超低温冰箱转液氮阶梯降温法与传统程序降温法保存造血干细胞的比较

背景:在造血干细胞整个冷冻保存过程中,受到降温速率、储存温度深浅、冷冻保护剂组合等因素影响,各国学者在提倡选择何种保存方法上面存在不同的主张。目的:比较-80℃低温冰箱转液氮阶梯降温法与传统程序降温法保存外周造血干细胞的效果。方法:将采集的造血干细胞分两组,第一组细胞浓度为1×1011L-1,加入10%二甲基亚砜,放入程序冷冻仪内程序设置为室温至-4℃按1℃/min的速率降温,按35℃/min快速降至-45℃,再以15℃/min升至-21℃,然后以5℃/min降至-90℃,取出冷冻管置-196℃液氮罐内。第二组细胞浓度为1×1011L-1,加入5%二甲基亚砜、3%羟乙基淀粉、4%人血白蛋白,将冷冻管置-80℃冰箱过夜后取出,置-196℃液氮罐内的气相,再过夜后置液氮罐液相内。结果与结论:两组冷冻方法保存细胞的锥虫蓝拒染率、回收率、凋亡率和死亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结果显示用5%二甲基亚砜、4%白蛋白、3%羟乙基淀粉组成的冷冻保护剂,通过-80℃低温冰箱转液氮阶梯降温法冷冻保存造血干细胞与传统10%二甲基亚砜作为冷冻保护剂用程序降温的方法取得一样效果,操作简便易于临床应用。     

Wortmannin抑制PI3K途径对K562细胞增殖和Ara-C诱导的细胞凋亡的影响

目的 :探讨磷酰肌醇 - 3激酶 (PI3K)途径在K5 6 2、NB4和HL6 0细胞增殖和凋亡抗性中的不同作用 .方法 :用磷酰肌醇 - 3激酶 (PI3K)特异抑制剂Wortmannin抑制PI3K活性 ,经细胞生长曲线测定、半固体集落形成实验、流式细胞膜联蛋白V (Annexin -V -Flous)标记技术检测细胞凋亡百分比和凋亡指数 .观察K5 6 2、NB4和HL6 0细胞增殖能力及凋亡抗性的变化 .结果 :K5 6 2、NB4和HL6 0细胞在 2 4、 4 8、 72h的增殖抑制率分别为 4 1 33%、 5 7 4 6 %、 6 5 85 %和 2 6 2 9%、 5 5 1%、 2 10 %及 32 14 %、 17 14 %、13 14 % .生长曲线显示Wortmannin抑制PI3K途径可显著抑制K5 6 2细胞的增殖 (P <0 0 5 ) ,而对NB4和HL6 0细胞增殖无明显影响 (P >0 0 5 ) .K5 6 2、NB4和HL6 0细胞加和不加Wortmannin ,培养 14d后的集落形成率分别为 :16 15 %和 7 6 0 % ,5 90 %和 6 10 % ,6 6 0 %和 6 4 0 % .集落形成抑制率为 5 2 94 %、3 39%和 3 0 3% .Wortmannin抑制PI3K途径可显著抑制K5 6 2细胞的集落形成 (P <0 0 5 ) ,而对NB4和HL6 0细胞集落形成无明显影响 (P >0 0 5 ) .K5 6 2、NB4和HL6 0细胞加WT、AraC、WT +AraC作用 2 4h后的凋亡细胞百分比分别为 (17 2 7± 1 94 ) %、 (2 3 2 5± 14 12 ) %、 (17 6     

经骨髓细胞学和病原学诊断的组织胞浆菌病(附7例报告)

组织胞浆菌属于真菌界-半知菌亚门-丝孢菌纲-丛梗孢科，为双相型真菌，常经呼吸道传染，也可经皮肤、胃肠道黏膜受染。可侵犯单核吞噬细胞系统(网状内皮和淋巴系统)引起探部真菌病。组织胞浆菌病(Histoplasmosis，HP)是具有传染性的深部真菌病，当病原菌侵入人体后，视个体免疫力情况而表现为局限性或播散性感染，     

急性髓细胞性白血病微分化型(ANLL-M0)的临床研究

目的探讨ANLL-M0的细胞形态学、细胞化学、细胞免疫学特性和治疗.方法骨髓涂片用Wright-Giemsa染色、POX染色、PAS染色、NES染色及NaF抑制试验.骨髓液用流式细胞单克隆抗体直接免疫标记技术检测白血病细胞表面相关抗原分化群,TPA试验.短期培养法直接法G显带分析白血病细胞染色体组型.化疗、异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT).结果骨髓早期微分化细胞(NEC)均>90%.POX均阴性.PAS染色2例弱阳性,2例阴性.NES染色2例阳性,均不受NaF抑制.4例TPA强阳性.免疫表型2例CD+13,1例CD+15,1例CD+38,1例CD+11b,MPO 3例阳性,CD+19,CD+2均阴性,2例CD+7.2例化疗达完全缓解,其中1例作allo-PBSCT,已存活28月CCR和19月.结论细胞形态学、细胞化学、细胞免疫表型是诊断急性髓细胞性白血病微分化型的重要依据,用AML的治疗方案治疗ANLL-M0有效.     

