寡核苷酸DNA芯片用于ABO血型基因分型的研究

目的 对寡核苷酸芯片用于ABO血型基因分型的技术进行研究。方法 常规的酚／氯仿法提取标准血样基因组DNA，在ABO座位的外显子6和7区域各设计一对引物，经PCR扩增基因组相应区段并用Cy5-dCTP进行标记。设计寡核苷酸分型探针，将探针固定在APS－PDC法制作的DNA芯片上，用标记的PCR产物与之杂交，扫描仪对杂交结果进行扫描，Imagene软件对杂交图象进行分析。结果 本实验共检测了100份已知血型血样的ABO基因型，结果证明本实验研制的ABO基因分型芯片快速、准确、灵敏。结论 寡核苷酸DNA芯片用于ABO的基因分型与其他方法相比更具有灵敏、直观、高通量和集成化的优势。     

人类金属硫蛋白-1F cDNA基因与砷化物相互作用的研究

目的探讨砷化物作用于人类正常肝细胞后金属硫蛋白-1F cDNA基因表达的变化。方法利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析,基因芯片方法检测染砷L-02细胞金属硫蛋白-1F基因的表达。结果成功克隆金属硫蛋白-1F cDNA基因,经生物信息学分析可知,该基因定位在人染色体16q13区段, 跨膜信息分析发现金属硫蛋白-1F基因编码蛋白质可以穿出生物膜,基因芯片结果证实染砷的人正常肝L-02 细胞在染砷早期金属硫蛋白-1F基因表达增高。结论发现人类金属硫蛋白-1F基因是砷化物作用的一个相关基因,早期参与了砷代谢解毒。     

恶性疟原虫裂殖子表面抗原MSA1第二区基因在大肠杆菌中的表达

目的 :在大肠杆菌中高效表达恶性疟原虫裂殖子表面抗原 MSA1- R2 ,进一步研究其生物学功能。方法 :将 MSA1- R2基因重组于 p WR4 50 I半乳糖苷酶融合蛋白表达载体中 ,转化大肠杆菌 ,酶切鉴定重组克隆。用 IPTG诱导 MSA1- R2融合蛋白的表达 ,对表达产物进行 SDS- PAGE、β-半乳糖苷酶活性、dot- ELISA和 Western- blot鉴定。结果 :表达产物占菌体总蛋白的 35%— 4 0 % ,相对分子量为 70 k Da,与半乳糖苷酶 - MSA1R2融合蛋白的理论分子量相符。IPTG诱导 4 h后 ,β-半乳糖苷酶活性可增高 10倍— 14倍 ,用 dot- EL ISA和 Western- blot均证实表达产物具有恶性疟原虫抗原表位。结论 :p WR4 50 -大肠杆菌表达系统可以高效表达具有免疫学活性的疟原虫蛋白。     

年龄对血清褪黑素水平及其昼夜节律性的影响

目的　研究年龄对中国成年男性血清褪黑素水平及其昼夜节律性的影响。方法　健康志愿者按年龄分为四组 :30～ 39岁组 (8例 )、40～ 49岁组 (5例 )、50～ 59岁组 (5例 )和≥ 60岁组 (7例 )。白天 (8～ 2 2时 )每 2 h、夜间 (2 2～ 8时 )每 1 h采血一次 ,放免法检测血清褪黑素浓度。采用 t检验、ANOVA及余弦法分析处理观测数据。结果　血清褪黑素水平呈明显的昼夜节律性变化 ,高峰在午夜 ,白天水平很低 ,采样时间对血清褪黑素水平具有非常显著性影响 (P<0 .0 1 )。余弦法血清 MT仅在 30～ 39岁和 40～ 49岁组中有显著昼夜节律性变化 (P<0 .0 5)。 30～ 50岁组血清褪黑素水平相似 ,≥ 60岁组夜间 (2 3～ 5时 )血清褪黑素水平明显降低 ,与 30～ 50岁组相比有非常显著性差异 (P<0 .0 1 )。结论　血清褪黑素水平及其昼夜节律性变化受年龄的影响 ,随年龄增长夜间血清褪黑素水平下降 ,并且其昼夜节律性 (50～ 59岁和≥ 60岁组 )消失。     

