藏医药古籍文献整理工作任重而道远

藏医药的热潮,使从藏医药古籍文献中挖掘开发具有显著疗效的各类药物成为医药人员的重要工作.我国对藏医药古籍文献进行系统性、专业性的保护、整理、研究,以期充分发挥藏医药的优势,保障人类健康生活.藏医药古籍的数量多,流传曲折,使其保护整理工作紧迫而又艰巨.     

藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用及机制探讨

目的:研究藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用及其机制。方法:60只雄性Wistar大鼠按体质量随机分成正常对照组、模型组、易善复(95 mg/kg)阳性对照组及波棱瓜子总木脂素高(400 mg/m L)、中(200 mg/m L)、低(100 mg/m L)剂量组。各给药组每日上午9点给予2 m L相应药物,0.5 h后,除正常对照组外各组给予56度白酒灌胃,连续造模8 w后,测定各组大鼠血清ALT、AST及肝脏GSH-Px、MDA、SOD、GSH、CAT、TG、ADH、ALDH2水平。荧光定量PCR法测定大鼠肝微粒体CYP2E1 mRNA表达,蛋白质印迹法(Western blot)测定肝微粒体CYP2E1蛋白表达。观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,除低剂量组TG及高剂量组GSH-Px差异无统计学意义(P>0.05)外,波棱瓜子总木脂素各组大鼠血清ALT、AST水平显著降低;肝组织MDA、TG、ADH水平及肝微粒体CYP2E1 mRNA和蛋白表达显著降低;肝组织SOD、GSH、GSH-Px、CAT、ALDH2水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。HE显示与模型组比较波棱瓜子总木脂素各组肝组织破坏程度较轻。结论:藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤有保护作用。     

川黄连多指标成分定量及特征图谱建立研究＊

目的 测定川黄连（味连、雅连、凤尾连）中7个生物碱（小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、格陵兰黄连碱）的含量并建立3种川黄连的特征图谱，构建川黄连科学的质量控制方法，以提升川黄连药材、饮片及其中成药制剂的质量控制水平，保障临床用药安全有效。方法 建立了同时测定7个黄连生物碱成分的HPLC含量测定方法，经方法学验证该方法准确性、重现性、精密度、稳定性、线性均符合要求。测定6批味连、6批雅连、3批凤尾连的7个生物碱的含量以及总生物碱的含量；建立了黄连药材HPLC特征图谱测定方法，经方法学验证，该方法精密度、重现性、稳定性均符合要求。结果 味连的总生物碱含量最高，7个生物碱在味连、雅连、凤尾连中含量各不相同，差异较大；通过对15批黄连的特征图谱相似度的分析，找出共有特征峰15个，与黄连生物碱对照品比对后，指认了8个峰，均为黄连生物碱成分。结论 川黄连多指标成分定量结合特征图谱，可以有效控制川黄连药材的质量，为2020年版《中华人民共和国药典》黄连药材质量标准的完善与提高提供参考。     

基于网络药理学的藏药二十五味肺病丸防治新冠病毒肺炎(COVID-19)可行性分析及机制探讨＊

目的 采用网络药理学方法探究藏药二十五味肺病丸防治新型冠状病毒肺炎（COVID-19 ）的可行性分析及机制探讨。方法 基于课题组藏药大复方的研究经验，通过文献调研，筛选出二十五味肺病丸专属性、特征性化合物，并通过Chemical book数据库以及TCMSP数据库进行验证，确定二十五味肺病丸有效物质成分。将筛选出的成分通过Swiss Target Prediction数据库进行靶点筛选，进而运用Cytoscape软件构建药物-化合物-靶点（基因）网络进行可视化。运用CTD数据库查询与疾病COVID-19 相关的靶点，找出与二十五味肺病丸共有的靶点，将共有基因导入STRING数据库生成蛋白互作网络，并通过DAVID数据库进行KEGG通路富集分析和GO功能富集分析，预测藏药二十五味肺病丸的作用机制。结果 经筛选藏药二十五味肺病丸中檀香、悬钩木、山柰、红花、獐牙菜、甘草、藏木香、宽筋藤等19种药材被纳入到研究中。药材-化合物-靶点网络包含了19种药材，38个化合物和相应靶点419个。通过CTD数据库查询到COVID-19 疾病相关靶点基因472个，与二十五味肺病丸共有靶点基因77个，分别为ESR1、NOS2、PPARG、PTGS2、PPARA、HMGCR、CYP17A1、NR1H4、TLR9等。通过网络拓扑和蛋白互作网络分析筛选出关键靶点涉及PTGS2、ESR1、AKT1、EGFR等。GO功能富集分析得到339条生物过程条目（BP），45条细胞组成条目（CC）和81条分子功能条目（MF）。KEGG通路富集分析筛选得到102条信号通路，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、甲型流感、胰腺癌、T细胞受体信号通路等。结论 二十五味肺病丸可能通过作用于PTGS2、ESR1、AKT1、EGFR相关靶点并通过相关肺病通路、炎症通路、免疫通路对COVID-19起到防治作用。     

