动物行为学在中药寒热药性研究中的思考与实践

从宏观动物行为学角度,结合计算机和现代影像处理技术,通过监测动物在具有不同寒热属性药物的作用下对环境温度趋向性行为的变化,获得通过直接观察难以评定的多行为学参数,评价药物的寒热属性,进而表征其寒热属性的差异.该方法可实时在线、无扰、直观且客观、定性且定量地监测实验动物的寒热趋向性,从整体动物水平表征中药寒热药性,符合中药用药特点,适应于中医药理论体系,是中药药性研究方法的一次大胆尝试,为探讨中药寒热药性与动物对温度趋向行为变化的内在联系,阐明中药寒热药性的客观真实性与科学内涵,建立符合中药应用特点的寒热药性客观评价方法,审视和研究中药药性乃至整个中医药基础理论提供了新的视角和技术平台.     

浅谈药品生产车间的传递窗

GMP认证中,生产车间内布局是否合理、实用,是否有防交叉污染,防不同级别洁净度的污染,防洁净区与非洁净区之间的污染等措施,是设计所有生产车间时须考虑的原则问题.人流、物流是否通畅、不交叉,且物流是否顺应产品工艺、工序流程、避免迂回往返也是非常值得注意的.     

HIV-gp120人源单链可变区抗体筛选与鉴定

目的 通过制备抗人类免疫缺陷病毒(HIV)gp120蛋白人源单链可变区抗体(seFv),探索新型抗人获得性免疫缺陷病毒(HIV)治疗方法.方法 采用噬菌体表面展示技术,将HIV-gp120蛋白固相包被于Nunc板,应用半合成的人源单链可变区抗体文库技术,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮吸附-洗脱-扩增筛选过程,随机挑选96个克隆,利用酶联免疫吸附法(ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验,进行免疫学检测和鉴定,获得与HIV-gp120蛋白结合活性较强的scFv阳性克隆,并对HIV-gp120蛋白ScFv的编码基因进行序列测定分析.结果 经过筛选96个克隆中有39株克隆ELISA的吸光度(A450 nm)值较高,将这些噬菌体上清与牛血清白蛋白(BSA)进行交叉反应,确定其中有7株交叉反应较弱,结合3次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果,最后确定1株阳性克隆.提取质粒,进行DNA序列测定,DNA为699 bp.结论 用噬菌体抗体库技术成功地获得抗HIV-gp120蛋白的scFv,为抗gp120蛋白的ScFv防治艾滋病研究创造了条件.     

左金丸不同提取方法的比较研究

目的优选左金丸最佳提取方法。方法采用超高效液相色谱法(UPLC),建立左金丸的指纹图谱以及5种生物碱的测定方法;以指纹图谱相似度和5种生物碱的总量作为评价指标,对左金丸的水提、70%乙醇提取、盐酸-甲醇(1∶100)提取、半仿生提取方法进行比较。结果左金丸的色谱峰在8 min内检测完,共检测到9个共有峰,基线平稳,峰形较好。5种生物碱的线性关系良好,分离度高;不同提取方法的左金丸指纹图谱相似度>0.98;而5种生物碱的量差异较大,其中盐酸-甲醇(1∶100)提取的左金丸中5种生物碱的总量最高,水提方法最低。结论本实验建立的方法操作简便,分析速度快;基于指纹图谱的定性判别和指标成分的定量分析,可以综合全面地评价比较左金丸的提取方法;其中盐酸-甲醇(1∶100)提取左金丸的方法优于其他3种方法。     

基于冷热板示差法研究麻黄汤与麻杏石甘汤寒热药性差异

目的:基于冷热板示差法研究麻黄汤与麻杏石甘汤寒热药性差异的客观真实性。方法:考察麻黄汤及麻杏石甘汤的给药剂量和测量时间,并进行验证性实验,测定ATPase等能量代谢指标。结果:给药剂量为10倍人体给药剂量(麻黄汤0.80 g.kg-1,麻杏石甘汤2.26 g.kg-1),测量时间为给药后30~60 min。与空白组比较,麻黄汤组小鼠在高温区停留比例明显降低(P0.01);与麻黄汤组比较,麻杏石甘汤组小鼠在高温区停留比例显著增加(P0.05)。与空白组比较,麻黄汤组小鼠的Na+-K+-ATPase活性显著性增强(P0.05),麻杏石甘汤组小鼠的Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性均显著性降低(P0.01)。结论:从动物行为学角度验证了麻黄汤与麻杏石甘汤寒热药性差异的客观存在,结果与传统中医药理论对其寒热赋性具有一致性,肝组织ATP酶活性的改变可能是其作用机制。     

MELD-Na评分对我国HBV相关慢加急性肝衰竭短期预后预测价值的Meta分析

目的评价MELD-Na评分对我国HBV相关慢加急性肝衰竭短期预后的预测价值。方法检索Pub Med、Embase、中国知网、维普、万方等数据库2006年1月-2018年3月发表的中英文文献。应用诊断性试验准确性质量评价工具(QUADAS-2)评价文献质量,检验是否存在阈值效应。根据是否存在异质性分别采用随机效应模型或固定效应模型合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比及诊断比值比,构建拟合受试者工作特征曲线,计算受试者工作特征曲线下面积(AUC)。采用Deek's漏斗图非对称检验评估是否存在发表偏倚。结果共有8项研究符合纳入标准。共计1386例患者纳入本研究,其中男1173例,占84.6%。各研究纳入患者平均41.3~46.9岁。异质性检验提示存在显著异质性,采用随机效应模型合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和诊断比值比分别为0.67[95%可信区间(95%CI):0.59~0.75]、0.77(95%CI:0.63~0.87)、2.89(95%CI:1.84~4.54)、0.43(95%CI:0.35~0.52)和7.32(95%CI:4.33~12.40)。计算AUC为0.75(95%CI:0.72~0.79)。Deek's漏斗图非对称检验提示不存在明显的发表偏倚。结论 MELD-Na评分对我国乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭的短期预后具有一定的预测价值。     

超声内镜与磁共振胰胆管造影诊断梗阻性黄疸的效果比较

目的对比超声内镜(EUS)与磁共振胰胆管造影(MRCP)对梗阻性黄疸的诊断价值。方法收集2015年1月-2016年3月于首都医科大学附属北京天坛医院就诊的梗阻性黄疸患者31例,所有患者均行EUS、MRCP检查,比较EUS、MRCP诊断梗阻性黄疸的敏感度、特异度、准确度、Youden指数。结果 31例患者中胆总管结石16例(51.61%),壶腹肿瘤1例(3.23%),十二指肠乳头肿瘤6例(19.35%),胰头肿瘤3例(9.68%),胆管肿瘤2例(6.45%),胆管炎症2例(6.45%),1例(3.23%)经内镜逆行胰胆管造影、EUS、MRCP均未见结石、占位。对壶腹肿瘤、十二指肠乳头肿瘤、胰头肿瘤EUS诊断符合率均为100%;MRCP的胆总管结石诊断符合率、总诊断符合率均低于EUS(81.25%vs 93.75%,76.67%vs 90.00%)。EUS和MRCP诊断梗阻性黄疸的敏感度分别为90.00%和76.70%,特异度均为100%,准确度分别为90.30%和77.40%,Youden指数分别为0.90和0.77。结论对于梗阻性黄疸的诊断,EUS较MRCP拥有更高的诊断价值。