人工合成恶性疟原虫复合基因在大肠杆菌中的表达及产物的初步鉴定

将人工合成与构建的恶性疟原虫保护性抗原复合基因ＨＧＦＣ和ＨＧＦＣＡＣ分别与表达载体ｐＷＲ４５０－１重组并转化大肠杆菌ＪＭ１０９，工程菌经ＩＰＴＧ诱导后表达出含外源基因产物与β－半乳糖苷酶部分氨基酸的融合蛋白，分子量分别为６５ｋＤａ和７７ｋＤａ。免疫印迹分析显示表达产物可与兔抗恶性疟原虫ＲＥＳＡ多肽抗原的抗体发生特异性免疫反应，提示融合蛋白中含有恶性疟原虫抗原位点。     

自体骨髓移植后用粒细胞集落刺激因子致类白血病现象二例

自体骨髓移植后用粒细胞集落刺激因子致类白血病现象二例谢彦晖谢毅阎金玉刘均立重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）是近年来在临床推广使用的一种造血因子，具有白细胞动员和促进粒细胞增殖作用。我们发现在自体骨髓移植后使用ｒｈＧ－ＣＳＦ，不仅引起了白细胞...     

利钠肽类激素在心律失常后的变化

目的观察心房利钠肽（atrial natriuretic peptide，ANP）、脑钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）和C-型利钠肽（C-type natriuretic peptide，CNP）在心律失常后的变化，并探讨3者是否具有相关性。方法各种病因导致心律失常患者22例（NYHA心功能分级〈Ⅱ级），并设正常对照组20例，用竞争性放射免疫分析法测定血浆中ANP、BNP和CNP浓度。结果心律失常组血浆BNP较正常对照组明显升高，差异具有显著性（p〈0．01），而血浆ANP和CNP差异不具有显著性（p〉0．05）。心律失常组患者血浆ANP、BNP与CNP不具有相关性。结论无心力衰竭患者发作心律失常后血浆BNP可能明显升高，而血浆ANP与CNP浓度无明显变化。     

山东地区冠状动脉粥样硬化性心脏病患者3号染色体基因扫描研究

目的对冠心病患者及正常对照者的3号染色体进行扫描,查找与冠心病关联的遗传位点。方法在3号染色体上采用间隔为10?cM（厘摩）遗传距离的23个微卫星遗传标记,分别对156例冠心病患者和450名正常对照者的DNA混合池样本进行基因组扫描,采用CLUMP软件对比患者组与对照组等位基因频率的差异。结果在D3S1278（3q13.31）位点和D3S1300（3p14.2）位点患者组与对照组的等位基因频率差异有统计学意义（P<0.001）。结论山东地区冠心病患者群体中存在与3号染色体q13.31和p14.2区域的关联,致病基因或调控因子可能位于其附近。     

102例冠状动脉造影无狭窄病变的胸痛患者的临床分析

目的回顾性分析在我院行冠状动脉造影无明显狭窄病变的102例胸痛患者,探讨相关的临床资料,以进一步提高对此类胸痛患者的认识。方法总结自2003年12月～2007年3月冠脉造影无明显狭窄病变的102例胸痛患者,进行临床分析和造影结果再认识。结果 102例胸痛患者经冠脉造影后均排除冠心病诊断,其最后的临床诊断多种多样,以心脏神经症居多,占47例（46.07%）。回顾此类胸痛患者的造影示内膜光滑,无局限性狭窄,但大部分病例的冠状动脉呈迂曲,扭结,有血流缓慢等现象。结论冠脉无明显狭窄病变而有冠脉迂曲的病人可出现典型劳累型心绞痛、冠状T波、运动试验阳性、采用以β受体阻滞剂为主的抗心绞痛治疗有效等表现,临床上酷似冠心病,冠状动脉造影对这类患者的鉴别有特殊意义。     

经尿道前列腺电切术的并发症及其防治

目的探讨经尿道前列腺电切术（TURP）术中、术后常见并发症及其产生原因和处理方法,进一步提高手术安全性和有效性。方法回顾性分析1998—2008年我院726例TuRP治疗良性前列腺增生（BPH）的临床资料。并对发生各种并发症的原因及处理方法进行总结分析。结果本组无死亡病例。平均手术时间为83min,发生电切综合征（TURS）16例（2．2％）,术后出血8例（1．1％）,包膜穿孔尿外渗6例（0．8％）,暂时性尿失禁17例（2.3％）,未发生永久性尿失禁,排尿困难及尿道狭窄21例（3．0％）,尿路感染11例（1．5％）,性功能障碍30例（4．1％）。结论TURP是治疗BPH安全有效的外科治疗方法,其并发症大多与手术操作熟练程度及适应证选择有关。大部分并发症经及时正确处理．不会产生严重后果。