OPN在不同转移潜能肝癌中的表达及意义的初步研究

目的研究骨桥蛋白（OPN）在HCC中的表达与及临床应用价值。方法选取50例HCC手术切除的新鲜标本和50例正常肝组织，10例癌旁组织。做成切片，应用SABC免疫组化法，以OPN单克隆抗体对HCC组织切片进行染色检测。对OPN表达量与HCC的关系进行研究。结果OPN在HCC癌组织中的阳性率70．00％，明显高于癌旁及正常肝组织（P〈0．01）。OPN在高、中、低分化HCC中评分是0．66±1．62、2．24±1．84、2．17±1．65，低分化明显高于高分化（P〈0．05）。OPN在有转移与无转移HCC中的评分是2．65±1．83、1．3±1．71，有转移者高于无转移者（P〈0．01）。结论OPN在HCC癌组织中的表达明显升高，病理分化差者表达明显升高，且伴有转移者高于不伴转移者，提示OPN可能是HCC转移复发的一个潜在指标。     

恶性梗阻性黄疸术前减黄利弊的系统评价

目的系统评价恶性梗阻性黄疸患者术前行胆道引流（preoperative biliary drainage,PBD）的利弊。方法计算机检索CochraneLibrary、PubMed、EMBASE、中国生物医学文献数据库等数据库,并辅以手工检索,截止到2010年6月。对纳入的随机对照试验用RevMan5.0软件进行Meta分析。结果纳入7个随机对照试验,Meta分析结果显示：与对照组比较,PBD组术后死亡率（P=0.88）和总并发症发生率（P=0.66）的差异无统计学意义;采用经皮肝穿胆道引流（PTBD）（OR=0.49,95%CI=0.31～0.79,P=0.003）、引流前血清总胆红素〉200μmol/L（OR=0.56,95%CI=0.37～0.84,P=0.006）、引流时间小于4周（OR=0.60,95%CI=0.39～0.93,P=0.020）的患者术后并发症发生率降低。结论选择合适的病例,采取合适的引流方式,控制合适的引流时间,术前减黄可降低恶性梗阻性黄疸患者术后并发症发生率,但不能降低术后死亡率和总并发症发生率。     

骨桥蛋白基因沉默对肝癌侵袭转移的抑制作用

目的 探讨应用小于扰RNA(siRNA)沉默骨桥蛋白(OPN)基因的表达对人肝癌细胞株侵袭转移的抑制作用. 方法于体外化学合成针对OPN序列特异性的舣链RNA(dsRNA),转染人肝癌细胞株(HCC LM3),用实时定量PCR和Western blot检测OPN mRNA水平和蛋白表达.通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验,观察肝癌细胞生物学行为的指标.统计学方法采用SPSS11.5软件进行q检验,计数资料用χ<'2>检验. 结果与空白组相比,siRNA特异性转染HCC-LM3细胞OPN mRNA水平下降84.7%,蛋白水半下降81%(P<0.5);细胞克隆形成数目下降(1.91个对比5.40个,P<0.01);穿过人工基底膜的细胞数减少(13.5个对比33.4个,P<0.05),阴性对照组的OPN mRNA与空白对照组差异无统计学意义(29.7个对比33.4个,P>0.05).结论 沉默OPN基因表达-口J在体外阻遏肝癌侵袭.     

手助腹腔镜在肝癌切除术中的临床应用分析

目的探讨手助腹腔镜在肝癌切除术中临床应用的价值。方法将近期手术切除的47例原发性肝癌随机分为3组：手助腹腔镜肝癌切除术（Ⅰ组）16例，单纯腹腔镜肝癌切除术（Ⅱ组）14例，开放式肝癌切除术（Ⅲ组）17例，对其治疗及效果进行统计分析。采用SPSSll．0软件，应用单因素方差分析法（One-WayANOVA），组间比较采用LSD检验。结果Ⅰ组与Ⅱ组的手术时间分别为3．46h及4．06h（P〈0．001），其差异有显著性；Ⅰ组与Ⅲ组的术中出血量、住院时间、肝功能影响、近期并发症率分别为119．38ml及238．82ml（P〈0．001），8．31d及10．53d（P〈0．001），47．13U／L及125．53U／L（P〈0．001），0．00％及23．53％（P—0．014），其差异有显著性。结论手助腹腔镜肝癌切除术具有微创、安全、效果好等优势，有较高的临床应用价值。     

超声微泡造影剂增强重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL感染肝癌细胞的实验观察

目的 探讨携带可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)基因的重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL对肝癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用,以及采用超声辐照联合微泡造影剂介导rAAV-sTRAIL转染肝癌细胞的有效性.方法 单纯重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL感染肝癌细胞株HepG2,以及利用超声辐照联合微泡造影剂介导重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL感染HepG2细胞,分别以RT-PCR方法和Westen印迹法检测细胞内sTRAIL基因mRNA及蛋白表达量,噻唑蓝法检测细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL可有效转染HepG2细胞,sTRAIL mRNA表达水平在微泡造影剂组高于单纯病毒组,二者差异有统计学意义(P<0.05);rAAV-srrRAIL可抑制HepG2细胞增殖,其抑制率在微泡造影剂组高于单纯病毒组,二者差异有统计学意义(P<0.05);rAAV-sTRAIL可诱导HepG2细胞凋亡,其凋亡率在微泡造影剂组高于单纯病毒组,二者差异有统计学意义(P<0.05).结论 构建出的重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL在肝癌细胞中能有效表达,sTRAIL基因对肝癌细胞有明显的抑制增殖和促凋亡作用;联合超声微泡造影剂及低强度超声,可有效提高腺相关病毒载体在肝癌细胞中的感染率,从而增强sTRAIL对肝癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用.     