血浆置换治疗多发性骨髓瘤高黏滞综合征

多发性骨髓瘤(MM)是浆细胞的恶性肿瘤，由于单克隆浆细胞的恶性增生分泌大量单克隆免疫球蛋白，临床上常可引起一系列高黏滞综合征(HVS)。我科自1997年8月—2002年4月采用血浆置换(TPE)治疗MM合并HVS15例35例次取得较好疗效，现报道如下。 1 材料与方法 1．1 一般资料 MM患者15例，诊断均符合全国统一诊断标准。男性12……     

达雷妥尤单抗联合化疗桥接异基因造血干细胞移植后达雷妥尤单抗联合来那度胺维持治疗原发性浆细胞白血病一例并文献复习

目的:观察达雷妥尤单抗联合化疗桥接异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后,应用达雷妥尤单抗联合来那度胺维持治疗原发性浆细胞白血病（PCL）的效果及预后。方法:回顾性分析云南省第一人民医院2020年1月收治的1例原发性PCL患者临床资料,并复习相关文献。结果:该患者诊断为原发性PCL后,采用达雷妥尤单抗联合BD（硼替佐米、地塞米松）方案治疗1个疗程、联合BCDD（硼替佐米、环磷酰胺、脂质体多柔比星、地塞米松）方案治疗2个疗程,达到完全缓解后进行达雷妥尤单抗联合allo-HSCT治疗。供者细胞植入成功,供体细胞嵌合率为94.36%,无急性移植物抗宿主病反应。移植后应用达雷妥尤单抗联合小剂量来那度胺间断维持治疗,至投稿时患者移植后缓解4个月。结论:达雷妥尤单抗联合化疗桥接allo-HSCT后应用达雷妥尤单抗联合来那度胺的系列治疗可能会改善原发性PCL的预后,延长生存时间。     

Wortmannin抑制PI3K途径对白血病细胞周期特异性及BCL-2蛋白表达影响的研究

目的探讨Woltmannin抑制PI3K途径对K562、NB4、HL60细胞周期特异性、BCL-2蛋白表达的影响。探明PI3K途径在K562、NB4、HL60细胞周期、细胞凋亡、BCL-2蛋白表达中的不同作用。方法用PI3K特异抑制剂Wortmannin抑制PI3K途径．AraC诱导细胞凋亡，药物作用214h后，细胞经DNA特异性荧光染色，用流式细胞仪(FCM)检测细胞DNA含量、BCL-2蛋白表达。Multicyele Verson 4．00软件分析细胞DNA含量直方图及细胞周期、BCL-2蛋白表达。观察各细胞系增殖周期、细胞凋亡的变化。结果K562、NB4、HL60细胞经Wortmannin、Ara-C、Wortmannin Ara-C作用24h后细胞出现DNA含量低于G1期的亚二倍体峰(亚G1期细胞)这一凋亡细胞的特征性改变，实验组细胞增殖指数(PI)明显低于对照组，凋亡百分比显著增加。Wortmannin可以通过抑制PI3K通路使K562细胞阻滞于G1期。作用24h后细胞实验组细胞BCL-2蛋白表达较对照组降低，说明Wortmannin可促进K562细胞的凋亡。结论Wortmannin可以通过抑制PI3K通路抑制K562细胞的增殖。并可以通过抑制PBK通路使K562细胞阻滞于GI期。Wortmannin可抑制K562细胞的BCL-2蛋白表达，促进K562细胞的凋亡。Wortmannin属于细胞周期特异性药物。     

MN基因定型在恶性血液病异基因造血干细胞移植植活证据检测中的临床研究

目的探讨MN基因型定型在恶性血液病异基因造血干细胞移植植活证据检测中简单可行的方法。回顾性分析了10例患者恶性血液病异基因造血干细胞移植的临床资料。方法分别采取受者和供者移植前及移植后14天及365天的血液标本,根据已知基因序列设计合成引物,采取PCR-SSP的方法检测方法的检测受者和供者移植后的基因型和基因亚型。结果 10例患者MN为5例,MM为3例、NN为2例或MGMG2例,MTMT1例,MGMT6例,MTN1例。与血清学结果完全吻合。显示两组样本的表型与基因型吻合很好,资料的说明性较好（P〉0.05）。结论血型基因检测的证据表明在同种异体造血干细胞移植中血型基因型可以作为早期监测的指标、标本用量少、科学敏感性强。     

急性髓系白血病M2误诊为M3b 1例

1病例报告女,15岁。因头晕、乏力3个月于2005-10住某医院,血W BC42.6×109/L,RBC 1.55×1012/L,Hb 58 g/L,PLT 29×109/L。骨髓增生Ⅲ级,原始+早幼粒细胞78.5%,POX(++),诊断急性髓系白血病M 3b(APL),予维甲酸治疗。2005-11-22转北京大学人民医院,会诊发病时骨髓:骨髓增生Ⅲ级,原粒35%,早幼粒21%,可见A uer小体,诊断急性髓系白血病M 2,2005-11-22骨髓:骨髓增生Ⅴ级,原粒2%,早幼粒1%,免疫分型CD 34、HLA-DR、CD 38、CD 56阳性,CD 117、CD 33、CD 13阴性。染色体:46xx[5]/46xx t(8;21)[12]/46xx t(8;21)11q-[3]。PM L-RAR a…