ADMA-DDAH路径在尿酸引起血管内皮损伤中的作用

目的 观察可溶性尿酸（UA）直接作用于血管内皮细胞后,对不对称二甲基精氨酸（ADMA）生成和二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH-2）表达的影响,探讨ADMA-DDAH路径在尿酸引起的血管内皮损伤中的作用。 方法 人脐静脉内皮细胞（HUVEC）在含不同浓度UA（0、60、120 mg/L）的培养液孵育下,选取6 h和24 h为研究时间点,应用ELISA法和高压液相质谱分析（HPLC）技术检测细胞上清液中ADMA的浓度;应用RT-PCR、免疫荧光（IF）和蛋白印迹法（WB）检测内皮细胞DDAH-2的表达;应用流式细胞技术检测细胞内2’,7’-二氯荧光素（DCF）的荧光强度,用以评估内皮细胞活性氧簇（ROS）的生成。分别收集并检测经UA（0、60、120 mg/L）单独刺激和与干预剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）（UA 120 mg/L+NAC 10 mmol/L）共孵育24 h后各组细胞内的DDAH-2蛋白水平,并将其与ADMA标准品在37℃共孵育2 h,根据ADMA的降解量,间接评估不同浓度尿酸作用对内皮细胞DDAH-2蛋白活性的影响。 结果 UA以浓度依赖的方式上调ADMA的表达, 并且在相同浓度下,刺激24 h 比6 h更显著地上调ADMA的表达（均P < 0.05 ）。UA浓度、作用时间的改变对细胞内DDAH-2表达的影响无明显差异（均P > 0.05）。高UA组作用24 h后细胞内ROS生成比低UA组增多 （P < 0.05）,DDAH-2活性降低（P < 0.05）,此效应可被NAC的干预所阻断。 结论 高浓度UA可促进内皮细胞ROS生成,从而导致DDAH-2活性的降低和ADMA降解的减少,而干预内皮细胞NO的合成。据此推论,高尿酸损伤内皮细胞可能有DDAH-ADMA轴的参与。     

血红素氧合酶1对尿毒症环境脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1表达的影响

目的 体外观察尿毒症患者血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）合成单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的影响，探讨诱导血红素氧合酶1（HO-1）高表达对调节MCP-1合成的作用。 方法 以含10％尿毒症血清的M199培养基体外培养HUVEC细胞株。采用RT-PCR法检测HUVEC MCP-1 mRNA的表达。用ELISA法检测HUVEC MCP-1蛋白的分泌。然后分别以HO-1诱导剂氯化血红素（hemin）及阻断剂原卟啉锌(ZnPP)预处理HUVEC，应用RT-PCR法和免疫组织化学法检测细胞内HO-1及MCP-1 mRNA及蛋白的表达。 结果 尿毒症血清可上调细胞MCP-1 mRNA的表达，促进MCP-1蛋白合成，MCP-1蛋白量为对照组的2.95倍。hemin诱导的HO-1高表达可下调尿毒症血清引起的MCP-1基因表达，抑制MCP-1蛋白合成，ZnPP可阻断其作用。30 μmol/L hemin可使HUVEC合成MCP-1蛋白减少34.4％，而hemin与ZnPP共同作用组的MCP-1蛋白量恢复至尿毒症血清组的98.0％。 结论 尿毒症血清可诱导HUVEC 的MCP-1高表达。促进HO-1高表达时可抑制MCP-1合成及分泌。HO-1有减轻尿毒症环境对内皮细胞功能损伤的作用。     

终末期肾脏病维持性透析患者生活质量状态及α酮酸对其影响

目的观察终末期肾病（end-stage renal disease,ESRD）维持性透析患者的生活质量,探讨α酮酸对其和营养状态的影响。方法选择2010年1月至2010年12月国内70家医院透析患者878例,严格推荐饮食蛋白摄入量分别是维持性血液透析（maintenance hemodialysis,MHD）患者为1.0～1.2g/（kg.d）,持续非卧床腹膜透析（continuous ambulatory peritoneal dialysis,CAPD）患者0.8～1.0g/（kg.d）,在此基础上给予患者服用α酮酸片：1片/5（kg.d）（约0.12g/（kg.d））,持续服药6个月,自身对照观察透析患者治疗前、3个月、6个月后肾脏病生活质量评分（KDQOL-SF-36评分）、体质量指数（BMI）、血清白蛋白（Alb）、主观全面营养评估（SGA评分）、血磷（P）、甲状旁腺激素（PTH）及患者主观症状等指标的变化。结果临床资料完整的最终随访患者866例,其中MHD患者642例,CAPD患者224例。6个月后全部透析患者肾脏病生活质量评分中的9个维度的指标均明显升高：生理机能（PF）从51.29±26.84升至64.65±25.53、生理职能（RP）从17.77±30.77升至38.79±40.82、躯体疼痛（BP）从64.78±22.74升至79.44±19.81、总体健康（GH）从32.01±17.02升至43.68±18.35、活力（VT）从50.26±20.65升至61.94±17.78、社会功能（SF）从49.17±22.43升至64.84±20.02、情感职能（RE）从24.48±37.83升至50.16±45.81、精神健康（MH）从55.43±19.62升至64.94±16.76,健康变化（HT）从37.24±28.4升至56.66±28.26,（P〈0.01）;BMI、血浆Alb水平及SGA评分等营养状态指标有明显改善（P〈0.01）,血磷、PTH水平下降（P〈0.01）,同时皮肤瘙痒、口腔异味、疲乏无力、头晕头痛、心慌、恶心呕吐、失眠等患者临床主观症状均明显减轻（P〈0.01）。结论 ESRD维持性透析患者的生活质量状态不佳,α酮酸配伍优化蛋白饮食可改善透析患者营养状态、矿物质代谢及临床主观症状,从而综合提高透析患者的生活质量。     