石菖蒲及其有效成分对小鼠学习记忆的作用及α-细辛醚药物动力学研究

采用不同的动物实验方法,用石菖蒲去油煎剂（Ⅰ）、总挥发油（Ⅱ）、α-细辛醚（Ⅲ）进行实验。结果表明:对正常小鼠学习和记忆获得能力（跳台法试验）,戊巴比妥钠造成的记忆获得障碍模型（电迷宫法试验）,亚硝酸钠造成的记忆巩固不良模型（跳台法试验）,乙醇造成的记忆再现缺失模型（跳台法试验）均有不同程度的促进作用和改善作用。测定其主要有效成分α-细辛醚在大鼠体内各项药物动力学参数,结果表明:α-细辛醚口服吸收快,在大鼠体内分布广泛。以上实验结果还表明:石菖蒲对学习记忆作用的主要有效部位是总挥发油（Ⅱ）,其中α-细辛醚（Ⅲ）是其主要有效成分,去油煎剂（Ⅰ）有一定作用,但作用较弱。     

川黄连不同炮制品改善四氧嘧啶小鼠糖及脂代谢紊乱比较研究＊

目的 比较川黄连不同炮制品（味连、酒味连、姜味连、萸味连、雅连、酒雅连、姜雅连、萸雅连）对四氧嘧啶小鼠糖、脂代谢的药效差异。方法 采用四氧嘧啶小鼠糖尿病模型，测定小鼠的血糖指标和脂代谢相关指标。结果 在降糖方面，川黄连不同炮制品组与模型组比较，均有不同程度升高四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血清胰岛素（Ins）、降低空腹血糖（FBG）的作用，尤以萸雅连的疗效最佳；较之模型组，味连组、雅连组、姜味连组、萸雅连组糖化血清蛋白（GSP）降低显著，表明对小鼠糖代谢调节效果较好。在降脂方面，川黄连不同炮制品均可降低糖尿病小鼠血清中血清胆固醇（TG）、甘油三酯（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量，并增加高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的含量。就总体趋势而言，雅连及其炮制品降脂作用优于味连及其炮制品。结论 在降血糖方面，不同品种黄连、不同炮制品效果差异不大，以萸雅连降糖效果最为明显，在调节糖脂代谢紊乱和抗氧化方面，则雅连效果最佳。     

经木香烃内酯诱导的骨髓间充质干细胞用于治疗脑缺血再灌注损伤的研究

目的：利用木香烃内酯（Costunolide）诱导骨髓间充质干细胞（bMSCs）向神经样细胞分化，并通过诱导后的bMSCs对脑缺血再灌注大鼠模型进行治疗，研究木香烃内酯的体内外神经保护的药理学相关机制。方法：利用木香烃内酯诱导bMSCs向神经样细胞分化。此外，采用线栓法制作大鼠右脑中动脉阻断（MiddleCerebral Artery Occlusion，MCAO）再灌注模型，实验动物随机分为假手术组、模型组、MSC组及木香烃内酯诱导MSC组（诱导组）（n = 10），根据分组在再灌注2 h后由尾静脉注射相应细胞悬液或等量PBS，术后对各组大鼠进行神经功能损伤评分，于7日后取脑，检测脑组织含水量、计算梗死体积并进行HE染色。结果：木香烃内酯可使bMSCs向神经样细胞分化，且最佳诱导条件为10 μM木香烃内酯孵育细胞24 h，诱导后的bMSCs中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、巢蛋白（Nestin）的表达量均有上调；体内实验中，诱导组大鼠脑组织含水量及梗死体积均显著低于模型组和MSC组（P＜0.05），此外，组织病理检测结果说明，诱导后的bMSCs能够促进半暗带组织结构恢复，相对于其他治疗组具有更好的疗效。结论：木香烃内酯可诱导bMSCs向神经样细胞分化，且用诱导后的bMSCs能够显著性的降低脑缺血再灌注损伤。     

