pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体的构建及细胞定位

目的:构建pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体并观察其在786-O、293T和Chang liver细胞株中的定位情况。方法:采用RT-PCR法从HBE135-E6E7细胞株中克隆得到XAPC7cDNA全长序列,将之与pMD18T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pD-sRed1-C3/XAPC7真核表达质粒经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染786-O、293T和Chang liver细胞株中,观察其在真核细胞中的表达。结果:pDsRed1-C3/XAPC7重组子经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因XAPC7的序列完全正确,真核表达载体构建成功,转染该重组子的细胞株均可见红色荧光蛋白的表达,呈颗粒状分布。XAPC7主要定位于786-O细胞的胞质,胞核罕见,在293T细胞中,胞质和胞核均有分布,且两者间无明显差别,在Changliver细胞中,胞质和胞核亦均有分布,但以胞质为主。结论:成功构建pDsRed1-C3/XAPC7融合基因并进行真核表达,发现XAPC7在不同细胞中的细胞定位具有差异,为下一步研究XAPC7的肿瘤相关功能奠定基础。     

C3基因单核苷酸多态性与成人哮喘易感性的相关性研究

Objective To investigate the association between single nucleotide polymorphisms (SNPs) of the complement component 3 gene (C3) and adult asthma of Hans in southern China. Methods A casecontrol study was performed. Four hundred and eighty-four adult asthma patients diagnosed in Nanfang Hospital and Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, and 553 healthy subjects were collected from 2006 to 2010 for the study. MassARRAY-IPLEX and matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) techniques was used to determine the genotypes of the rs10402876 and rs366510 loci of C3 gene. Results Genotypes GG, GT and TT in the rs366510 locus, and genotypes GG, GT and TT in the rs10402876 locus were detected. A total of 98. 94 percent of samples were genotyped. There were no significant differences in genotype frequencies (χ2 =0. 346, P=0. 841 ) and allele frequencies (χ2 =0. 101,P=0. 751) of rs10402876 between the two groups. However, genotype and allele frequencies of the rs366510 locus were significantly different (χ2 = 9.759, P=0. 008, Bonferroni correction,P= 0. 016; χ2 = 5. 294, P= 0. 021, Bonferroni correction, P = 0. 042, respectively). Compared with genotypes GG+GT, genotype TT of rs366510 significantly increased the risk of asthma, with the odds ratio of 1. 471 (95 % confidence interval 1. 125-1. 923). Conclusion These results suggest that C3 gene could be associated with adult asthma of Han population in southern China.     

循证医学与免疫学教学改革

1 循证医学的概念与内涵 1979年,英国流行病学家和内科学家Archje Cochrane出版了<疗效与效益,医疗保健中的随机对照实验>一书,论述了临床决策与文献进展之间的关系.1992年,加拿大Mcmaster大学Dayid sackett教授正式提出循证医学的概念,并将之定义为"慎重、准确和明智地应用能获得的最好研究依据来确定患者的治疗措施[1]",即"遵循证据的临床医学",证据主要来自大样本随机对照实验和meta分析[2].     

β2肾上腺素受体基因Arg16Gly位点多态性与华南人群哮喘相关性研究

目的探讨β2肾上腺素受体基因(ADRB2)SNP位点rs1042713即突变位点Arg16Gly的多态性与华南汉族人群支气管哮喘发病的相关性。方法采用病例对照研究,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)对rs1042713进行基因分型,对实验结果运用χ2检验和二分类Logistic回归进行统计学相关性分析。结果 rs1042713多态位点AA、AG、GG 3种基因型在哮喘患者的频率为18.7%、76.0%和5.3%,与对照组(33.8%,44.6%和21.6%)相比具有显著差异(χ2=36.28,P<0.001);对年龄和性别进行校正后,发现相对于AA+GG基因型,携带AG基因型的哮喘发病风险增加(OR=4.37,95%CI:2.64~7.23)。结论华南汉族人群哮喘的发病机制可能与SNP rs1042713位点的单核苷酸多态性有关,杂合子基因型AG为其发病的危险因素。     

炎症因子在老年急性冠脉综合征中的作用

目的 探讨清可溶性E-选择素（solubility，Eseleetin，sEsel）、可溶性血管细胞粘附分子（solubility vascular cell adhesion molecule,sVCAM-1）和超敏C反应蛋白（high sensitivity C reactive protein．hs-CRP）浓度存老年急性冠脉综合缸（acute coronary syndrome，ACS）发病中的作用：方法选择老年ACS患者共70例为研究对象，其中不稳定型心绞痛（unstable angina，UA）及非ST段抬高性心急梗死（non ST segment elevated myocardial infarction，NSTEMI）组40例，ST段抬高性心肌梗死（STsegmentelevatedmWardialinfarction，STEMI）组30例，另外选择健康体检者36例为对照组。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清sEse1和sVCAM-1浓度．采用胶乳免疫比浊法检测hs-CRP。结果NSTEMI／UA组和STEM1组的血清sEsel、sVCAM-1和hs-CRP浓度均明冠高于对照组，STEMI组高于NSTEMI／UA组．而NSTEMI和LfA亚组间血清sEsel、sVCAM-1和hs-CRP浓度差异无统计学意义（P〉0．05）：结论老年ACS发生时具有明显的炎症反应，炎症因子sEsel、sVCAM-1及hs-CRP在老年中起到重要作用。     

