MicroRNA-218在肝细胞癌中的表达及功能

目的检测MicroRNA-218(miR-218)在肝细胞癌中的表达情况并研究其在肝癌中的功能。方法收集46例肝细胞癌及对应癌旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-218在肝癌及对应癌旁组织中的表达情况;应用miR-218 mimic转染人肝癌细胞系HepG2,MTT和流式细胞术检测转染后细胞活力和凋亡变化,qRT-PCR和Western blot检测miR-218潜在靶点的表达变化。结果 miR-218在肝癌组织中的表达显著低于对应的癌旁组织(P<0.05);miR-218低表达与肿瘤大小(>5 cm)和高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ)具有显著相关性(P<0.05);在HepG2细胞中,miR-218抑制细胞增殖和诱导凋亡,并下调Bmi-1和CDK6 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论 miR-218低表达与肝癌的恶性临床病理特征相关,miR-218可能通过下调Bmi-1和CDK6表达抑制肝癌细胞增殖和促进凋亡。     

单侧液压脑损伤对大鼠双侧海马GFAP表达和CA1区突触传递的影响

目的研究单侧液压脑损伤(FPI)对大鼠双侧海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达和CA1区突触传递的影响。方法建立大鼠单侧液压脑损伤模型,脑标本分为对照组(包括正常对照和假手术对照)、FPI损伤同侧组和FPI损伤对侧组。免疫组化法检测海马水平切片GFAP表达,对海马CA1区锥体神经元进行细胞内记录。结果FPI大鼠双侧海马齿状回门区和CA1区GFAP表达均比对照组明显增强。FPI损伤同侧组兴奋性输入-输出关系曲线的斜率比其他两组显著增大(P<0.05);FPI损伤同侧组和对侧组双脉冲易化(PPF)比值和抑制性突触后电位(IPSP)幅值均比对照组显著减小(P<0.05);FPI损伤同侧组和对侧组双脉冲抑制(PPD)比值均比对照组显著增大(P<0.05)。结论大鼠单侧液压脑损伤对双侧海马均可产生影响,导致双侧海马CA1区兴奋性突触传递增强,抑制性突触传递减弱。     

5/6肾切除大鼠慢性肾衰病理机制研究

目的：探究5/6肾切除所致慢性肾衰动物模型在病理发展过程中血中生化指标及肾脏基因表达的变化。方法：将SD大鼠随机分为假手术组（Sham）和5/6肾切组（NX）,分别于术后6周、8周末处死,收集血清、血浆和肾脏组织,测定血清肌酐、血浆醛固酮含量及肾脏组织TGF-β1、TNF-α和IL-17基因的表达。结果：病理组动物血清肌酐、血浆醛固酮含量较假手术组显著性升高,肾脏组织TGF-β1、TNF-α和IL-17基因表达较假手术组升高,且8周病理组各项指标升高幅度大于6周病理组。结论：RAAS参与慢性肾衰病变过程,引发肥大、炎症等一系列变化,并且随时间延长而病程加深。     

用温热摄象仪分析腹症——论日本对中西医结合之态度(四)

前言为了运用汉方治疗,有必要正确地掌握证。证是把从患者那里获得的征象(体征、症候)进行综合判断而作出的决定。为了正确地掌握证,有必要使证进一步科学地客观化。中医是运用望、闻、问、切的方法获取证,而腹诊也是其中之一,它是从汉方古典医籍中所得到启发,在日本进一步得以发展的诊疗方法。我们对认为经采用汉方医学的诊断基准之一的腹诊认定为具有显著腹证的患者,从体型分类、     

红霉素在喂养不耐受新生儿中应用

新生儿常存在喂养不耐受现象 ,促胃肠动力的药物可改善喂养。近年国外研究发现红霉素对胃肠有促动力作用 ,但国内对此报道少见。本研究就口服红霉素对新生儿喂养不耐受的临床治疗效果进行初步评价 ,以期为新生儿喂养不耐受的治疗提供临床资料。资料与方法一、临床资料１．对象 :为１９９８年１１月～２０００年１２月住院新生儿 ,符合标准６１例。随机分２组 ,治疗组３１例 ,男１９例 ,女１２例 ;对照组３０例 ,男１５例 ,女１５例。基础疾病包括 :窒息２９例 ,早产儿１８例 ,足月小样儿７例 ,胎粪吸入综合征４例 ,败血症３例。２．诊断标准…     

内皮素与肺动脉高压关系研究进展

在先天性心脏病中，肺循环合成及分泌内皮素（ＥＴ）增加，且与肺动脉压力及肺循环量呈正相关。在心力衰竭、肺源性心脏病、原发性肺动脉高压、新生儿肺动脉高压及高原性肺动脉高压中，均有肺循环内ＥＴ合成及分泌增加，且与肺动脉压力呈正相关，提示肺血流动力学变化是各种肺动脉高压时肺ＥＴ分泌增加的共同机理，抑或两者互为因果。ＥＴ参与了各种原因所致肺动脉高压的形成     

