丙型肝炎病毒感染HepG2细胞模型的初探

自从1989年丙肝病毒(ＨＣＶ)ｃＤＮＡ被克隆以来,在建立敏感、稳定的ＨＣＶ感染细胞模型方面亦作了大量的工作,但目前仍缺乏自然感染状态的小动物模型及稳定的ＨＣＶ感染的细胞株,我们采用ＨＣＶ阳性血清连续感染法感染ＨｅｐＧ2细胞,试图建立稳定的ＨＣＶ复制细胞系。感染血清来自一位慢性丙肝患者,抗ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ均阳性,抗ＨＡＶ、抗ＨＤＶ、ＨＤＡｇ、乙肝全套、抗ＨＥＶ检测均为阴性。靶细胞ＨｅｐＧ2购自湖南医科大学细胞培养中心。将05ｍｌＨＣＶＲＮＡ阳性血清与5ｍｌＲＰＭＩ1640完全培养基加入刚传代的ＨｅｐＧ2细胞培养瓶…     

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A影响p53抑制肝癌细胞甲胎蛋白表达的分子机制

目的了解丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)对p53抑制甲胎蛋白(AFP)基因表达的影响及分子机制。方法采用质粒转染技术及微粒体酶免疫法观察p53蛋白对Huh7肝癌细胞AFP表达的抑制作用及HCV NS5A对其抑制作用的影响;蛋白印迹实验观察HCV NS5A对p53蛋白表达的影响;谷胱甘肽转移酶沉淀实验鉴定HCV NS5A与p53蛋白能否相互作用形成复合物。结果转染pRc/CMV空质粒的Huh7细胞上清液AFP浓度为(14 322±2412)ng/ml,转染pCNS5A质粒的Huh7细胞上清液的AFP 浓度为(13 843±3218)ng/ml,两组问t=1.42,P>0.05;转染pC53-NS3质粒的Huh7细胞上清液的AFP 浓度为(10 241±1326)ng/ml,与上述两组比较,t值分别为2.41及2.38,P值均<0.05;pCNS5A和pC53- NS3共转染者AFP浓度为(14 582±1238)ng/ml,与pC53-NS3单独转染组比较,t=3.12,P<0.01; pCNS5A和pC53-NS3共转染者和pC53-NS3单独转染者Huh7细胞p53蛋白表达无变化。在谷胱甘肽转移酶沉淀实验中,加入谷胱甘肽-p53融合蛋白后出现HCV NS5A蛋白条带,而仅加入谷光甘肽者则未出现此条带。结论p53蛋白能抑制Huh7细胞AFP的表达,HCV NS5A能减轻p53蛋白对AFP表达的抑制作用。HCV NS5A不影响p53蛋白的表达但能与p53蛋白结合形成复合物是使p53功能失活的分子机制。     

传染病学教学改革实践分析

成人高等医学本科教育是中国改革开放进程中的必然产物,但局限是学程短、学时少,如何在有限的学时内提高教学质量,以便在3年的学程完成时能达到本科毕业的相应要求,是教师们共同思考的问题.我们传染病学教研组在课时安排、大课内容讲授方式及见习课教学方式方面进行了大胆改革并初见成效.     

四氯化碳诱导大鼠急性肝功能衰竭动物模型的建立

目的不同剂量的四氯化碳可以引起不同的肝脏损害,本试验用四氯化碳灌服制造急性肝功能衰竭的动物模型。方法SD大鼠35只,分5组,1个对照组,4个实验组,实验组四氯化碳灌胃剂量依次为每公斤体重1、3、4和5mL。观察动物的精神状况、食欲、运动情况、毛发、尿的颜色,检测血清谷丙转氨酶、总胆红素,数据x±s表示,实验组和对照组的动物存活率用χ2检验;各组肝功能指标用单因素方差分析。肝脏组织HE染色后观察病理学改变。结果各组间肝功能损害的差异及动物存活率的差异在统计学上均有极显著性。每公斤体重4mL四氯化碳组出现急性肝功能衰竭的临床表现以及肝脏病理改变。结论每公斤体重4mL四氯化碳灌胃可用于SD大鼠急性肝功能衰竭模型的建立。     

布鲁氏菌病误诊为骨关节病1例分析

布鲁氏菌病多发于北方牧区,临床表现多样,可以伴有多器官损害,缺乏特异性.该病在南方很少见,因而特别容易误诊.对1例误诊为骨关节病的布鲁氏菌病患者的诊断和治疗进行回顾性分析,以强化临床医生对布鲁氏菌病的认识,以便早期诊断,尽可能地改善患者的预后.     

急性血吸虫病误诊为结核性腹膜炎一例

患者男，18岁，大学生，湖南湘阴人。因间歇性发热、盗汗1个月余，上腹痛10d于2005年11月5日步行入院。患者于当年9月21日患“感冒”，体温高达39℃，在当地卫生院予以退热药物处理，症状有所好转，于9月底来长沙上学，午后体温时常38℃左右，夜间热自退，伴盗汗，晨无发热，患者未予重视，入院前10d出现上腹钝痛，无恶心及呕吐，伴腹胀、食欲减退，进食量减少为正常时的一半，大便每天1～3次，质软，无里急后重，到校医务室就诊，诊断为“消化性溃疡”，     

1b型丙肝病毒在外周血单个核细胞感染状态及其对干扰素应答的影响

我国ＨＣＶ感染主要是１ｂ型，该型对干扰素的应答较其它基因型低，因此研究１ｂ型ＨＣＶ感染慢性化的机理及对干扰素应答的影响因素在我国尤显重要。取外周血分离得到单个核细胞（ＰＢＭＣ），提取ＲＮＡ，分别逆转录合成ＨＣＶＲＮＡ正、负链，采用Ｏｋａｍｏｔｏ等建立...     

丙肝病毒在外周血单个核细胞中的感染状态的进一步研究

丙肝病毒感染是一种全身性的感染 ,其嗜肝性已被肯定。关于在宿主的其他组织及细胞中存在的状态 ,正为广大丙肝研究者密切关注。本文作者曾经报道过Ｉｂ型丙肝病毒在外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)感染状态及其对干扰素应答的影响[1] ,又进一步在慢性丙肝患者的ＰＢＭＣ中用ＲＴ ＰＣＲ方法及间接免疫荧光方法检测ＨＣＶ感染存在的状态 ,结果报道如下。1　材料及方法1 1　试剂　淋巴细胞分离液 (上海生化试剂二厂 ) ;细胞总ＲＮＡ提取试剂 ;(上海华顺生物试剂公司 ) ;ＨＣＶＲＮＡＲＴ ＰＣＲ试剂盒 (洛阳华美生物工程公司 ) ;鼠抗人ＨＣＶＲＮＡＭｃＡｂ(Ｖｉ ｒｏＳｔａｔ,ＵＳＡ .) ;兔抗鼠ＩｇＧ