基于ITS2条形码及其二级结构的菊科药用植物的系统发育分析＊

目的 采用ITS2（Internal transcribed spacer2，内转录间隔区2）序列作为条形码技术对菊科药用植物进行鉴别。方法 选取来自西藏及四川康定、乐山和峨眉地区的菊科样品44种，提取DNA并对其进行PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应）扩增，后测序，测序结果提交至GenBank；同时从GenBank上下载17条样本序列。对提交和下载的61条序列用MEGA7.0软件计算种内与种间的遗传距离，采用邻接法（neighbor-joinging，NJ）构建系统聚类树直观反应鉴定结果。从ITS2数据库中预测并比较样本ITS2序列的二级结构差异。结果 菊科植物种间最小遗传距离0.031大于种内最大遗传距离0.009，有较明显的barcoding gap；NJ树显示种各属样本分别聚为一大枝，种内之间各自聚成小支，表现出良好的单系性；各属及各种样品ITS2二级结构存在明显差异。结论 以ITS2序列作为DNA条形码，能够对菊科药用植物进行准确、迅速的识别与鉴定，是物种间进化关系准确的分子鉴定依据，可为该科植物的分布、种群及种群数量的研究提供指导，为控制药品质量、合理开发利用及保护提供了新手段。     

川木通的质量标准研究

目的:为准确鉴定川木通药材,更好地控制其药材质量提供一定的科学依据。方法:用石蜡切片对川木通的基源植物小木通Clematis armandii Franch.和绣球藤Clematis montana Buch.-Ham.的茎、叶、叶柄进行组织结构的比较鉴别,以TLC寻找可供定性鉴定的指标成分,用HPLC法筛选可供定量分析的含量测定方法。结果:川木通两种基源的茎(药材)性状相似,但维管束可区别两者,尤其叶柄的结构完全不同。6个采自不同地方的川木通药材样品在薄层色谱中均明显检出β-谷甾醇的特征性斑点;HPLC测定小木通和绣球藤茎(药材)中的β-谷甾醇含量的方法稳定,且精密度较高、重复性好,其β-谷甾醇的质量浓度分别在189.18~190.27和336.90~338.34μg·g-1范围内。结论:TLC以三氯甲烷-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂,以10%硫酸乙醇溶液显色,置紫外灯(365nm)下检视,斑点分离效果最佳,可作为川木通药材中β-谷甾醇的薄层专属性鉴别条件。HPLC拟定按干燥品计算,川木通药材中β-谷甾醇的含量不得少于0.018%。     

DSF对急性心肌缺血大鼠模型NO系统的影响

目的:探讨中药复方制剂DSF对于心肌缺血大鼠血液及组织中NO系统的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组,模型组,DSF组和丹参片组。用大鼠冠状动脉左前降支结扎的手术方法制备急性心肌缺血缺氧模型,以试剂盒法测试血清及心肌组织中的NO、NOS、iNOS、cNOS的含量;用免疫组化的方法测定DSF对心肌组织中的cNOS mRNA表达的影响。结果:与模型组比较,DSF组血清NO及缺血区心肌组织NO含量均有明显升高(P<0.05或P<0.01),DSF组血清及缺血区心肌组织NO,cNOS含量有明显升高,iNOS含量没有明显差异但其与NOS之比明显降低,说明其相对含量比模型对照组有所下降,并且缺血区心肌组织cNOS mRNA表达对与模型对照组比较也有显著增高(P<0.05)。结论:DSF能明显提高NO水平,升高cNOS含量,降低iNOS/NOS比例,其抗心肌缺血作用机制可能是通过提高机体NO含量及NOS活性,提高cNOS mRNA的表达来实现的。同时DSF也可能通过其降低iNOS作用对心肌起保护作用。