携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体重组腺相关病毒的构建及鉴定

目的:构建一种携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因的重组腺相关病毒(recombined adeo-associated virus,rAAV)载体。方法:实验于2005-09/2006-04在中山大学附属第一医院普通外科实验室完成。首先构建携带可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体基因的穿梭质粒pAAV-sTRAIL,利用磷酸钙共沉淀法将穿梭质粒共转染入HEK293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL。以噬斑分析法筛选单克隆重组腺相关病毒;聚合酶链反应法鉴定阳性重组腺相关病毒;氯化铯密度梯度离心法纯化病毒;紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度,噬斑分析法测定病毒感染滴度;Western blot检测rAAV-sTRAIL在293细胞中的表达情况。结果:成功构建了重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL,制备的病毒纯度好、滴度高,且在293转导细胞中能有效表达目的基因sTRAIL。结论:构建的重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL,为组织工程相关细胞转基因构建及临床应用提供先进的载体系统。     

老年肥胖胆囊炎患者的临床特点及诊治经验

目的探讨老年肥胖患者胆囊炎的临床特点。方法我科2008年1月-2011年3月收治898例胆囊炎患者,其中129例为老年肥胖患者,129例中行保守治疗55例,余74例行手术治疗,其中胆囊切除术67例,胆囊切除＋胆囊造瘘术5例,胆囊大部分切除术2例。结果74例手术患者术后出现胆漏3例,出血1例,伤口脂肪液化2例,均治愈。55例保守治疗患者中2例并发肝功能衰竭死亡。伴有糖尿病及BMI≥28的患者,其手术时间长,术中出血量大、住院时间久,并发症发生率高（P〈0．05）。结论老年,尤其是肥胖患者,可能是慢性胆囊炎急性发作、胆囊结石的危险因素之一;其临床症状不典型,具有较强的隐蔽性,并发症相对较多,预后相对较差,应该及早诊治。     

回盲部结核播散误诊胰头肿瘤一例

患者男．32岁．因“中上腹部疼痛1个月”于2010年7月5日入院．既往健康．无结核等病史。查体未见特殊。血常规：白细胞9．38×10^9／L、血红蛋白108g／L,肝肾功能、血淀粉酶、尿淀粉酶、CEA、AFP及CA-199检测均正常。拍胸片正常曾在外院进行过上腹部CT检查提示：胰腺头部及颈部见多发囊状病灶．内见多发分隔影．增强后病灶边缘及分隔强化．腹膜后可见肿大的淋巴结：见图1。     

糖尿病与胆囊结石相关性分析

目的分析糖尿病和胆囊结石之间的关系，讨论糖尿病合并无症状胆囊结石时是否应该手术治疗以及糖尿病患者胆道手术的围手术期处理方法。方法对46例合并糖尿病胆囊结石患者的临床资料进行回归性分析。结果开腹胆囊切除16例，腹腔镜胆囊切除20例；10例内科治疗。术后切口感染2例，肺部感染2例，泌尿系统感染1例，无手术死亡病例。2例非手术患者死于感染性休克。结论糖尿病惠者易合并胆囊轻瘫。糖尿病合并无症状胆囊结石时，即使不做预防性胆囊切除，也应该在出现症状时立即手术治疗。围手术期应严密监测血糖，根据病情持续静脉滴注含胰岛素的葡萄糖液体，并注意维持好代谢平衡。     

骨桥蛋白基因沉默对肝癌侵袭转移的抑制作用

目的 探讨应用小于扰RNA(siRNA)沉默骨桥蛋白(OPN)基因的表达对人肝癌细胞株侵袭转移的抑制作用. 方法于体外化学合成针对OPN序列特异性的舣链RNA(dsRNA),转染人肝癌细胞株(HCC LM3),用实时定量PCR和Western blot检测OPN mRNA水平和蛋白表达.通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验,观察肝癌细胞生物学行为的指标.统计学方法采用SPSS11.5软件进行q检验,计数资料用χ<'2>检验. 结果与空白组相比,siRNA特异性转染HCC-LM3细胞OPN mRNA水平下降84.7%,蛋白水半下降81%(P<0.5);细胞克隆形成数目下降(1.91个对比5.40个,P<0.01);穿过人工基底膜的细胞数减少(13.5个对比33.4个,P<0.05),阴性对照组的OPN mRNA与空白对照组差异无统计学意义(29.7个对比33.4个,P>0.05).结论 沉默OPN基因表达-口J在体外阻遏肝癌侵袭.