鼻康片对变应性鼻炎小鼠模型Th1/Th2平衡和血清总IgE的影响

目的 研究鼻康片对变应性鼻炎模型小鼠血清总IgE和Th1细胞/Th2细胞(Th1/Th2)平衡的影响,分析中成药鼻康片抗变应性鼻炎的作用机制.方法 24只7周龄Balb/c小鼠随机分成空白对照组(n=6)、模型组(n=6)、西药对照组(n =6)、实验组(n=6)4组.用卵清蛋白致敏建立实验变应性鼻炎模型,西药对照组和实验组分别给予西替利嗪和鼻康片治疗,疗程结束后应用酶联免疫法(ELISA)测定血清总IgE、白细胞介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)含量.结果 鼻康片可显著降低变应性鼻炎模型小鼠血清IgE和IL-4的水平,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).然而Th1/Th2的比值和IFN-γ的水平明显增高,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论 鼻康片可通过降低变应性鼻炎模型小鼠血清IgE和IL-4的水平,增加IFN-γ的水平,调节Th 1/Th2的平衡来发挥抗变应性鼻炎的作用.     

叶酸-顺铂纳米药物的制备及其对人鼻咽癌细胞的靶向治疗作用

目的:制备连接叶酸分子的顺铂纳米药物,并研究该药物对人鼻咽癌细胞的体外靶向治疗作用.方法:采用化学共沉淀法制备顺铂纳米药物并通过聚乙二醇二胺连接叶酸分子合成叶酸-顺铂纳米药物(FA-MNP-CDDP)并对其进行表征.将人鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-2与FA-MNP-CDDP体外共培养,采用普鲁士蓝染色法测定细胞摄取纳米药物的情况,采用MTT法测定纳米药物的细胞毒性.结果:合成FA-MNPCDDP纳米药物顺铂含量为(1.6 ±0.1)mg/mL,药物粒子平均直径为(10.1 ±1.5)nm.表达叶酸受体的HNE-1细胞对该纳米药物摄取能力显著强于不表达叶酸受体的CNE-2细胞.FA-MNP-CDDP对HNE-1细胞的体外抑制效果明显,IC50[(1.300±0.10)μg/mL]较单纯顺铂[(2.161±0.85)μg/mL]降低约40%.结论:叶酸-顺铂纳米药物具有针对鼻咽癌细胞的靶向载药和抑制增殖的能力.     

叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物制备及表征

背景：醛基化海藻酸钠具有良好的水溶性和组织相容性,利用其改性Fe3O4磁性纳米颗粒可增加表面活性和稳定性,叶酸的修饰可赋予载体分子靶向性。目的：制备具有叶酸受体靶向及磁靶向的载顺铂磁性纳米药物（CDDP-FA-ASA-MNPs）。方法：采用高碘酸钠氧化法制备醛基化海藻酸钠,叶酸的羧基经二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺活化后合成FA与双端氨基聚乙二醇的耦连产物FA-PEG,化学共沉淀法制备Fe3O4,海藻酸钠侧链含有大量羧基,85℃下与Fe3O4纳米颗粒表面的羟基形成化学键结合,然后通过雪夫氏碱将FA-PEG与醛基化海藻酸钠相连接,最后根据配位络合的原理,顺铂分子中的-Cl被海藻酸钠的羧基取代,形成稳定的叶酸和醛基化海藻酸钠改性载顺铂磁性纳米复合物。结果与结论：所制备的磁性纳米药物呈颗粒状,稳定分散于水溶液中,Fe3O4磁核平均粒径为（8.116±0.24）nm,流体力学直径为（110.9±1.7）nm,zeta电位为（-26.45±1.26）mV,最大饱和磁化强度为56.2emu/g,顺铂包封率为（49.05±1.58）%,载药量为（14.31±0.49）%。体外实验证实,叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌细胞HNE-1和喉癌细胞Hep-2选择性摄取,而叶酸受体表达阴性的鼻咽癌细胞CNE-2则不摄取。提示所制备的CDDP-FA-ASA-MNPs具有良好的水溶性和稳定性,能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌和喉癌细胞摄取。     

经鼻内镜筛窦纸板进路眶内手术

目的探讨经鼻内镜筛窦纸板进路手术治疗眶内各种疾病的可行性并确立临床处理的基本原则.方法经鼻内镜进路眶内手术10例眶内异物取出术4例、球后海绵状血管瘤切除术1例、眶内侵犯或转移的恶性肿瘤切除术5例.结果眶内异物取出术3例成功,1例失败;球后海绵状血管瘤1例完整切除;鼻咽癌眶内转移1例手术切除+放射治疗后随访4年无复发,视力恢复至0.6;其他眶内恶性肿瘤4例,手术后随访1～4年均健在.10例手术后1例视力损伤,9例均保留原有视力,其中3例失明病例中2例视力有一定程度的恢复.结论位于视神经内侧的某些占位性病变可以经鼻内镜筛窦纸板进路完成.当代先进的放射治疗技术为眶内恶性肿瘤的保守性手术创造了条件.     