雌-孕激素替代治疗对绝经后妇女血脂和脂蛋白代谢的长期作用

目的　观察雌 孕激素替代治疗 (HRT)对绝经后妇女血脂和脂蛋白代谢的长期作用。方法　 193例健康绝经后妇女分为A组 (高胆固醇血症组 ) 6 3例、B组 (无高胆固醇血症组 ) 6 0例和C组 (对照组 ) 70例 ,A、B组均给予倍美力 (天然结合型雌激素 ) 0 .6 2 5mg d +安宫黄体酮 2mg d治疗 ,连续 3年监测血清性激素、血脂及脂蛋白水平。结果A组总胆固醇 (TC) ,低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)水平分别下降 12 .1% (P <0 .0 1)、15 .7% (P <0 .0 1) ,B组LDL C下降 4 .5 % (P <0 .0 5 ) ,A、B组高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)水平均明显升高 ,分别为 15 .1% (P <0 .0 1)、2 5 .8% (P <0 .0 1) ,均在第 3个月就出现明显改变 ,并在服药期间可保持疗效 ,对照组则变化不明显。B组TC有下降趋势 ,各组甘油三酯 (TG)均有增高趋势 ,但差异均无显著性意义。A、B组血清 17 β雌二醇 (17 βE2 )和孕酮于第 3个月显著升高 ,血清卵泡刺激素、黄体生成素水平则于第 6个月明显下降 ,并在服药期间可保持疗效 ,而对照组变化不明显。结论　绝经后妇女HRT能改善血清TC、TG、LDL水平 ,并在服药期间可保持疗效 ,对具有高胆固醇血症者效果更佳     

年轻急性心肌梗死患者血浆同型半胱氨酸水平测定的意义

目的　通过测量年轻人急性心肌梗死患者血浆同型半胱氨酸 (HCY)水平的变化 ,探讨其发病机理 ,为预防和治疗提供理论依据。方法　应用高效液相色谱分析法测定血浆HCY浓度。结果　各组内不同性别之间HCY水平无明显差异。与年轻对照组相比 ,年轻人AMI组血浆HCY水平明显增高 ,两组间具有显著性差异 (P <0 0 5 )。年轻人AMI组中不同病因间比较 ,显示冠状动脉粥样硬化组较其他原因组的血浆HCY水平高 ,两组间具有显著性差异(P <0 0 1)。与中老年AMI组相比 ,年轻人AMI组血浆HCY水平较低 ,两组间具有差异 (P <0 0 1) ,但年轻人AMI中冠状动脉粥样硬化组与中老年AMI组相比 ,两组无明显差异 (P >0 0 5 )。结论　HCY与由冠状动脉粥样硬化所致的年轻人AMI密切相关 ,而与其他原因所致的年轻人AMI无明显相关性     

HSPC238相互作用蛋白RPL5的初步筛选北大核心CSCD

目的:构建HSPC238诱饵载体,筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。方法:基因合成法合成HSPC238基因,sfi IA和sfi IB双酶切后与pGBKT7诱饵载体连接,获得诱饵质粒pGBKT7-HSPC238,经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7共同转化到酵母菌株AH109,在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-HSPC238的自激活作用,进一步从人胎肝c DNA文库中筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。结果:诱饵载体pGBKT7-HSPC238构建成功,经表型筛选检测无自激活作用,经酵母双杂交技术结合文献分析,从人胎肝c DNA文库中初步筛选发现核糖体蛋白L5(Ribosomal protein L5,RPL5)可能是HSPC238相互作用的目标蛋白之一。结论:成功构建pGBKT7-HSPC238诱饵质粒载体,且经酵母双杂交技术结合文献分析发现RPL5可能是与HSPC238相互作用的目标蛋白之一。     

丙泊酚对ARDS机械通气患者的持续镇静的临床研究

目的：探讨丙泊酚对急性呼吸窘迫综合症（ ARDS）机械通气患者的镇静效果。方法：对本院2012-10～2014-10期间收治的60例急性呼吸窘迫综合症患者作为研究对象,随机分为研究组和对照组。研究组在其进行机械通气前进行注射丙泊酚镇静诱导治疗,对照组则为咪达唑仑治疗。观察记录两组患者的镇静时间效果,用药时和停药后的呼吸、循环参数变化,肺内动静脉分流率和氧合指数,患者是否出现不良反应。结果：患者注射丙泊酚后,5min内可达到预期效果,起效较快。心压和心率稳定。呼吸频率和血氧饱和度等方面有明显改善,其差异有显著性,具统计学意义（P＜0．05）。研究组和对照组比较,研究组的肺内动静脉分流率下降、氧合指数升高,其差异有显著性,具统计学意义（P＜0．05）。结论：丙泊酚较之咪达唑仑对于急性呼吸窘迫综合症机械通气患者能够起到良好的镇静效果,见效快、易控制,值得临床推广应用。