节积液疗效观察

目的 观察中药内服外洗治疗膝关节积液的临床疗效.方法 将96例膝关节积液患者随机分为两组,治疗组予中药内服外洗;对照组予西药扶他林片口服,外擦扶他林乳胶剂,比较两组疗效.结果 治疗组治愈率为38.89％,总有效率为88.89％;对照组治愈率为21.43％,总有效率为66.67％.两组总有效率经统计学处理,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 中药内服外洗治疗膝关节积液具有消肿止痛、恢复关节功能,达到临床治愈或缓解症状,改善关节功能的确切疗效.     

不明原因肺部多发结节1例

患者女性,19岁,2011年06月初无明显诱因出现咳嗽、咳白色粘痰,无明显发热、盗汗,无胸痛、气短,自行服用头孢类、止咳药1周后咳嗽、咳痰无明显好转.2011年06月21日到湖南某医院行胸片检查提示:双肺散在斑片状影,考虑结核可能.2011年06月25日到湖南某三级甲等医院就诊,行胸部CT提示:双肺散在斑片状、结节状阴影,纵隔内见数个稍大淋巴结影(图1).痰涂片见鳞状上皮细胞及炎细胞,未见癌细胞.痰涂片找抗酸杆菌(-).血沉34 mm/h.诊断考虑肺结核,予异烟肼、盐酸乙胺丁醇、利福平、吡嗪酰胺抗结核治疗,治疗1周后患者症状无明显好转并逐渐出现胸闷、气短等不适,痰中带血丝,伴盗汗,于2011年7月10日急诊入北京某三级甲等医院,行胸部CT:双肺散在斑片状、结节状阴影,病灶较前增多(图2);血沉64 mm/h;痰涂片找抗酸杆菌(-);血气分析提示为I型呼吸衰竭.考虑诊断为肺结核建议转科治疗.     

呼吸方式和呼吸流量对体描法气道阻力及胸腔气量的影响

为了解呼吸流量和呼吸方式对体描法测定气道阻力、胸腔气量的影响，采用不同流量及呼吸方式测定２８例阻塞性通气功能障碍性疾患病人和８例限制性通气功能障碍病人的气道阻力及胸腔气量，并与２０例健康人作对照。结果：呼吸流量在０５～１５Ｌ／ｓ与呼吸流量大于１５Ｌ／ｓ时所测气道阻力值差异显著（Ｐ＜００１），尤以ＣＯＰＤ病人更明显，用气喘式呼吸法和静息呼吸法所测气道阻力差异显著（Ｐ＜００１），而不同呼吸流量或不同呼吸方法所测胸腔气量无明显差异。说明不同的呼吸方式、不同的呼吸流量对气道阻力测定影响较大，对胸腔气量测定影响较小。建议测定气道阻力应限定呼吸流量，在测定气道阻力、胸腔气量时优选静息呼吸法     

垂体腺癌的临诊应对

回顾性分析经病理证实的原发性垂体腺癌1例,结合影像学上肿瘤的侵袭性进展过程和临床特征进行分析.垂体腺癌生长迅速,肿瘤生长特点有助于临床诊断;其治疗方案与垂体腺瘤也有所不同.临床上,垂体肿瘤增长迅速并伴有侵袭性时需警惕垂体腺癌的可能性,针对垂体腺癌的临床诊疗,仍需进一步累积经验.