沙参麦冬汤对放射性鼻窦炎黏膜形态和功能转归的影响

目的:探讨应用加减沙参麦冬汤对放射性鼻窦炎黏膜形态和功能恢复的影响。方法:对51例鼻咽癌放疗后鼻窦炎患者随机分为治疗组26例和对照组25例,治疗组每次服用加减沙参麦冬汤,对照组用罗红霉素治疗,其他措施2组相同并做对比观察。随访3个月于治疗前、治疗1个月、治疗3个月进行糖精试验,每组4例患者分别于治疗前、治疗1个月、治疗3个月取窦口鼻道复合体黏膜进行电镜观察。结果:治疗组鼻腔黏膜形态和功能恢复时间均较对照组显著提前(P<0.05)。2组患者治疗前的SIgA无显著性差异(P>0.05),治疗1个月治疗组患者SIgA与对照组比较显著升高(P<0.05)。治疗前治疗组纤毛传输速率为3.14±1.05mm/min,2组比较差异无显著性(P>0.05);治疗3个月治疗组纤毛传输速率为6.09±2.63mm/min,与治疗前比较差异有显著性(P<0.01),对照组为5.04±1.22mm/min,2组之间比较有显著性差异(P<0.05)。电镜观察:治疗前黏膜上皮纤毛脱落,治疗后纤毛排列较整齐,粗细较均匀,呈"9+2"微管结构。结论:应用加减沙参麦冬汤能加快鼻腔黏膜形态和功能的恢复。     

Epstein—Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建

目的 扩增Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ多聚酶基因，构建高效表达载体。方法 根据ＥＢＶ全基因序列，在ＥＢＶ ＤＮＡ多聚酶基因的３’、５’端设计一对附加ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ酶切位点的特异性引物，以Ｂ９５－８细胞ＤＮＡ为模板，采用改良ＰＣＲ方法扩增出ＥＢＶ ＤＮＡ多聚酶基因（３０４４ｂｐ）。用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ酶切该基因片断并克隆有达载体ｐＭＡＬ－ｐ２，采用蓝白斑试验筛先阳性菌落。     

Epstein-Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建

【目的】扩增Epstein Barr病毒 (EBV)DNA多聚酶基因 ,构建高效表达载体。【方法】根据EBV全基因序列 ,在EBVDNA多聚酶基因的 3′、5′端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物 ,以B95 8细胞DNA为模板 ,采用改良PCR方法扩增出EBVDNA多聚酶基因 (3 0 44bp)。用EcoRⅠ和HindⅢ酶切该基因片断并克隆至表达载体 pMAL p2 ,采用蓝白斑试验筛选阳性菌落。EcoRⅠ和HindⅢ酶切分析、鉴定重组体 pEBP。【结果】通过电泳鉴定 ,PCR产物为 3 0 44bp ,与EBVDNA多聚酶基因大小一致。经蓝白斑试验及限制性DNA内切酶分析 ,成功地筛选到EBVDNA多聚酶基因重组表达质粒 pEBP。【结论】本实验成功地扩增出完整EBVDNA多聚酶基因 ,并构建了高效表达重组体 ,为进一步在体外表达、制备EBVDNA多聚酶蛋白奠定了基础。     

人鼻咽癌细胞株中类肿瘤干细胞的分离、培养及鉴定

目的检测CD133在人鼻咽癌细胞株SUNE中的表达以及CD133^＋肿瘤细胞的体外增殖、分化情况,并对其进行类肿瘤干细胞的鉴定。方法采用免疫荧光细胞化学技术及流式细胞仪检测鼻咽癌细胞株SUNE中CD133的表达情况以及CD133^＋细胞体外分化能力；免疫磁珠分选技术纯化CD133^＋肿瘤细胞；MTT法检测CD133^＋细胞的体外增殖能力,并将其与CD133^-及未分选细胞进行比较。结果鼻咽癌细胞株SUNE中有0.35%的微量细胞呈CD133^＋表达；免疫磁珠富集的CD133^＋肿瘤细胞在无血清培养基中悬浮生长,并可以形成肿瘤细胞球,具有很强的自我更新和繁殖能力,且在3、5、7 d的紫外吸光度（A）值分别为0.317&#177;0.007、0.370&#177;0.002、0.558&#177;0.004,均高于相同条件下未分选细胞和CD133^-细胞（P〈0.05）；CD133^＋细胞在含血清培养基中的比例逐日下降,至培养的第12天,由第1天的89.67%下降至0.37%。结论CD133可作为鼻咽癌类干细胞的标志之一。鼻咽癌细胞株SUNE中存在类肿瘤干细胞,并具有自我更新和分化能力。     

引物原位标记技术的建立

为了快速检测特异性染色体,采用引物原位标记和细胞化学技术,以7号,17号,X和Y染色体特异性寡核苷酸作引物,对外周血淋巴细胞分裂中期染色体和间期核进行定位研究。结果显示,上述4种染色体均得到特异性标记,且信号强,清晰,无背景着色。结论表明,在与染色体有关的许多研究中该法可替代原位杂交,结合其最近在组织病理学中的应用研究,提示该技术有可能成为分子病理学研究和细胞基因快速诊断的有价值的工具。     

鼻咽癌组织和患者血清中γ－谷氨酰转肽酶（GGT）的初步研究

鼻咽癌组织和患者血清中γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）的初步研究湖南医科大学附属湘雅医院耳鼻喉科（４１０００８）谢民强，肖健云，陶正德，李远斌，曹兆振，谭莉近年来在寻找恶性肿瘤标记物的研究中，ＧＧＴ已受到注意［１，３］。研究表明，肝癌患者血清ＧＧＴ活性增高...