简易营养评估法评估老年腹膜透析患者的营养状况

目的：采用简易营养评估法（mini nutritional assessment，MNA）对老年腹膜透析患者进行营养评估，并与传统的主观综合营养评估（subjective global assessment，SGA）方法进行比较。方法：采用横断面调查的方法，对我院腹膜透析中心的45例患者（60岁以上）进行问卷调查以及人体测量，分别用SGA与MNA两种方法，同时检测患者血液中白蛋白、前白蛋白水平、血常规，检测了与标化的蛋白质相当的总氮呈现率（nPNA），进行饮食调查。结果：（1）根据SGA，无营养不良22例（49％），轻至中度营养不良14例（31％），重度营养不良9例（20％）；根据MNA，无营养不良18例（40％），存在营养不良风险17例（38％），营养不良10例（22％）。（2）依据SGA与MNA评分，分别在不同营养状态的三组间进行以下指标的比较：平均每日每公斤体重能量与蛋白质摄入（DEI、DPI）、血白蛋白、nPNA、透析月龄、残余肾功能，透析充分性指标（Kt／V、Ccr）差异均有显著性统计学意义（P〈0．05）。但无营养不良组的DEI、DPI异常率在SGA评分时达到了64％，而MNA评分时降至28％（P〈0．05）；存在营养不良的两组患者，血白蛋白与前白蛋白的正常率，SGA评分时为43％与60％，MNA评分为44％与59％。存在明显营养不良时，两种评分的指标异常均明显升高。（3）无论采用SGA还是MNA方法，两种分类法的统计学结果是一致的。（4）在评估结果与各指标相关性研究中，发现SGA与MNA评分结果与一系列客观指标显著相关，MNA法较优。结论：（1）SGA与MNA皆是评价老年腹膜透析营养状况的简单有效方法，但还需结合其它的营养评估指标，如DEI、DPI、血白蛋白、前白蛋白、nPNA。（2）在某些方面，MNA评估法优于SGA评分。SGA对于评价已有的营养不良有效，而MNA更有利于早期发现需要营养干预的患者。MNA评估法简单易行，值得推广，需进一步研究。     

缺氧在慢性肾脏疾病进程中的不良作用机制及其干预

各种类型的慢性肾脏疾病(CKD)虽有不同的病理学特征,但也存在一些共性,即其晚期均出现肾小球硬化和肾小管间质纤维化。CKD大多始于肾     

维持性血液透析患者透析中血压变异性的相关因素及其对预后的影响

目的 评估维持性血液透析(MHD)患者透析过程中血压变异性(BPV)情况,探讨影响MHD过程中BPV增加的相关危险因素,了解其与预后的关系.方法 对2009年1月1日以前开始在上海交通大学附属第一人民医院常规透析的MHD患者行回顾性分析.记录2009年1月-2010年12月期间每季度第1次血液透析过程中所有血压值,求取收缩压、舒张压的平均值和标准差,以离散系数表示透析中收缩压和舒张压BPV.随访时间未满2年的患者取时间平均分布的6～8个透析过程的血压计算.记录心血管事件及死亡,继续随访至2011年12月31日.结果 共纳入280例患者.平均透析中收缩压BPV为0.119 ±0.029,舒张压BPV为0.118 ±0.028;其中老年MHD患者(114例)透析中收缩压的BPV显著高于青中年组(166例)(0.126±0.029比0.114 ±0.028,P=0.012),两组间透析中舒张压的BPV差异无统计学意义(0.117±0.031比0.119 ±0.025,P=0.498).将透析中收缩压BPV作为应变量进行多元回归分析,结果显示患者年龄、透析前收缩压、透析间期体重增长率及血红蛋白水平是透析中收缩压BPV的独立影响因素.将透析中舒张压BPV作为应变量进行多元回归分析,结果显示透析间期体重增长率、平均脱水量是透析中舒张压BPV的独立影响因素.随访3年,死亡64例(22.9％),生存分析显示透析中收缩压BPV升高与病死率升高显著相关(P＜0.01).结论 高龄、透析前高收缩压、透析间期体重增长率增加、血红蛋白水平降低为MHD患者透析中收缩压BPV升高的独立危险因素,透析间期体重增长率增加为MHD患者舒张压BPV升高的独立危险因素,透析中收缩压的BPV升高与MHD患者全因死亡率增加有关.