Flt3配体胞外域的原核表达纯化及对脐血CD34+细胞的扩增作用

背景：Fms 样酪氨酸激酶3配体(Flt3配体)是一种重要的生长因子,通过激活特定的酪氨酸激酶受体,调控造血细胞的生长、生存和/或分化,具有促进造血干细胞体外扩增的应用潜力。 目的：构建pET32a(+)-hFL^ext原核表达载体,表达、纯化hFL^ext蛋白,观察其对脐血CD34⁺细胞的扩增作用。 方法：克隆hFL^ext,构建pET32a(+)-hFL^ext重组表达载体。转化大肠杆菌 BL21,IPTG诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白。磁珠分选脐血CD34⁺细胞,单独加入hFL^ext或联合干细胞因子、血小板生成素孵育1周,观察体外扩增作用。 结果与结论：成功克隆hFL^ext,并构建了pET32a(+)-hFL^ext重组表达载体。在大肠杆菌BL21成功表达Trx-hFL^ext融合蛋白,经8 mol/L尿素变性包涵体蛋白,逐步透析复性,镍珠亲合层析纯化蛋白,成功获得高纯度的Trx-hFL^ext融合蛋白。Trx-hFL^ext融合蛋白不仅具有维持及轻度刺激CD34⁺细胞体外扩增的作用,并且与干细胞因子及血小板生成素具有协同作用,为造血干/祖细胞体外扩增研究奠定了基础。     

新生儿Apgar评分与窒息关系的探讨

目的：探讨Apgar评分与窒息的关系，以便能对Apgar评分有正确认识和应用。方法：回顾性分析已明确诊断缺氧缺血性脑病（HIE）的96例患儿和40例正常儿Imin,5min Apgar评分和出生时脐动脉血血气。比较两种方法对诊断缺氧窒息的敏感度与特异度。结果：（1）1min Apgar评分对诊断HIE的敏感度为72．92％，特异率为90％；5min Apgar评分法的敏感度75％，特异度95％。（2）除外某些影响因素，采用Apgar评分诊断HIE的敏感度低于特异度。（3）脐动脉血气分析法敏感度83．33％，特异率为80％。（4）5min钟评分的准确性高于1min评分（P＜0．05）。（5）脐动脉血pH值判断新生儿有否窒息、缺氧时，具有较高的敏感度，而特异度相对降低不明显。结论：Apgar评分低并不等于缺氧窒息，对新生儿窒息应进行综合评估。     

蛋白转导域介导BCR/ABL抗原对CML患者T细胞的活化作用

目的：研究蛋白转导域(PTD)介导的BCR／ABL抗原对慢性髓细胞白血病(CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法：利用基因工程技术，将PTD基因与CML b3a2 bcr／abl基因融合并原核表达。将纯化的PTD—BCR／ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞(PBMC)体外共孵育，用流式细胞仪分别检测CD4^ 、CD8^ T细胞上活化抗原CD25的表达。结果：终浓度为100mg／L的PTD—BCR／ABL抗原体外刺激4d后，10例CML患者中，5例表现为CD8^ T细胞活化，2例表现为CD4^ T细胞活化，其中有1例CD8^ 和CD4^ T细胞同时活化；而作为对照的BCR／ABL抗原刺激组无一例表现为CD8^ 或CD4^ T细胞活化。结论：PTD能将外源性BCR／ABL抗原转导入抗原呈递细胞内，加工呈递后激活抗原特异性CD8^ 及CD4^ T细胞，为CML特异性CD8^ 、CD4^ T细胞的体外活化及细胞免疫治疗开辟一条新的途径。     

免疫低下因素在轮状病毒全身扩散中的作用

我们试图通过制作免疫低下小鼠模型 ,对轮状病毒 (ＲＶ)病毒血症患儿免疫等因素的初步分析 ,了解免疫低下因素在诱发ＲＶ肠道外扩散中的作用与地位 ,为临床的预防及治疗提供参考。普通级健康昆明小鼠 ,15～ 16日龄。ＲＶ来源 :ＲＶ流行高峰期腹泻患儿粪便 ,ＲＶ检测 ++++。新鲜粪便离心 ,取上清 ,0 .2 2 μｌ微孔滤膜过滤 ,加生理盐水稀释 2倍 ,加青链霉素 4℃过夜 ,细菌培养(- )。以环磷酰氨 0 .5ｍｇ/10ｇ体重的量腹腔注射小鼠 ,连续 6ｄ ,形成免疫低下小鼠。Ａ组灌胃ＲＶ ,Ｂ组腹腔注射ＲＶ ,Ｃ组灌胃生理盐水 ,Ｄ组腹腔注射生理盐水 ,以…